革兰阴性杆菌产碳青霉烯酶表型检测及耐药性分析

［３王晓 瞳， 杰， １３ 李 刘 瑞 ， 非 小 细 胞 肺 癌 患者 血 清 Ｃ ２ 等． Ａ１ ５水 平
与 疾 病 进 展 时 间 的 相 关性 ［］ 临 床 肺科 杂 志 ，０ ２ ２ （ ） １０ Ｊ． ２ １ ，１ ２ ：５ ．
ｆ ２ －、 Ｅ、 ｒ １１ＮＳ 降钙 素检 测 诊 断 骨 转 移 的 ｌ 意 义 Ｅ ３ 中 国ｌ ａ 临床 Ｊ． 临床
为丝 氨 酸类 （ Ｃ Ｌ ）和金 属类 （ ＨＢ ｓ 两 大 Ｓ ＨＢ ｓ ＭＣ Ｌ ） 类 ， 同类 型 的 ＣＨＢ ｓ的特 性 不 同 ， 对产 生 不 同 不 Ｌ 针 Ｃ Ｌ 的细 菌抗 生素 的选择 也不 同 ， 测 出细 菌是 ＨＢ ｓ 检
麦 氏浊度 ， １ １： ０稀 释 、 棉 签 满 涂 布 于 ＭＨ 平 板 用
１ 材 料 与 方 法
１ ３ ３ 多底 物一 抑制剂 协 同法 分类 检测 碳 青霉 烯 ．． 多
酶 （ ＨＢ ｓ Ｃ ｌ）联合应 用 Ｅ Ｔ 克拉 维酸 （ Ｌ Ｄ Ａ、 Ｃ ＡＶ） 和
１ １ 菌 株 来 源 １ ５株 耐 碳青 酶 烯 类 抗 生 素病 原 ． １
菌分 离 于 ２ ０ ０ ９年 ６月 １日一２ １ ０ ０年 １ ２月 ３ １日临
Ｓ ｇ ｉｉａ ｃ ｆ ｓ ｒ ｍ ｉ ｎ ｆｃ ｎ ｅ ｏ ｅ ｕ ＣＡ１ ５ ａ ｔｇ ｎ ａ ｓ ｙ ｉ ａ ｉ ｎ ｓｗｉｈ ｎ ｎ ２ ｎ ｉ ｅ ｓ ａ ｎ ｐ ｔｅ ｔ ｔ ｏ 一
（ 稿 日期 ： Ｏ １ Ｏ ５ 收 ２ ｌ —１ 一２ ）
文 章 编 号 ：０ ７ ４ ８ （ ０ ２ ０ — ２ ７ ０ １ ０ — ２ ７ ２ １ ） ７１ ９ —２
一
细菌 鉴定 药敏 分析 系 统 进行 细 菌 鉴 定 药敏 分 析 ， 室
内质 控菌 株选 用 Ａ Ｃ ５ ２ 、 Ｃ ２ ８ ３ ＴＣ ２ ９ ２ ＡＴ Ｃ ７ ５ 。
１ ３ ２ 改 良 Ｈｏ ｇ 试 验 ＡＴＣ ２ ９ ２配 成 ０ ５ ． ． ｄｅ Ｃ ５２ ．
是 产生 各 种 碳 青 酶 烯 酶 （ ＨＢ ｓ ， ｃ Ｌ ） ＣＨＢ ｓ 分 Ｌ 可
３ 讨 论
近 年来 ， 内感 染病 原菌 的耐 药性 明显上 升 ， 院 尤
基 金项 目 ： 龙 江 省 卫 生 厅科 技计 划 项 目 （ ０ ９ １ ７ 黑 ２ ０—８ ）
其 铜绿 假单 胞菌 和鲍曼 不动 杆菌呈 多重 耐药 和泛耐
ＣｈｎＪ Ｌａ ａ ｎ，ｕ ｙ ２ ２， ｌ１ Ｎｏ ７ ｉ ｂ Ｄｉｇ Ｊ ｌ ， ０１ Ｖｏ ６， ．
中 国实 验 诊 断 学
２ １ 年 ７月 第 １ ０２ ６卷
第 ７期
—
１ ９ ２ ７ 一
ＥＯ韩 Ｉ３
亮， 王中彬 ， 宋丽 萍， 肺癌患者全身骨显像 联合血清 ｃ — 等． ｙ
