尿液干化学分析

原理 酸碱指示剂法 多聚电解质离子解离法 pH指示剂蛋白质误差法 葡萄糖氧化酶－过氧化物酶法 偶氮反应法 醛反应、偶氮反应法 亚硝基铁氰化钠法 亚硝酸盐还原法 亚铁血红素类过氧化物酶法 酯酶法 吲哚酚法
一、酸碱度(pH)
参考值 临床意义
正常新鲜尿液多呈弱酸性
晨尿 pH5.5~6.5 随机尿 pH4.6~8.0
尿液干化学分析
颍上县中医院检验科 郑莉丽
干化学分析仪检查
尿液干化学试带法操作简便、检测迅 速、结果准确，可目测也可自动化分析。 （1）分析仪组成
机械系统 光学系统 电路系统 （2）试带种类 单项试带 多联试带
尿干化学分析仪检测原理的本质是 光的吸收和反射。
尿干化试带各检测项目反应原理
项目 pH SG PRO GLU BIL URO KET NIT BLD LEU Vit C
解决办法: 将尿液煮沸后几分钟再检测
不同化学物质对尿糖的影响
• 成分
葡萄糖氧化酶试带法
• 葡萄糖
阳性
Hale Waihona Puke • 非葡萄糖成分果糖
无反应
半乳糖
无反应
乳糖
无反应
麦芽糖
无反应
戊糖
无反应
蔗糖
无反应
酮体（大量）
可抑制颜色反应
肌酐
无反应
尿酸
无反应
班氏法
阳性
阳性 阳性 阳性 阳性 阳性 阳性 无反应 可导致假阳性 阳性
3. 氯仿、磷中毒、全身麻醉后，可呈阳性。服用双胍类降糖药由于药 物抑制细胞呼吸可出现血糖降低而尿酮体阳性的现象。新生儿出现尿 酮体强阳性应高度怀疑遗传性疾病
五、胆红素(BIL)
血浆中的胆红素主要分为未结合胆红素（UCB）和结合胆 红素（CB）。未结合是非水溶性，不能从肾脏滤过，故尿 中正常没有，结合性是水溶性的，可从尿中排出。
常见影响尿液PH值的因素
酸性
• 食物：
肉类、高蛋白及
•
混合食物（含硫、磷）
• 生理活动: 剧烈运动、应激、饥饿、 出汗
碱性
蔬菜水果（含钾、钠）
用餐后碱潮
• 药物： •
•
氯化钾氯化钙、氯化铵、稀盐酸等
碳酸氢盐、碳酸钾、碳
酸镁、枸橼酸钠、酵母、 利尿剂
• 肾功能： 肾小球滤过增加而肾小管
•
保碱能力正常
8.体位性蛋白尿：
指直立姿势时出现蛋白尿而卧位时尿蛋白消失，且无血尿、 高血压、水肿等异常表现，可能是直立时由于前突脊椎压迫肾静 脉或因直立过久肾脏下移，使肾静脉扭曲肾静脉淤血，淋巴、血 流受阻所致。特点：卧位时尿蛋白阴性，起床活动或久立后呈阳 性。多见于青少年。
检测方法
试带法： pH指示剂蛋白质误差原理，主要用于尿液分析仪 简便、快速、易标准化，适于健康体检或筛
。检测方法
试带法：（1）醛反应法：在酸性溶液中尿胆原与二甲氨
基苯甲醛发顺醛化反应形成樱红色缩合物
（2）偶氮法：在强酸性条件下，尿胆原与对-四 氧基重氮四氟化硼发生偶联反应生成胭脂红色化合物
尿胆原含量≤10mg/L，定性为阴性或弱阳性。
干扰因素:
• 1.偶氮法：甲醛浓度为2000mg/L或亚硝酸盐50mg/L以
不同化学物质对尿糖的影响
• 成分
葡萄糖氧化酶试带法
• 药物
维生素C
可延迟颜色反应
头孢菌素类
无反应
左旋多巴（大量）
假阴性
萘啶酮酸
无反应
