弯曲菌属
第十一章 弯曲菌属和螺杆菌属
采用C-13同位素呼吸试验检测的方法，患者只需要向特定 的一次性专用呼吸检测卡中轻吹一口气，就能检查出引起 胃肠病的病因“幽门螺杆菌”在患者体内的感染数量。通 过口服C-13尿素胶囊，进入胃部后，如果胃部存在幽门螺 杆菌，则此菌就会分解尿素酶水解尿素，尿素被水解后形 成CO₂（二氧化碳）随血液进入肺部并以气体排出，然后 检测患者呼出的气体中有没有被标记的C-13，如果有的话， 代表存在幽门螺杆菌。但需要注意的是，幽门螺杆菌正常 人体内都有，但是超过100dpm便易引起癌变。而且具有 传染性，是世界卫生组织指定的一类致癌源。
形小杆菌 • 暗视野或相差显微镜：投镖样或螺旋样运动
核酸检测
PCR方法检测粪便中弯曲菌核酸
（四）分离培养
• 关键：选择性培养基和孵育条件 • 常用培养基：改良的Skirrow’s 培养基、Campy-BAP等 • 培养条件：5%O2、10%CO2及85%N2 • 温度和时间：
空肠和大肠弯曲菌最适温度为42℃，一般72h后观察菌落； 胎儿弯曲菌最适温度是37℃，一般培养72h~7d观察菌落。 故临床标本需分别置于37℃和42℃中培养，以防漏检。 • 弯曲菌的菌落特征: 菌落细小，粉红灰色、灰白或黄灰色、轻微黏液样， 有些菌落沿接种线有拖尾样外观
• 弯曲菌能引起动物与人类的腹泻、胃肠炎和肠道外感染等疾 病。对人致病的有空肠弯曲菌、大肠弯曲菌、胎儿弯曲菌等。 可根据生长温度、生化反应结果进行鉴定
• 螺杆菌属有20余种，其中幽门螺杆菌是引起胃部疾病的重要 病原体，可以产生大量高活性脲酶。通过快速测定脲酶的活 性或代谢产物可以帮助诊断幽门螺杆菌感染
第十一章 弯曲菌属检验 螺杆菌属检验
南昌大学第二附属医院 张黎明
第一节 弯曲菌属
一、分类
弯曲菌与螺杆菌
检验程序
标本采集
经胃镜用活检钳于近幽门部、胃窦部或病变邻近处取材，最好采取多位点样品
应立即行床边接种或放入20%葡萄糖运送液0.5ml内，4℃中保存不超过5h
受检者术前应停服铋剂或抗菌药物一周
（二）微生物检验
（三）标本直接检查
1. 直接显微镜检查 涂片或悬滴观察 将活检组织研碎，涂片或悬滴，置相差或暗视野显微镜下可见HP形态典型、运动活泼 直接涂片染色镜检 将活检粘膜组织在玻片上涂抹后，经革兰染色或单染色后镜检，如发现典型形态的HP即可诊断 组织切片染色镜检 组织块经福马林固定、切片经W-S银染色、姬姆萨染色、HE染色和荧光染色等染色后镜检HP，以W-S银染效果最好 免疫组化 用免疫组化法可检出胃粘膜组织切片中的完整HP及破碎的菌体或抗原成分 间接免疫荧光法（IIF）
螺杆菌属（Helicobacter）：细菌有20余种， 有9个种可从人体分离到
能引起人类疾病菌种 幽门螺杆菌(H. pylori)、 H. fennelliae和H. cinaedi。
幽门螺杆菌与萎缩性胃炎，胃、十二指肠溃疡和胃癌等疾病相关
其他螺杆菌也可感染胃粘膜，但少见。
第二节 螺杆菌属
诺贝尔生理学和医学奖
1983年Marshall和Warren首先用微需氧技术从慢性胃炎、消化性溃疡患者的胃粘膜分离出弯曲状的细菌，并证明该细菌感染胃部会导致胃炎、胃溃疡和十二指肠溃疡，获得了2005年诺贝尔生理学和医学奖
1
最初因形态、分离培养方法与弯曲菌属细菌相似，又仅从胃标本中分离到，被称作胃弯曲菌样细菌
2
由于此菌在胃窦部多见，且形态、培养及某些生化特性与弯曲菌属相似，DNA G+Gmol%也在弯曲菌属范围内，故命名为幽门弯曲菌(campylobacter pylori)
什么是弯曲菌
什么是弯曲菌？
来源：中国食品公众科普网
弯曲菌是弯曲菌属的一个种类，弯曲菌属包括胎儿弯曲菌、空肠弯曲菌、结肠弯曲菌(c．colic)、幽门弯曲菌、唾液弯曲菌及海欧弯曲菌(c．laridis)。
