123、临床分子诊断方法学验证要求
合集下载
相关主题
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
• CAP提出了明确的要求：“实验室必须进行分析验证各项检测的性能参数” ，还对验证试验覆盖的标本范围（如不同的基因型等）、标本类型（如血液 、尿液、新鲜/冷冻组织、石蜡包埋组织等）、验证的参数（如参考值、报告 范围、准确度、分析灵敏度、分析特异性和精确度等）做了相应的规定。
[1]Guzel O, Guner EI. ISO 15189 accreditation: Requirements for quality and competence of medical laboratories, experience of a laboratory I. Clin Biochem,2009,42: 274-278. [6]Yanikkaya-Demirel G. ISO 15189 accreditation: Requirements for quality and competence of medical laboratories, experience of a laboratory II. Clin Biochem,2009,42: 279-283. [7]Jennings L, Van DV, Gulley ML. Recommended principles and practices for validating clinical molecular pathology tests. Arch Pathol Lab Med,2009,133: 743755.
新试验（为一个新的基因测序）；或者开展某个已经在其他 实验室验证过试验。
“Verification”和“Validation”
Validation(验证)
“通过提供客观证据证明预期的使用或应用要求已得到 满足”
• 当没有合适的性能参数可供参考时需要验证。 • 与”金标准“和参考试验相比较去评估性能 • 做正确的试验（performing the correct test) • 在医学分子诊断领域，由于往往缺乏参考方法
GENERAL ISSUES PROCEDURE MANUAL ASSAY VALIDATION REQUISITIONS SPECIMEN HANDLING SPECIMEN PROCESSING QUANTITATIVE ASSAYS: CALIBRATION AND STANDARD REAGENTS CONTROLS ANALYSIS
或者参考物质，通常将最可靠的方法作为标准 。
不同认可体系对方法学验证的要求
• CAP的“方法学验证（assay validation）”和ISO15189中的“诊断性验证（ diagnostic validation）”
• 共同点：新的检测方法应用到病人临床诊断之前必须进行方法学验证，以了 解该检测的临床表现，保证实验结果可信度[1-3]。
的实验室条件和操作者等因素对实验结果的影响较大； • 尚未建立公认的质量管理标准等； • 更高的准确性要求； • 结果报告缺乏标准化； • ……
这些基地将为个体化医学相关检测工作制 定国家行业标准，并面向相关从业人员展 开规范化、标准化的培训工作，为我国个 体化医学研究与应用提供宝贵经验，大大 加快我国分子诊断的进程。
“Verification”和“Validation”
Verification (确认） “通过提供客观证据证明特定的要求已得到满足”
• 当已经存在合适的性能参数时候，有必要明确在实验室内新 的试验符合参数规定，这个过程叫确认。
• 正确地做某个试验（ the test is being performed correctly）. • 其他确认的应用包括：采用某个实验室已经建立的技术开展
CONTENTS
• SUMMARY OF CHANGES • UNDERSTANDING THE 2010 CAP ACCREDITATION CHECKLIST COMPONENTS • HOW TO INSPECT USING R.O.A.D INSPECTION TECHNIQUE • ADDITIONAL INFORMATION • APPLICABILITY • PROFICIENCY TESTING • QUALITY MANAGEMENT AND QUALITY CONTROL
Extraction Amplification Restriction Endonucleases Sequencing Detection Methods
Agarose and Polyacrylamide Gel Electrophoresis Real-Time Polymerase Chain Reaction (PCR) Arrays
• Many of these clinically important LDTs are unlikely to ever become FDA cleared or approved because low test volumes make it
• economically unfeasible to go through FDA cleared: In vitro diagnostics that have gone through and passed a 510(k) trial. the • current FDA approved: An FDA 510(k) or IVD that has gone through and PpasMsedAa PaMAptrpial.roval process.
方法学验证的要求的修正和改进
IVDs. And LDTs.
