中药化学课件---第二章中药化学成分提取分离方法
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(1)质子宽带去偶（BBO）: 也叫全氢去 偶（COM）. 噪音去偶.
采用宽频电磁辐射照射所有1H核使之饱和后测得的 13C- NMR谱（即去掉所有氢核对碳核的偶合影响）。
40
特征：图谱简化，每个碳原子都为单峰，互不
重叠。
方便于判断碳信号的化学位移。
伯、仲、叔碳峰增强，季碳为弱峰（照射1H核
9
特点：具有液体和气体的双重特性，
如：密度与液体近似 黏度与气体近似 扩散系数是液体 的100倍
对很多物质有很强 的溶解能力
中药提取常用的超临界流体 ：二氧化碳
10
优点：
1.临界温度（Tc=31.4）接近室温, 热敏成 分稳定. 2.临界压力（Pc=7.37 MPa）不高, 易操作. 3.本身呈惰性，与化合物不反应. 4.价格便宜.
溶解范围广 穿透能力强 易得、安全
生物碱盐 苷类 糅质 糖类 氨基酸 蛋白质
煎煮法
渗漉法
3
有些苷类成分的酶解 有些脂溶性成分溶解不完全 水提液易发霉、变质 水溶性杂质多，过滤困难 沸点高，浓缩困难
4
亲水性有机溶剂
（和水可任意混溶） 溶解范围广 水溶性杂质溶出少 乙醇 可抑制酶的活性 提取液不易发霉、变质 大部分可回收利用 但有挥发性、易燃烧 除多糖、 蛋白质外 大多数 化学成分 均可溶解 渗滤法 浸渍法 回流法 连续回流法
产生NOE效应）
无法区别碳上连接的1H核数目。
41
（2）偏共振去偶：（此法现已基本上被 DEPT所替代）
仅保留直接与碳原子相连1H核对碳的偶合J 1CH （即去掉氢核对碳核的远程偶合J 2CH J 3CH）
14
物理吸附（表面吸附） 无选择性、吸附 可逆、可快速进行，应用较多
吸 附 性 差 别
硅胶 氧化铝 活性炭 化学吸附
极性吸附剂 极性吸附剂 吸附性差别 非极性吸附剂 有选择性、吸附牢固或不可 逆、洗脱难， 应用较少 半化学吸附 吸附力介于上述二者之间
15
吸 附 性 差 别
碱性氧化铝对酚酸类（黄酮、蒽醌）的吸附 酸性硅胶对生物碱的吸附 聚酰胺 （氢键吸附） 大孔吸附树脂 吸附原理（范德华引力或产生氢键） 分子筛原理（本身多孔性结构的性质决定的）
4000
3600
3000
1500
1000
625cm-1
特征频率区 特征官能团的鉴别
指纹区
29 化合物真伪的鉴别
羟基（酚羟基、醇羟基） 3600~3200 cm-1 游离羟基 ~3600 cm-1 氢键缔合羟基 3400~3200 cm-1 羰基 1600~1800 cm-1 酮 ~1710 cm-1 酯1710~1735 cm-1 芳环 1600、1580、1500cm-1 有2~3个峰 双键 1620~1680 cm-1
算，13C信号将不断增强，噪音则越来越弱。
经过若干次的扫描及累加计算，最后即得到
一张好的NMR谱。由于该装臵的出现及计算机 的引入，才使得13C-NMR用于有机化合物结构 研究成为可能。
信息参数：化学位移（δC）、异核偶合常数
（JCH）、驰豫时间（T1）
38
(1)
化学位移：大致范围 (δC ） 0-200ppm
16
分 子 大 小 差 别