葡萄糖苷酸
无反应
对苯甲酸
无反应
盐酸苯氮吡啶
橙色影响结果
水杨酸盐
可减弱显色
X射线造影剂
无反应
污染物
过氧化氢
假阳性
次氯酸 （漂白剂）
假阳性
氟化钠
假阳性
班氏法
弱阳性 阳性、棕褐色
萄糖醛酸或药物如异烟肼、链霉素、水杨酸、阿司匹林等， 可呈阳性反应。
四、酮体（KET）
是尿中β-羟丁酸（78%）、乙酰乙酸（20%）、丙 酮（2%）的总称。
检测方法： 亚硝基铁氰化钠法:乙酰乙酸或丙酮与亚硝基铁
氰化钠反应生成紫色化合物 试带法：只与乙酰乙酸、丙酮发生反应 基于该原理有多种检测方法，均不与β-羟丁酸反应。
检测方法： 偶氮法 ：在强酸介质中，结合胆红素与重氮盐发生偶联反
应呈红色。多用于试带法，维生素C或标本保存不 当可致假阴性。
正常人尿胆红素含量≤2mg/L，定性阴性。
五、胆红素(BIL)
干扰因素:尿蓝母产生的橘红色或红色可干扰结果 假阳性：接受大量的氯丙嗪治疗或尿液中含有盐
酸苯偶氮吡啶代谢产物 假阴性：1.尿液维生素C浓度达到1.42mmol/L和存
病变同时或相继累及肾小球和肾小管，兼有 两种蛋白尿的特点。
4.溢出性蛋白尿
血液中分子量较小或阳性电荷的蛋白质增多，经肾小 球滤过，超过肾小管重吸收能力而形成的蛋白尿，如游离 血红蛋白、肌红蛋白、溶菌酶、本周蛋白等。多为+~++， 常见于多发性骨髓瘤。
5.组织性蛋白尿
来源于肾小管代谢、组织破坏、炎症或药物刺激泌尿 系统分泌的蛋白质形成的蛋白尿,以TH糖蛋白为主。
在亚硝酸盐时，可抑制偶氮反应 2.尿液标本保持不当遇光氧化
注意：胆红素在强光下易胆绿素，1小时后下降约30%。
应避光棕色容器或新鲜尿液标本检测
六、尿胆原（URO）和尿胆素
尿胆原是结合胆红素排入肠道后形成的。 尿胆原与空气接触后变成尿胆素。 尿胆红素、尿胆原、尿胆素三者共称尿三胆。 主要用于黄疸的诊断和鉴别诊断
强、灵敏度高(1.67-2.78mmol/L)、简便快速、适 用于自动化分析。
2.班氏法:非特异试验，可测定尿中所有还原性物质，
灵敏度低(8.33mmol/L呈现弱阳性）、方法稳定、 成本低。
维生素C对尿糖检测影响
影响机制 试带法：与试剂发生竞争性抑制反应。 班氏法：维生素C为还原物质，可与试剂中 的硫酸铜发生反应。
肾小球性蛋白尿根据滤过膜损伤程度 及蛋白组分，分为：
• 鉴别点
选择性
• 原因 ：
肾小球损伤较轻，
•
如肾病综合征
•
• 相对分子量：
4~9万
• 蛋白质种类： 白蛋白、抗凝血酶、
•
转铁蛋白、糖蛋白等
• 尿蛋白定性： +++~++++
• 尿蛋白定量： >3.5
• Ig/Alb清除率: <0.1
非选择性
肾小球毛细血管壁 有严重 破裂和损伤，如原发性和
肾小球滤过功能正常而 肾小管保碱能力丧失
二、蛋白质
当尿蛋白＞150mg/24h或>100mg/L时，尿 蛋白定性试验为阳性，称为蛋白尿。
病理性蛋白尿
1.肾小球性蛋白尿
因炎症、免疫和代谢等因素导致肾小球滤过 膜损伤，通透性增加及静电屏障减弱，血浆蛋白 特别是白蛋白滤出，超过肾小管重吸收能力而形 成的蛋白尿。损伤较重时球蛋白及其他分子量较 大的蛋白质也可滤出。