• In vitro diagnostics (IVDs):商业化生产试剂盒； 通过FDA 510(k) clearance or PMA (premarket approval)。
• Laboratory-developed tests (LDTs): 自建项目； 局限于实验室内使用。
临床分子诊断 方法学验证要求
主要内容 • 什么是验证？ 自建项目 ？ 商业化项目？ • 如何做验证？ 步骤和实施路径
• 举例说明
JAK2 V617F突变方法的建立
分子诊断面临பைடு நூலகம்挑战
• 涉及方法较多，如PCR、荧光定量PCR、MLPA、测序等； • 实验步骤较多，包括标本的分离保存、处理、检测； • 手工程度较高，自动化程度普遍偏低，较多依赖手工，不同
[1]Guzel O, Guner EI. ISO 15189 accreditation: Requirements for quality and competence of medical laboratories, experience of a laboratory I. Clin Biochem,2009,42: 274-278. [6]Yanikkaya-Demirel G. ISO 15189 accreditation: Requirements for quality and competence of medical laboratories, experience of a laboratory II. Clin Biochem,2009,42: 279-283. [7]Jennings L, Van DV, Gulley ML. Recommended principles and practices for validating clinical molecular pathology tests. Arch Pathol Lab Med,2009,133: 743755.
新试验（为一个新的基因测序）；或者开展某个已经在其他 实验室验证过试验。
“Verification”和“Validation”
Validation(验证)
“通过提供客观证据证明预期的使用或应用要求已得到 满足”
• 当没有合适的性能参数可供参考时需要验证。 • 与”金标准“和参考试验相比较去评估性能 • 做正确的试验（performing the correct test) • 在医学分子诊断领域，由于往往缺乏参考方法
GENERAL ISSUES PROCEDURE MANUAL ASSAY VALIDATION REQUISITIONS SPECIMEN HANDLING SPECIMEN PROCESSING QUANTITATIVE ASSAYS: CALIBRATION AND STANDARD REAGENTS CONTROLS ANALYSIS
或者参考物质，通常将最可靠的方法作为标准 。
不同认可体系对方法学验证的要求
• CAP的“方法学验证（assay validation）”和ISO15189中的“诊断性验证（ diagnostic validation）”
• 共同点：新的检测方法应用到病人临床诊断之前必须进行方法学验证，以了 解该检测的临床表现，保证实验结果可信度[1-3]。
的实验室条件和操作者等因素对实验结果的影响较大； • 尚未建立公认的质量管理标准等； • 更高的准确性要求； • 结果报告缺乏标准化； • ……
这些基地将为个体化医学相关检测工作制 定国家行业标准，并面向相关从业人员展 开规范化、标准化的培训工作，为我国个 体化医学研究与应用提供宝贵经验，大大 加快我国分子诊断的进程。
“Verification”和“Validation”
Verification (确认） “通过提供客观证据证明特定的要求已得到满足”
• 当已经存在合适的性能参数时候，有必要明确在实验室内新 的试验符合参数规定，这个过程叫确认。
• 正确地做某个试验（ the test is being performed correctly）. • 其他确认的应用包括：采用某个实验室已经建立的技术开展
CONTENTS
• SUMMARY OF CHANGES • UNDERSTANDING THE 2010 CAP ACCREDITATION CHECKLIST COMPONENTS • HOW TO INSPECT USING R.O.A.D INSPECTION TECHNIQUE • ADDITIONAL INFORMATION • APPLICABILITY • PROFICIENCY TESTING • QUALITY MANAGEMENT AND QUALITY CONTROL
Extraction Amplification Restriction Endonucleases Sequencing Detection Methods
Agarose and Polyacrylamide Gel Electrophoresis Real-Time Polymerase Chain Reaction (PCR) Arrays
• Many of these clinically important LDTs are unlikely to ever become FDA cleared or approved because low test volumes make it
• economically unfeasible to go through FDA cleared: In vitro diagnostics that have gone through and passed a 510(k) trial. the • current FDA approved: An FDA 510(k) or IVD that has gone through and PpasMsedAa PaMAptrpial.roval process.
方法学验证的要求的修正和改进
IVDs. And LDTs.
• In vitro diagnostics (IVDs):商业化生产试剂盒； 通过FDA 510(k) clearance or PMA (premarket approval)。
• Laboratory-developed tests (LDTs): 自建项目； 局限于实验室内使用。
临床分子诊断 方法学验证要求
主要内容 • 什么是验证？ 自建项目 ？ 商业化项目？ • 如何做验证？ 步骤和实施路径
• 举例说明
JAK2 V617F突变方法的建立
分子诊断面临பைடு நூலகம்挑战
• 涉及方法较多，如PCR、荧光定量PCR、MLPA、测序等； • 实验步骤较多，包括标本的分离保存、处理、检测； • 手工程度较高，自动化程度普遍偏低，较多依赖手工，不同