透析法 (半透膜膜孔的 分子筛作用) 凝胶滤过法 (三维网状 结构的分子筛作用) 超滤法 (分子大小不 同引起的扩散速度的 差别) 超速离心法 (溶质在 超速离心作用下沉降 性的差别)
蛋白质的脱盐精制 蛋白、多糖的分离及 小分子化合物的分离 大分子化合物精制分离 同上
17
25
三、结构研究
化合物纯度的判定方法 1．结晶均匀、一致。 2．熔点明确、敏锐（0.5~1.0℃） 3．TLC (PPC):三种以上不同展开剂展开， 均呈现单一斑点。 4．HPLC、GC也可以用于化合物纯度的判断。
26
（二）四大光谱在结构测定中的应用
紫外 — 可见光谱（UV -VIS）—— 共轭 体系特征 分子中电子跃迁（从基态至激发态）。 n-π*、π-π* 跃迁可因吸收紫外光及 可见光所引起，吸收光谱将出现在光的紫 外区和可见区（200～700nm）
35
1H-NMR核磁共振辅助技术： （1）重氢 (D2O) 交换 —— 推断活泼质子 （羟基）的存在与否 （2）核增益效应（NOE）：指在核磁共振中选 择性照射一种质子使其饱和，则与该质子在 立体空间位臵上接近的另一或数个质子信号 强度增高的现象。 （3）溶剂位移：苯诱导位移 ——由于溶剂分 子（苯）的接近，对化合物将发生不同的屏 蔽及去屏蔽作用，使质子化学位移发生变化 的现象。
电子云密度小，处于高场，δ值大
31
~0.9-C-CH3
常见结构的化学位移大致范围 ~2.1-COCH 3 （要求熟记）
~3.0-NCH3 -CHO -COOH Ar-H
(δ
~1.8-C=C-CH3
~3.7-OCH3 -C=C-H
11
10
9
8
7
6 5 (δppm)
4
3
2
1
0
推断化合物的结构（含1H核基团的结构）
第二章
中药化学成分提取分离方法
1
一、中药化学成分的提取
(一)溶剂提取法
依据：化学成分的溶解性（极性）
关键：提取溶剂的选择
溶剂的选择原则：相似相溶的原则，
价廉、易得、无毒、安全等。
提取方法：浸渍法、渗漉法、煎煮法、
回流提取法、连续回流提取法。
2
常用提取溶剂性能特点
提取溶剂 强极性溶剂 水 性能特点 适宜提取成分 提取方法
5
甲醇 溶解特点与乙醇相似，但有毒
丙酮 溶解性能同乙醇，但沸点低、易挥发，
不常于提取溶剂；对色素溶解性好， 常用于分离、精制。
6
亲脂性有机溶剂
对化合物溶解选择性较强
水溶性杂质少、易纯化 挥发性大、易燃烧 有毒、价格昂贵， 对提取设备要求高 穿透力较弱，提取时间长 作为提取溶剂不常用 苷元 某些苷类 游离生物碱
7
连续回流法 回流法
。
乙醚 氯仿
bp.35℃，极易燃
bp.61℃、d 1.48，不易燃，毒性大 对生物碱溶解性好
苯 bp.80.1℃，毒性大 石油醚 沸程30～60℃、60～90℃、
90～120℃ 脱脂、脱色
8
（二）水蒸气蒸馏法
适用于挥发性成分（主要 是挥发油）的提取 （三）二氧化碳超临界流体萃取技术（CO2-SFE） CO2-SFE ：以超临界流体作为萃取 介质的一种提取新技术。 超临界流体：处于临界温度（Tc）、临界压力 （Pc）以上，介于气体与液体之间 的流体。
200nm
400
紫外区（UV）
700nm
可见区（VIS）
27
应用：
推断化合物的骨架类型——
共轭系统。
取代基团的推断。如加入诊断试剂推断黄酮