（3）暂时性糖尿：①生理性如大量进食碳水化合物等；
②应激性糖尿如颅脑外伤、情绪激动、脑出血、急性心肌梗 死时，延脑血糖中枢受刺激后肾上腺素胰高血糖素分泌过多
（4）其他糖尿：当进食过多或受遗传因素影响时，糖代
谢紊乱，尿中乳糖、半乳糖、蔗糖、戊糖、果糖含量增高而 出现相应的糖尿。
（5）假性糖尿：尿中还原性物质，如维生素C、尿酸、葡
查。
对白蛋白灵敏，对球蛋白不灵敏，不适用于 肾脏疾病的疗效观察及预后判断
试带法检测尿蛋白的干扰因素
• 标本因素：尿液PH大于9可致假阳性，PH小于3可致假阴性，最适
宜尿液PH5-6
• 食物因素：尿液酸碱度与摄入食物有关，检查前一天应均衡饮食，
避免摄入过多肉类或蔬菜水果
• 药物因素：
• 假阳性： 奎宁、奎尼丁、嘧啶等或尿液中含有聚乙烯、吡咯酮、洗必 泰、磷酸盐、季铵盐消毒剂等，尿液呈强碱性（PH大于或等于9.0）
6.偶然性蛋白尿：
又称假性蛋白尿：即因尿内混有大量血液、脓液和黏液等 而导致蛋白定性试验阳性，一般并不伴有肾本身的损害。故又称 假性蛋白尿。
7.功能性蛋白尿：
指泌尿系统无器质性病变，尿内暂时出现的轻度蛋白质， 又称为生理性蛋白尿。常见于由剧烈运动、发热、受寒或精神紧 张等，由于肾小管痉挛或充血等暂时性改变使肾小球毛细血管壁 通透性增高而导致蛋白尿，常为一过性蛋白尿。定量一般不超过 1+，定量小于0.5g/24h,多见于青少年。
无反应 阳性 阳性 阳性 不确定 无反应 黑色
可掩盖阳性结果 不确定 无反应
临床意义
（1）血糖增高性糖尿：1.代谢性糖尿：糖尿病；2.内分
泌性糖尿：甲状腺功能亢进；垂体前叶功能亢进如肢端肥大 症；嗜铬细胞瘤；Cushing综合症。
（2）肾性糖尿：（血糖正常性糖尿）由于肾小管重吸收能
力或肾阈值降低所致。①家族性糖尿；②慢性肾炎或肾病综 合症；③哺乳、妊娠期。
临床意义：
正常人定性试验尿酮（－）
在生理或病理情况下，如糖尿病、剧烈运动、妊娠剧吐、应激状 态、饥饿时，脂肪动员加速，代谢紊乱，酮体生成过多，引起血酮体 过多而导致酮尿。 1. 糖尿病性酮症：糖尿病患者出现尿酮，应考虑糖尿病酮症酸中毒， 是发生酮酸中毒性昏迷的前兆。
2. 非糖尿病酮尿 ：孕妇可因严重妊娠反应剧烈呕吐、重症子癫不能进 食引起尿酮体阳性。
(2)化学法 原理同试带法。
(3)免疫法 免疫胶体金测定原理，灵敏度特异性好。
尿中出现Hb是血管内溶血的证据之一
临床意义
1.红细胞破坏:心脏瓣膜修复术、大面积烧伤、剧
烈运动、急行军、严重肌肉损伤和血管组织损伤
2.生物因素：疟疾、梭状芽孢杆菌中毒
3.动植物所致溶血:蛇毒、蜂毒等
4.微血管性溶血性贫血:DIC
检测方法:
(1)试带法 血红蛋白的血红素基团，具有过氧化物酶活性，能催
化过氧化氢，使色原氧化呈色，色的深浅和血红蛋白含量成正比。 常用色原有邻甲苯胺和四甲替联苯胺。 除了与游离的血红蛋白反应外也与完整的红细胞反应但是在高蛋白 高比重尿液中，红细胞不溶解，此时结果只反应血红蛋白的量 假阳性：尿液中含有易热性触媒、尿液被氧化剂污染、或尿路感染 时某些细菌产生过氧化物酶 假阴性：尿液中含有大量的维生素C或其他还原物质、过量甲醛、 大量亚硝酸盐（反应迟钝）