对人类致病的绝大多数是空肠弯曲菌及胎儿弯曲菌胎儿两种，其次是大肠弯曲菌为革兰染色阴性微需氧杆菌。
长1.5-5μm、宽0.2-0.5μm，呈弧形、S形或螺旋形。
在1909年，人类就已经知道弯曲菌可以导致动物患病，但是直到上世纪80年代才被广泛认知。
在很多国家，弯曲菌是导致消费者腹泻的重要原因。
在发达国家目前报告数量的上升可能是因为通过基因学方法的确认，了解到很多病例的发病原因。
在发展中国家弯曲菌导致的疾病数量很多，特别容易引起婴幼儿的腹泻，大多数的成人来说都具备一定的免疫力。
第14章 弯曲菌属与螺杆菌属-高教版
螺杆菌属
评价
安全性：13C无放射性， 14C摄取后三天内自体内排 出90%，但欧洲不允用于儿童和育龄期妇女。 准确性：敏感性与特异性均高于95% 易操作性： 14C检测方便、及时、价廉；
13C检测仪器昂贵(30-100万元)。 影响因素：5天内应用制酸药尤其是PPI可影响结果。
原理
包被抗Hp抗体
螺杆菌属
螺杆菌属
培养特性
微需氧条件：5%O2 + 10%CO2 + 85%N2； 湿度要求高，以相对湿度98%以上为佳； 营养要求高，需加血液和多种物质方能生长； 生长缓慢，常在培养基中加抗生素抑制杂菌生长。
螺杆菌属
菌落呈两种形态，一为圆形孤立的小菌落，无色半透 明呈露滴状，血平板上有轻度溶血；另一种沿接种线 扩散生长，融合成片，扁平，无色半透明。
弯曲菌属
用42℃作为初始分离温度，这一温度对 C.jejuni、 C.coli的生长有利
其它菌株在37℃生长良好。
弯曲菌属
常用的有含血的Skirrow、 GVA 、GGDA和GSM培 养基等。
弯曲菌可出现两种菌落：
一种为灰白、湿润、扁平 边缘不整的蔓延生长的菌 落。
另一种为半透明、圆形、 凸起、有光泽的小菌落， 陈旧菌落可因产生细胞类 色素而变红。
第十四章 弯曲菌属 与螺杆菌属
概述
弯曲菌属(Campylobacter)与螺杆菌 属(Helicobacter)细菌均为革兰染色阴 性，呈弧形或螺旋形菌，其大小及形 态上较难区别。
第一节 弯曲菌属
•Campylobacter所致疾病：
腹泻、胃肠炎和肠道外感染等。
•主要致病菌：
空肠弯曲菌(C.jejuni) 大肠弯曲菌(C.coli) 胎儿弯曲菌(C.fetus)
弯曲菌属
2、培养特性 1.微需氧菌； 2.该菌属最适生长温度随菌种而异。 3.营养要求高，在普通培养基上不能生长， 需加血液、血清。
泼。不分解糖类、不 液化明胶、不分解尿素，V-P和甲基红试验 均阴性。氧化酶均为阳性，大多数弯曲菌 还能还原硝酸盐，触酶试验为阳性，空肠 弯曲菌马尿酸水解试验阳性。
4、抗原结构 （1）菌体（O）抗原； （2）热不稳定抗原； （3）鞭毛（H）抗原 。
5、抵抗力 较弱，56℃5分钟即被杀死。 干燥环境中仅能存活3小时
微生物学检验
1、直接涂片 （1）悬滴标本检查：取新鲜粪便于载玻片 上，加生理盐水混合后，上覆盖玻片置显 微镜下观察有无投镖式或螺旋状运动的细 菌。脑脊液经3000r/min离心沉淀15min后， 制成涂片做悬滴检查。 （2）革兰染色检查： 为革兰氏阴性逗点状、 S形或螺旋状小杆菌。
临床意义
主要引起人类肠道感染和各种肠道 外感染。该菌属中的空肠弯曲菌是 引发散发性细菌性肠炎的最常见菌 种之一，胎儿弯曲菌主要引起肠道 外感染，其中胎儿亚种为主要的人 类致病菌。
电镜下弯曲 菌属
生物学特性
1、形态染色 为革兰氏阴性、细长、螺旋形或海鸥展翅状、 S形的弯曲杆菌。陈旧培养物可呈球形或长丝 状。大小为（0.5～8）μm×（0.2～0.5）μm。 一端或两端具有单鞭毛，运动活泼，有时呈螺 旋状运动。一端单鞭毛多见于胎儿亚种，两端 单鞭毛多见于空肠弯曲菌，无芽孢、无荚膜， 一端或两端着生单根无鞘鞭毛，长度为菌体的 2~3倍。