的取代模式（类型、数目、排列方式）
用于含量测定（以最大吸收波长作为检测波
长进行含量测定）。
28
红外光谱（IR）
分子中价键的伸缩及弯曲振动所引起的吸收而测 得的吸收图谱，称为红外光谱。
11
超临界流体萃取中药成分的主要优点：
1. 可以在接近室温下工作，防止热敏成分 的破坏或逸散。 2. 萃取过程几乎不用有机溶剂，萃取物中 无溶剂残留，对环境无污染。 3. 提取效率高，节约能耗。
12
二．中药化学成分分离与精制方法
分离依据 分 配 系 数 （ ） 差 异 分离方法 分离原理或特点
二相萃取法 逆流分溶法（CCD） 液滴逆流色谱法（DCCC） 高速逆流色谱法（HSCCC） 液-液分配柱色谱 正相色谱和反相色谱 加压液相色谱法 正相色谱和反相色谱 快速色谱 低压液相色谱（LPLC） 中压液相色谱（MPLC） 高压(效)液相色谱法（HPLC）
两个化合物完全相同的条件 1、 特征区完全吻合 2、 指纹区也需完全一致
1H-NMR（核磁共振氢谱）: 信息参数：化学位移（δ）、峰面积、峰裂分 （s 、d、t、q、m）及偶合常数（Ј）
30
（1）化学位移（δppm）:
与1H核所处的化学环境（1H核周围的
电子云密度）有关
电子云密度大，处于高场，δ值小
13
K
溶解度差异
溶ຫໍສະໝຸດ Baidu解 度 差 异
溶剂沉淀法 水提醇沉法（水/醇法） 醇提水沉法（醇/水法） 醇/醚（丙酮）法 酸/碱法 碱/酸法 试剂沉淀法 钙、钡、铅盐沉淀法 生物碱沉淀试剂沉淀法 结晶及重结晶
除去多糖、蛋白质等水溶性杂质 除去树脂、叶绿素等脂溶性杂质 皂苷的纯化（除去脂溶性杂质） 生物碱的分离纯化 酸性成分（如苷元）的分离纯化 酸性成分的分离 生物碱的分离纯化 化合物的进一步精制
氧化铝 活性炭
吸附原理 吸附原理
非极性吸附剂 从稀水溶液中富集微量物质 吸附规律与上相反 脱色（脂溶性色素）
19
聚酰胺
氢键吸附 酚羟基数目多，吸附力强 能形成分子内氢键者，吸附力下降 黄酮、蒽醌的芳香化程度高 吸附力增强
水洗脱力弱
20
大孔吸附树脂
吸附原理 非极性化合物易被非极性树脂 吸附---糖与苷的分离 分子筛原理 在溶剂中溶解度增大，吸附力 下降（从水提液富集苷类） 非极性树脂，极性小的溶剂洗脱力强
21
液-液分配色谱（分配原理）
类 型 固定相 流动相 应 用
正相色谱
水 > BAW系统
极性、中极性物质分离
（以PPC为例）
反相色谱 ODS<甲醇-水 乙腈-水 最广泛，非极性、
中极性各类物质分离
22
加压液相色谱
类 型
分析用高压液相色谱（HPLC） 制备用高压液相色谱（HPLC） 中压液相色谱 ( MPLC ) 低压液相色谱 ( LPLC ) 5.05～20.2 ×105 < 5.05 ×105
压 力（Pa）
> 20.2 ×105
分离规模
1mg左右 > 5mg > 100mg 10mg～1g
快速色谱
约2.02 ×105
> 10mg
23
葡聚糖凝胶色谱
类 型 葡聚糖凝胶 原 理 溶胀溶剂 分子筛 水 （大→小） 应 用 多糖、多肽、 蛋白质分离
羟丙基 分子筛 水、极性 适于不同类型 葡聚糖凝胶 （糖苷） 有机溶剂 吸附原理 或二者的混合溶剂 （苷元） 化合物分离
不同系统偶合常数 (J Hz) 大小