影响因素
①标本因素 高比重尿敏感性降低，陈旧尿、偶氮剂 污染尿可致假阳性；
②食物因素 不能正常饮食者，体内缺乏硝酸盐，可 出现假阴性；
• 假阴性：滴注大剂量青霉素或应用庆大霉素、磺胺、含碘照影剂
• 操作过程：
假阳性: 试带浸渍时间过长，反应颜色变深 假阴性：试带浸渍时间过短、反应不完全，或浸渍时间过长使反应模 块中的试剂流失
磺基水杨酸法：
又称磺柳酸法，为定性或半定量方法。 操作简便、反应灵敏、结果显示快，是干 化学法检测尿蛋白的参考方法，并为检测 尿蛋白的确证实验。
•
起假阳性，可用氯仿抽提法鉴别和确诊。
不同类型黄疸的鉴别诊断
尿液指标 正常人 溶血性黄疸 肝细胞性黄疸 胆汁淤积性黄疸
颜色
浅黄
深黄
深黄
深黄
尿胆原 阴性 或弱阳性
强阳性
阳性
阴性
尿胆素 阴性
阳性
阳性
阴性
胆红素 阴性
阴性
阳性
阳性
七、血红蛋白（Hb）
游离血红蛋白超过结合珠蛋白结合能力，可经尿液 排出，称为血红蛋白尿。
5.药物作用：伯氨喹啉、乙酰水杨酸、磺胺、非
那西丁
6.免疫因素：血栓性血小板减少性紫癜、阵发性
寒冷性血红蛋白尿、血型不合的输血
八、亚硝酸盐（NIT）
主要来自病原菌对尿硝酸盐的还原反应。 检测方法; 亚硝酸盐还原法 阳性检出率主要取决于 ①致病菌是否含有硝酸盐还原酶 ②尿在膀胱中是否停留足够细菌作用的时 间 ③尿中是否存在适量硝酸盐
1、pH降低：见于酸中毒、发热、脱水、痛风以及服用氯化铵、维
生素C等酸性药物者。另外低钾性碱中毒时由于肾小管分泌H+增 加，尿呈酸性称为反常性酸性尿
2、pH增高：见于碱中毒、尿潴留、尿路感染、频繁呕吐丢失胃酸、
服用碳酸氢盐、尿液放置过久等。另外I型肾小管性酸中毒时尿 液呈碱性。
3、用药指标：酸/碱化尿液，利于某些药物排出。
上，其灵敏度下降
• 2.醛反应法：
• 标本因素：标本久置尿胆原分解氧化成尿胆素，标本中大量胆红素
•
可引起颜色干扰
• 药物因素：假阳性：吩噻嗪类、磺胺类、普鲁卡因、氯丙嗪类药物
•
可使尿液颜色变化
•
假阴性:与尿液中大量维生素C或长期服用广谱抗生素抑
•
制肠道菌群
• 内源性物质：卟胆原、吲哚类化合物等可与醛试剂作用显红色，引
pH在3-9以外或高浓度尿酸盐可导致 假阴或假阳性。
加热乙酸法：
方法经典而准确，为蛋白定性确证实验， 操作略繁。特异性强，干扰因素少。
三、葡萄糖
健康人尿液中可有微量葡萄糖（小于2.8mmol/24h
血糖浓度超过8.88mmol/L（1.6g/L)时，尿中出现 葡萄糖。
检测方法:
1.试带法:即葡萄糖氧化酶－过氧化物酶法，特异性
继发性肾小球疾病 大、中相对分子量
IgG、IgA、IgM和补体
+~++++ 0.5~3.0
>0.5
2.肾小管性蛋白尿
指肾小管在受到感染、中毒损伤或继发于肾 小球疾病时，因重吸收能力降低或抑制，而出现 的以分子量较小的蛋白(如β2MG)为主的蛋白尿， 尿蛋白定性+~++，定量1~2g/24h
3.混和性蛋白尿