ｓ ｌｃｌｌｎ ａｃｒＪ． ａ ｅ ，９４ ７ ：３ ８ ｍａ ｅ ｕｇｃｎ ｅＥ］ Ｃ ｎ ｒ１ ９ ：３ １６ ． ｌ ｌ
表 ２ ４ 细 菌 ３种 酶 抑 制 剂 的检 测 结 果 （ 数 ） 种 例
因此 临床微 生物 室及时检 测 耐碳青 霉烯类 抗 生素碳 青霉烯 酶 （ ＲＥ 类型 、 时 发布 院内 Ｃ Ｃ ） 及 ＲＥ细 菌感 染 的信 息 ， 态监测 直 至未有新 的 Ｃ Ｅ定 植或 感染 病 动 Ｒ
１
参考文献 ：
表 ３ 多底 物 一 多抑 制剂 协 同法 分 类 检 测 Ｃ Ｂｓ 果 （ 数 ） Ｈ Ｉ结 例
［］ 俊丽． 国 ２ １张 我 ８家 医 院 分 离 的 铜 绿 假 单 胞 菌 对 碳 青 霉 烯 类 抗 生 素 耐 药 性及 同 源性 分 析 ［ ］ 浙 江 大 学 ，０ ９ Ｄ． ２０． ［］ ２王 瑶 。 英春 ， ． ０ ４２０ 徐 等 ２ ０ —０５年 中 国 Ｃ ＮＥ ＨＩ Ｔ鲍 氏不 动 杆 菌 耐
上， 同纸 片扩散 法药 敏试 验一样 ， 中心加 美罗 培南 在
纸片、 取待 测菌 口 从纸 片边 缘 向外划 （ １ ｌ 用 接种 环 ） 培养 过夜 、 、 大肠 沿 着 菌 株划 线 的生 长 表 明碳 青 霉 稀 水 解 酶 产 生 。室 内 质 控 菌 株 选 用 ＡＴＣ Ｃ
革 兰 阴性 杆 菌 产 碳 青 霉 烯 酶 表 型检 测 及 耐 药 性 分 析
邹桂玲 ， 雪 飞 ， 杜 孙 哲 ， 晓 玉 ， 国 玉 孟 陈
（ 哈尔 滨 医科 大 学 附 属第 四 医 院 检验 科 ， 龙 江 哈 尔 滨 １ ０ ０ ） 黑 ５ ０ １
随着碳 青 酶烯类 抗 生 素 （ ＡＢ 的 应 用增 多 ， Ｃ ） 细
药 口 。由于 碳 青 霉 烯 类 （ａｂ ｐ ｎ ｍｓ 抗 生 素 相 Ⅱ ｃｒ ａ ｅ ｅ ） 对 其 它抗 菌药 物 更 耐 酶 ， 高 效 、 广 谱 的抗 菌 作 具 更 用， 已成 为治疗 院 内严 重 感 染 、 重 耐药 菌 感 染 、 多 混
合感 染 的有效 抗菌 药 物 ， 随 着碳 青 霉 烯 类抗 生 素 但 大量 应用 ， 目前耐碳 青 霉 烯 类抗 生 素 的铜 绿假 单 胞 菌 和 鲍曼 不 动 杆 菌 不 断增 多 ， 碳 青 霉烯 类 抗 耐
２ 结 果
床送 检标 本 的中 ， 中克 雷 伯 菌属 ３ 其 １株 ， 单胞 菌 假
属 ２ ２株 ， 不动杆 菌属 ５ ０株 ， 它 １ 其 ２株 。
１培 养 基 为美 国 Ｂ Ｈ Ｄ公
司产 品 ， 用抗 生素纸 片 亚胺培 南 （Ｐ 所 Ｉ Ｍ） 美 罗 培南 、 （ Ｍ） 头孢 他 啶／ 拉 维 酸 （ ＡＣ 、 孢 哌 酮／ ＭＥ 、 克 Ｃ ）头 舒 巴坦 （ Ｃ ） 为 ０ ｏｄ公 司产 品 。Ｅ ＴＡ 纸片 系临 ＳＦ均 ｘｉ Ｄ 用时 将 ０ ５ｍｏ Ｅ Ｔ 水 溶液 １ １ 在 纸片上 。 ． ｌ Ｄ Ａ ０肚 加