33
芳环
双键
J邻6~10Hz J间 0~3Hz J对0~1Hz J顺7~11 Hz J反12~18 Hz
饱和烃类相邻碳原子上质子偶合常数的大小 与两个氢原子之间的立体夹角θ有关
34
θ=60°
J = 2－4 Hz θ=180° J = 9－10 Hz 环己烷及其类似物相邻碳原子上质子的偶合 常数 Jaa 10－13Hz ( θ=180°) Jae 2－5Hz ( θ=60°) Jee 2－5Hz ( θ=60°)
32
（二）峰面积: 磁等同质子的数目 —— 用积分曲线面积（高度）表示 （三）峰裂分及偶和常数:
磁不等同两个或两组1H核在一 定距离内相互自旋偶合干扰， 发生的分裂所表现出的不同裂分 峰裂分的数目 符合 n+1 规律 ( n = 磁等同质子的数目 ) s d t q m 单峰 双峰 三重峰 四重峰 多重峰 峰裂分的距离 用偶合常数（J）表示
36
13C-NMR（
核磁共振碳谱 ）：
FT-NMR: 即脉冲傅里叶变换核磁共振。其装 臵原理为采用强的脉冲照射使分子中所有的
13C
核同时发生共振，生成在驰豫期内表现为
指数形式衰减的正弦波信号（自由诱导衰减； FID）经傅里叶变换即成为正常的NMR 信号。
37
随着脉冲扫描次数的增加及计算机的累加计
24
离子交换吸附树脂
树脂类型
阳离子交换树脂
原理
离子交换
应 用
从酸水溶液中吸附碱性 成分（生物碱） 除去酸性、中性成分
强酸性（R-SO3-H+） 阳离子 弱酸性（-COO-H+）
阴离子交换树脂
离子交换
从碱水溶液中吸附酸性
成分（有机酸） 除去碱性、中性成分
强碱性（RN+(CH3)3CI-） 阴离子
弱碱性 (伯、仲、叔胺)
离 离子交换树脂法 解 程 度 阳离子交换树脂 不 阴离子交换树脂 同
氨基酸、生物碱、 有机酸的分离
18
常用色谱分离方法介绍 ：
吸附剂
硅胶
分离原理
吸附原理
吸附色谱 吸附规律
应
用
弱酸性、极性吸附剂 广泛（酸、碱及 化合物极性越大、 中性成分均可） 吸附能力强（难洗脱） 溶剂极性越小，吸附力越强 碱性、极性吸附剂 吸附规律同上 碱性、中性成分 （酸性成分与铝络合）
不同 13C 核δC大小与13C 核所处的化学环境（周围 电子云密度）有关
主要结构13C 核δC的大致范围 ( 要求熟记 ) 饱和碳原子（0~60） c=c Ar 50~80 (c-o) 150~220( c=o)
200
150
100
50
( δC ppm )
0
39
用于13C 核类型的推断
常用13C- NMR测定技术及其特征：
采用宽频电磁辐射照射所有1H核使之饱和后测得的 13C- NMR谱（即去掉所有氢核对碳核的偶合影响）。
40
特征：图谱简化，每个碳原子都为单峰，互不
重叠。
方便于判断碳信号的化学位移。
伯、仲、叔碳峰增强，季碳为弱峰（照射1H核
9
特点：具有液体和气体的双重特性，
如：密度与液体近似 黏度与气体近似 扩散系数是液体 的100倍
对很多物质有很强 的溶解能力
中药提取常用的超临界流体 ：二氧化碳
10
优点：
1.临界温度（Tc=31.4）接近室温, 热敏成 分稳定. 2.临界压力（Pc=7.37 MPa）不高, 易操作. 3.本身呈惰性，与化合物不反应. 4.价格便宜.
