实验：培养液中酵母菌种群数量的变化

培养液中酵母菌种群数量的变化

方法步骤：

无菌马铃薯培养液配置：去皮马铃薯块200g 、20g葡萄糖、1000ml 水

1000ml水放入水浴锅中去皮马铃薯块200g 煮沸30min 玻璃棒搅拌防止糊底

30min后用双层纱布过滤，过滤时用玻璃棒引流过滤后的滤液补足水至1000ml。加葡萄糖作为无菌马铃薯培养液。

分装：

在A组试管中各注入10ml培养液，注意不要将培养液粘在试管口或试管的上端，以免引起污染。加棉塞。

在B 组试管中各注入10ml培养液。也注意不要将培养液粘在试管口或试管的上端。加棉塞。

在C组试管中分别加入10ml无菌水，并加棉塞。

分装完毕，把三组试管分扎成捆。每一组包一层牛皮纸或双层报纸，以防灭菌时冷凝水沾湿棉塞。灭菌前应贴上注明了培养基的名称、组别、日期的标签。刻度吸管也用报纸包好，以备灭菌。将三捆试管分别放入三个烧杯中。

灭菌：

将试管和刻度吸管都放到高压蒸汽灭菌锅内灭菌。灭菌时应注意安全。紧固螺栓，应对角拧紧。

灭菌后从锅中取出试管和刻度吸管。冷却一段时间再打开，以免烫伤。将试管放到试管架上。

接种：

用灭菌的1ml刻度吸管每次吸取0.1ml酵母菌母液，分别加入每只试管中。注意，每次加量不要太多，避免初始菌数过多。给每只试管贴上标签。（A1~A8、B1~B8、C1~C8。）

培养：

将A、C两组试管至于28℃恒温箱中培养。将B组试管至于5℃的恒温箱中培养。

取样：

每天取样时间大体一致，一般应在上课的时间进行取样。

将试管组从恒温箱中拿出，放在试验台上。将显微镜放在试验台上。通电，对光。酵母菌观察一般选用较暗视野。

准备三只干净试管。每次每组按序号取一只试管。计数过程中和培养一样，一定要遵守无菌操作规范。取样的吸管要干净且分开使用。每次取样前要震荡摇匀。

用刻度吸管将1ml酵母菌液移入一个干净的吸管。拿来盖玻片和血球计数板。将盖玻片盖在血球计数板的网格上。注意盖玻片的边缘留一点缝隙，以利于培养液渗入。然后用滴管将一滴培养液滴在盖玻片的边缘，让其自行渗入。

计数：

待培养液充满网格后，在放在显微镜下进行酵母菌计数。将数据记录填到表格中。并将三组试管放回到恒温箱中继续培养。以后七天重复取样，观察计数方法同第一天。本次试验数据如表所示：

在同一坐标纸上，分别画出A、B、C三个组的酵母菌种群数量动态变化曲线图。