性 研 究 ［］ 中华 微 生 物 学 和 免 疫学 杂 志 ，０ ８ １ Ｊ． ２ ０ ，．
［］ ｏ ｇＤ， ｅ Ｙｕ Ｈ，ｔ １Ｉ ｐｎ ｍ Ｄ ｉｋｍｅｈ ｄｆｒ ５ Ｙ ｎ Ｌ ｅＫ， ｍ Ｊ ｅ ．ｍｉｅ ｅ Ｅ ＴＡ ｄｓ ｔｏ ｏ ａ
ｄ ｆｅ ｅ ｔａ ｉ ｎ ｏ ｔ ｌ ２ ｌ ｃ ａ ａ ｅ ｐ ｏ ｕ ｉ ｇ ｃｉ ｃ ｌ ｉｏ ａ ｅ ｉ ｒ ｎ ｉｔｏ ｆｍｅ ａ ｌ ｅ ａ ｔ ｍ ｓ ｒ ｄ ｃ ｎ ｌ ａ ｓ ｌ ｔ ｓ ｆ ｏ ｎｉ
Ｂ Ｄ公 司） 中 国兰 平 板 （ 州 天 和 公 司） 巧 克 力 平 、 杭 、
１５抹碳青 酶 烯类抗 生素 耐药 的临 床 分离 株 产 １
中， ５ 有 Ｏ株 产丝 氨酸 类 （ ＣＨＢ ｓ Ｓ Ｌ ）碳 青 酶烯 酶 ， 无 金 属类 （ ＭＣＨＢ ｓ Ｌ ）碳青霉 烯 酶见表 ３ 。
舒 巴坦 （ ＵＬ 种酶抑 制剂 ， 邻纸 片 间距 离 １ —１ Ｓ ） 相 ０ ５ ｍｍ， ５ ３ ℃孵 育 １ — １ ． 果 判 定 ：Ｐ 和 （ ） ６ ８ｈ 结 ＩＭ 或
ＭＥ 与 Ｓ Ｆ和 （ Ｃ Ｍ Ｃ 或） ＡＣ协 同为 Ｓ ＣＨＢ ｓ Ｉ Ｍ 和 Ｌ ；Ｐ （ ） Ｍ 与 Ｅ ＴＡ 协 同 为 ＭＣ Ｌ 。 或 ＭＥ Ｄ ＨＢ ｓ
药 分 析 ［］ 中 国感 染 控 制杂 志 ，０ ７ ７ ４ ． Ｊ． ２ ０ ，（ ） Ｅ］ 炜 伯 ， 语 星 ， ． 绿 假 单 胞 菌 耐 碳 青 霉烯 抗 菌药 机 制 ［］ 微 ３张 倪 等 铜 Ｊ．
生 物 与 感 染 ， ０ ８，． ２ ０ ６
［］ 铁 丽 ， ． ４周 等 ５年 间鲍 曼 不 动 杆 菌 产 碳 青 霉 烯 酶 特 性 与 耐 药 相 关
医 学 影 像 杂 志 ，０ Ｉ ２ （ ） １６ ２ １ ，２ ３ ：８ ．
Ｅ １ 王火 强 ， Ｉ３ 郑金旭 ， 李 梅． 术前 Ｃ ｆａ １１水 平用于早 期非小 细 ｙｒ２—
胞 肺 癌 患 者 预后 评 估 Ｅ３ 临床 检 验 杂 志 ，０ １ ２ （） １ ６ Ｊ． ２ １ ，９ ３ ：７ ．
Ｏ
Ｏ
Ｏ
Ｏ
克雷 伯 菌 属
铜 绿
３ １
１ ９
２ １
２ ２ １
例 出现 ， 以降低 患病率 和死 亡率 。
作者简介 ： 邹桂 玲 （９ ７ ， １６ 一） 副主 任 技 师 ， 事 临 床 微 生物 学 从
检验 。
不动 杆 菌 属 ５ Ｏ
恶臭 假 单 胞
３
１ ３ 方 法 ．
１ ５株碳 青酶 烯类抗 生 素耐 药 的 临床 分离 株 进 １ 行 表 型检测 中 ， ７ 有 ２株 改 良 Ｈｏ ｇ 试验 结果 阳性 ， ｄｅ 为产碳 青霉 烯酶 ， 见表 １ ４种 细 菌 的 ３种 酶 抑 制 剂 ； 的检测 结果 ， 见表 ２ 。 ’