溶解范围广 穿透能力强 易得、安全
生物碱盐 苷类 糅质 糖类 氨基酸 蛋白质
煎煮法
渗漉法
3
有些苷类成分的酶解 有些脂溶性成分溶解不完全 水提液易发霉、变质 水溶性杂质多，过滤困难 沸点高，浓缩困难
4
亲水性有机溶剂
（和水可任意混溶） 溶解范围广 水溶性杂质溶出少 乙醇 可抑制酶的活性 提取液不易发霉、变质 大部分可回收利用 但有挥发性、易燃烧 除多糖、 蛋白质外 大多数 化学成分 均可溶解 渗滤法 浸渍法 回流法 连续回流法
产生NOE效应）
无法区别碳上连接的1H核数目。
41
（2）偏共振去偶：（此法现已基本上被 DEPT所替代）
仅保留直接与碳原子相连1H核对碳的偶合J 1CH （即去掉氢核对碳核的远程偶合J 2CH J 3CH）
14
物理吸附（表面吸附） 无选择性、吸附 可逆、可快速进行，应用较多
吸 附 性 差 别
硅胶 氧化铝 活性炭 化学吸附
极性吸附剂 极性吸附剂 吸附性差别 非极性吸附剂 有选择性、吸附牢固或不可 逆、洗脱难， 应用较少 半化学吸附 吸附力介于上述二者之间
15
吸 附 性 差 别
碱性氧化铝对酚酸类（黄酮、蒽醌）的吸附 酸性硅胶对生物碱的吸附 聚酰胺 （氢键吸附） 大孔吸附树脂 吸附原理（范德华引力或产生氢键） 分子筛原理（本身多孔性结构的性质决定的）
4000
3600
3000
1500
1000
625cm-1
特征频率区 特征官能团的鉴别
指纹区
29 化合物真伪的鉴别
羟基（酚羟基、醇羟基） 3600~3200 cm-1 游离羟基 ~3600 cm-1 氢键缔合羟基 3400~3200 cm-1 羰基 1600~1800 cm-1 酮 ~1710 cm-1 酯1710~1735 cm-1 芳环 1600、1580、1500cm-1 有2~3个峰 双键 1620~1680 cm-1
算，13C信号将不断增强，噪音则越来越弱。
经过若干次的扫描及累加计算，最后即得到
一张好的NMR谱。由于该装臵的出现及计算机 的引入，才使得13C-NMR用于有机化合物结构 研究成为可能。
信息参数：化学位移（δC）、异核偶合常数
（JCH）、驰豫时间（T1）
38
(1)
化学位移：大致范围 (δC ） 0-200ppm
16
分 子 大 小 差 别
透析法 (半透膜膜孔的 分子筛作用) 凝胶滤过法 (三维网状 结构的分子筛作用) 超滤法 (分子大小不 同引起的扩散速度的 差别) 超速离心法 (溶质在 超速离心作用下沉降 性的差别)
蛋白质的脱盐精制 蛋白、多糖的分离及 小分子化合物的分离 大分子化合物精制分离 同上
17
25
三、结构研究
化合物纯度的判定方法 1．结晶均匀、一致。 2．熔点明确、敏锐（0.5~1.0℃） 3．TLC (PPC):三种以上不同展开剂展开， 均呈现单一斑点。 4．HPLC、GC也可以用于化合物纯度的判断。
26
（二）四大光谱在结构测定中的应用
紫外 — 可见光谱（UV -VIS）—— 共轭 体系特征 分子中电子跃迁（从基态至激发态）。 n-π*、π-π* 跃迁可因吸收紫外光及 可见光所引起，吸收光谱将出现在光的紫 外区和可见区（200～700nm）
35
1H-NMR核磁共振辅助技术： （1）重氢 (D2O) 交换 —— 推断活泼质子 （羟基）的存在与否 （2）核增益效应（NOE）：指在核磁共振中选 择性照射一种质子使其饱和，则与该质子在 立体空间位臵上接近的另一或数个质子信号 强度增高的现象。 （3）溶剂位移：苯诱导位移 ——由于溶剂分 子（苯）的接近，对化合物将发生不同的屏 蔽及去屏蔽作用，使质子化学位移发生变化 的现象。
电子云密度小，处于高场，δ值大
31
~0.9-C-CH3
常见结构的化学位移大致范围 ~2.1-COCH 3 （要求熟记）
~3.0-NCH3 -CHO -COOH Ar-H
(δ
~1.8-C=C-CH3
~3.7-OCH3 -C=C-H
11
10
9
8
7
6 5 (δppm)
4
3
2
1
0
推断化合物的结构（含1H核基团的结构）
第二章
中药化学成分提取分离方法
1
一、中药化学成分的提取
(一)溶剂提取法
依据：化学成分的溶解性（极性）
关键：提取溶剂的选择
溶剂的选择原则：相似相溶的原则，
价廉、易得、无毒、安全等。
提取方法：浸渍法、渗漉法、煎煮法、
回流提取法、连续回流提取法。
2
常用提取溶剂性能特点
提取溶剂 强极性溶剂 水 性能特点 适宜提取成分 提取方法
5
甲醇 溶解特点与乙醇相似，但有毒
丙酮 溶解性能同乙醇，但沸点低、易挥发，
不常于提取溶剂；对色素溶解性好， 常用于分离、精制。
6
亲脂性有机溶剂
对化合物溶解选择性较强
水溶性杂质少、易纯化 挥发性大、易燃烧 有毒、价格昂贵， 对提取设备要求高 穿透力较弱，提取时间长 作为提取溶剂不常用 苷元 某些苷类 游离生物碱
7
连续回流法 回流法
。
乙醚 氯仿
bp.35℃，极易燃
bp.61℃、d 1.48，不易燃，毒性大 对生物碱溶解性好
苯 bp.80.1℃，毒性大 石油醚 沸程30～60℃、60～90℃、
90～120℃ 脱脂、脱色
8
（二）水蒸气蒸馏法
适用于挥发性成分（主要 是挥发油）的提取 （三）二氧化碳超临界流体萃取技术（CO2-SFE） CO2-SFE ：以超临界流体作为萃取 介质的一种提取新技术。 超临界流体：处于临界温度（Tc）、临界压力 （Pc）以上，介于气体与液体之间 的流体。
200nm
400
紫外区（UV）
700nm
可见区（VIS）
27
应用：
推断化合物的骨架类型——
共轭系统。
取代基团的推断。如加入诊断试剂推断黄酮
的取代模式（类型、数目、排列方式）
用于含量测定（以最大吸收波长作为检测波
长进行含量测定）。
28
红外光谱（IR）
分子中价键的伸缩及弯曲振动所引起的吸收而测 得的吸收图谱，称为红外光谱。
11
超临界流体萃取中药成分的主要优点：
1. 可以在接近室温下工作，防止热敏成分 的破坏或逸散。 2. 萃取过程几乎不用有机溶剂，萃取物中 无溶剂残留，对环境无污染。 3. 提取效率高，节约能耗。
12
二．中药化学成分分离与精制方法
分离依据 分 配 系 数 （ ） 差 异 分离方法 分离原理或特点
二相萃取法 逆流分溶法（CCD） 液滴逆流色谱法（DCCC） 高速逆流色谱法（HSCCC） 液-液分配柱色谱 正相色谱和反相色谱 加压液相色谱法 正相色谱和反相色谱 快速色谱 低压液相色谱（LPLC） 中压液相色谱（MPLC） 高压(效)液相色谱法（HPLC）
两个化合物完全相同的条件 1、 特征区完全吻合 2、 指纹区也需完全一致
1H-NMR（核磁共振氢谱）: 信息参数：化学位移（δ）、峰面积、峰裂分 （s 、d、t、q、m）及偶合常数（Ј）
30
（1）化学位移（δppm）:
与1H核所处的化学环境（1H核周围的
电子云密度）有关
电子云密度大，处于高场，δ值小
13
K
溶解度差异
溶ຫໍສະໝຸດ Baidu解 度 差 异
溶剂沉淀法 水提醇沉法（水/醇法） 醇提水沉法（醇/水法） 醇/醚（丙酮）法 酸/碱法 碱/酸法 试剂沉淀法 钙、钡、铅盐沉淀法 生物碱沉淀试剂沉淀法 结晶及重结晶
除去多糖、蛋白质等水溶性杂质 除去树脂、叶绿素等脂溶性杂质 皂苷的纯化（除去脂溶性杂质） 生物碱的分离纯化 酸性成分（如苷元）的分离纯化 酸性成分的分离 生物碱的分离纯化 化合物的进一步精制
氧化铝 活性炭
吸附原理 吸附原理
非极性吸附剂 从稀水溶液中富集微量物质 吸附规律与上相反 脱色（脂溶性色素）
19
聚酰胺
氢键吸附 酚羟基数目多，吸附力强 能形成分子内氢键者，吸附力下降 黄酮、蒽醌的芳香化程度高 吸附力增强
水洗脱力弱
20
大孔吸附树脂
吸附原理 非极性化合物易被非极性树脂 吸附---糖与苷的分离 分子筛原理 在溶剂中溶解度增大，吸附力 下降（从水提液富集苷类） 非极性树脂，极性小的溶剂洗脱力强
21
液-液分配色谱（分配原理）
类 型 固定相 流动相 应 用
正相色谱
水 > BAW系统
极性、中极性物质分离
（以PPC为例）
反相色谱 ODS<甲醇-水 乙腈-水 最广泛，非极性、
中极性各类物质分离
22
加压液相色谱
类 型