１ ３ １ 细 菌培养 鉴定 及药 敏试 验 将 临床 送检 标 ． ． 本 根 据 种 类 分 别 接 种 哥 伦 比 亚 血 琼 脂 平 板 （ 国 美
ＫＰ 一 ｃ２型碳 青霉 烯酶 ＿ ， Ｃ型 碳 青 霉 烯 酶基 因位 ８ ＫＰ ］
Ｏ ０ Ｏ ０
于可移 动 的质粒 上 ， 以通 过 质粒 、 可 整合 子 、 人 序 插 列 的基 因元件 进行 水平传 播 ， 成爆 发 流行 ， ｏｖ ｃ 造 Ｃ ｒｅ
等研究 发现 ｌＯ Ｕ Ｏ ０ Ｏ ｂａ ＸＡ基 因位 于耐碳 青霉烯 鲍曼 不动 杆 菌 的质粒上 ， 较位 于染 色体上 更容 易发 生播 散ｌ 。 ｇ ］
板（ 国 Ｂ 美 Ｄ公 司） 行 培养 ， 分 离 到 的单 个 菌 落 进 将 进行 纯培 养 ， 后 利 用 复 星 公 司 Ｆ 然 ＯＵＴＵＮ ． ＭＳ Ｅ １
菌对 Ｃ ＡＢ 的耐 药性 也在 不 断增 加 ， 而且 Ｃ ＡＢ 细菌
（ Ｃ ） 多数 呈 多 重 耐 药 ， 就 给 临床 治 疗 造 成 Ｒ ＡＢ 大 这 极大 困难 。革 兰 阴性 菌 对 Ｃ ＡＢ 耐药 的 主要 机 制 之
ＢＡ Ａ １ ０ ７ ５。
否产 生碳 青霉 烯酶 ， 产生 哪类碳 青 霉烯 酶 ， 导临床 指 更合 理 的联合应 用抗 生素 ， 降低 多重 耐药 菌 的流行 ， 提 高治疗 效果 。现对 我 院分离 的 １ ５株 耐碳 青酶烯 １
类抗 生 素的革 兰 阴性 杆 菌进行 分析 ， 报告 如下 。
［４汪开 明， 春 ， 云芝 ， 肺癌患者血清 Ｃ ２ １］ 青 朱 等． Ａ１５水 平 变 化 临 床 意 义 ［３ 中华 实 用 诊 断 与 治 疗 杂 志 ，０ ０ ２ （） ９ ９ Ｊ． ２ １ ，４ ９ ：１ ．
［ ２ Ｍａ ｕｌＤｅ ， ｔｎｏＴｏｒｓ ＭａｉａＰ ｌ ｎ ｅ ａ． ｒｇ ｏｔ １ ３ ｎ ｅ ｉｚ Ａｎｏ ｉ ｒｅ ， ｒ ｏｌ ，ｔ １Ｐ ｏ ｎ ｓｉ ｎ ａ ｃ
从而 对多 种抗菌 药 物耐 药 ， 临床 治疗 带 来 了一定 给 的 困难 ， 报道 国 内外 耐碳 青 霉 烯 鲍曼 不 动 杆 菌产 据
生 的碳 青 霉 烯酶 主要 为 ＯＸ ２ Ａ～３型 ］］ 有 研 究 显 。 ７， ｒ
Ｏ Ｏ Ｏ
示碳 青 霉 烯 类 敏 感 性 下 降 的 肺 炎 克 雷 伯 菌 均 产
表 １ 碳青酶烯类抗生素耐药菌的改良 Ｈ ｄｅ ｏ ｇ
和（ ） Ｒ与 Ｅ Ａ 或 ２ 或 ＭＥ ＤＴ ＭＡ 纸 片 间出现协 同 。
试验结果 （ 数 ） 例
产Ｓ ＣＨＢ ｓ ｌ 型碳青 霉烯 酶是 目前 引起革 兰 阴性 菌对 碳青霉 烯类抗 生 素 耐药 的主 要原 因 ， 碳 青 霉烯 酶 产 的菌株 对碳 青霉 烯 类抗 生 素 常 表现 为 敏 感 性下 降 ，