分析用高压液相色谱（HPLC） 制备用高压液相色谱（HPLC） 中压液相色谱 ( MPLC ) 低压液相色谱 ( LPLC ) 5.05～20.2 ×105 < 5.05 ×105
压 力（Pa）
> 20.2 ×105
分离规模
1mg左右 > 5mg > 100mg 10mg～1g
快速色谱
约2.02 ×105
> 10mg
23
葡聚糖凝胶色谱
类 型 葡聚糖凝胶 原 理 溶胀溶剂 分子筛 水 （大→小） 应 用 多糖、多肽、 蛋白质分离
羟丙基 分子筛 水、极性 适于不同类型 葡聚糖凝胶 （糖苷） 有机溶剂 吸附原理 或二者的混合溶剂 （苷元） 化合物分离
不同系统偶合常数 (J Hz) 大小
33
芳环
双键
J邻6~10Hz J间 0~3Hz J对0~1Hz J顺7~11 Hz J反12~18 Hz
饱和烃类相邻碳原子上质子偶合常数的大小 与两个氢原子之间的立体夹角θ有关
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θ=60°
J = 2－4 Hz θ=180° J = 9－10 Hz 环己烷及其类似物相邻碳原子上质子的偶合 常数 Jaa 10－13Hz ( θ=180°) Jae 2－5Hz ( θ=60°) Jee 2－5Hz ( θ=60°)
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（二）峰面积: 磁等同质子的数目 —— 用积分曲线面积（高度）表示 （三）峰裂分及偶和常数:
磁不等同两个或两组1H核在一 定距离内相互自旋偶合干扰， 发生的分裂所表现出的不同裂分 峰裂分的数目 符合 n+1 规律 ( n = 磁等同质子的数目 ) s d t q m 单峰 双峰 三重峰 四重峰 多重峰 峰裂分的距离 用偶合常数（J）表示
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13C-NMR（
核磁共振碳谱 ）：
FT-NMR: 即脉冲傅里叶变换核磁共振。其装 臵原理为采用强的脉冲照射使分子中所有的
13C
核同时发生共振，生成在驰豫期内表现为
指数形式衰减的正弦波信号（自由诱导衰减； FID）经傅里叶变换即成为正常的NMR 信号。
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随着脉冲扫描次数的增加及计算机的累加计
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离子交换吸附树脂
树脂类型
阳离子交换树脂
原理
离子交换
应 用
从酸水溶液中吸附碱性 成分（生物碱） 除去酸性、中性成分
强酸性（R-SO3-H+） 阳离子 弱酸性（-COO-H+）
阴离子交换树脂
离子交换
从碱水溶液中吸附酸性
成分（有机酸） 除去碱性、中性成分
强碱性（RN+(CH3)3CI-） 阴离子
弱碱性 (伯、仲、叔胺)
离 离子交换树脂法 解 程 度 阳离子交换树脂 不 阴离子交换树脂 同
氨基酸、生物碱、 有机酸的分离
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常用色谱分离方法介绍 ：
吸附剂
硅胶
分离原理
吸附原理
吸附色谱 吸附规律
应
用
弱酸性、极性吸附剂 广泛（酸、碱及 化合物极性越大、 中性成分均可） 吸附能力强（难洗脱） 溶剂极性越小，吸附力越强 碱性、极性吸附剂 吸附规律同上 碱性、中性成分 （酸性成分与铝络合）
不同 13C 核δC大小与13C 核所处的化学环境（周围 电子云密度）有关
主要结构13C 核δC的大致范围 ( 要求熟记 ) 饱和碳原子（0~60） c=c Ar 50~80 (c-o) 150~220( c=o)
200
150
100
50
( δC ppm )
0
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用于13C 核类型的推断
常用13C- NMR测定技术及其特征：