概述
弯曲菌属细菌是一类微需氧菌，菌体弯曲呈逗 点状、S形或螺旋状 ，有动力的革兰氏阴性菌。 包括5个种和5个亚种。对人类致病的主要是 空肠弯曲菌和胎儿弯曲菌胎儿亚种。
弯曲菌属检验标准操作规程
弯曲菌属检验标准操作规程1.概述弯曲菌属是一类氧化酶阳性、有动力、微需氧、菌体弯曲的革兰阴性细菌，与人有关的包括空肠弯曲菌、空肠弯曲菌德莱亚种、唾液弯曲菌唾液亚种等21个种和亚种。
2.标本类型粪便、肛拭子等标本。
3.鉴定3.1 形态与染色革兰阴性，菌体细长，弯曲呈弧形。
3.2 培养特性粪便标本应选用CCDA活性炭无血液培养基(CSM)或Campy-CVA等选择培养基。
在弯曲菌CCDA平板上微需氧（5%CO2）培养48小时后，可形成半透明、边缘整齐的菌落。
3.3 生化反应氧化酶试验阳性，不分解糖类，H2S（醋酸铅）、马尿酸钠、触媒和硝酸盐还原试验均为阳性，脲酶试验阴性，42℃生长，对啶萘酸敏感，对头孢噻吩耐药。
3.4 鉴别要点3.4.1 本菌属特征革兰阴性弯曲菌，微需氧，氧化酶、触酶试验阳性，不分解糖类，42℃时生长。
3.4.2 空肠弯曲菌与胎儿弯曲菌的鉴别空肠弯曲菌马尿酸钠试验阳性，25℃时不生长；而胎儿弯曲菌则相反。
3.4.3 空肠弯曲菌与幽门螺杆菌的鉴别空肠弯曲菌脲酶试验阴性，42℃时生长；而幽门螺杆菌脲酶试验强阳性，42℃时不生长。
3.5 操作步骤3.5.1 氧化酶试验参见《氧化酶试验标准操作规程》。
3.5.2 鉴定从CCDA平板上挑取可疑菌落，用仪器鉴定或手工生化（触酶、H2S、马尿酸钠、奈啶酸敏感试验）进行菌落鉴定。
4.药敏参见《药物敏感性试验标准操作规程》及CLSI M100-S20最新版本文件。
5.质量控制见《质量管理程序》。
6.检验结果解释与分析本菌感染轻症病人，一般不需治疗。
体外药敏显示对氨基糖苷类、氟喹诺酮类、红霉素、四环素、氯霉素、林可霉素、呋喃妥因和亚胺培南均敏感，对青霉素、万古霉素、利福平、甲氧苄啶等耐药。
7.临床意义弯曲菌属可引起肠外感染和慢性持续性感染。
空肠弯曲菌是引起散发性细菌性肠炎最常见的菌种之一，引起婴幼儿和成人腹泻。
临床表现为水样便，每日3~20次，以后转为黏液脓血便。
第11章弯曲菌
• 抗体检测： ELISA——血清中HP菌体抗体或尿 素酶抗体等
• 碳标记呼吸试验： 用13C或14C标记尿素、测定病人呼吸 中释放的标记CO2的量
复习要点
• 弯曲菌的培养特性及鉴定要点 • 幽门螺杆菌的培养及主要生化特性
41
• 悬滴法观察动力（投镖样/螺旋 状运动）
分离培养：
• 选择性平板——Campy-BAP • 标本分别置于37℃和42℃培养 • 微需氧环境培养 • 72h后观察菌落
弯曲菌属的鉴定要点：
• G-、菌体弯曲或呈S形、海鸥展翅形 • 动力（+） • 微需氧环境生长 • 氧化酶、触酶（+） • 脲酶（-）
第十一章 弯曲菌属检验、螺杆菌属检验
弯曲菌属检验
微需氧菌
•G-、菌体弯曲呈弧形或螺旋形等 •氧化酶（+）、动力（+） •引起人类肠道感染/肠道外感染的病原 菌
分类
临床常见的有： • 空肠弯曲菌 • 大肠弯曲菌 • 胎儿弯曲菌 • 痰液弯曲菌、简明弯曲菌、红嘴鸥弯
曲菌等
致病因素：
• 鞭毛 • 粘附素 • 肠毒素、细胞毒素、内毒素等 • 仍处研究阶段
抵抗力：
• 较弱，室温下很快死亡 • 56℃5min即被杀死 • 干燥环境中仅存活3h • 培养物放置4℃冰箱中可存活3周
微生物学检验
标本采集与运送： • 根据感染部位采集相应标本 • 立即送检，如不能及时送检，标
本应种入卡-布运送培养基，4℃ 保存
直接镜检：
• 粪便、肛拭涂片G染色镜检，找 G-弧形、S形、螺旋形等细菌
• 加入多黏菌素B、万古霉素、两性 霉素、TMP等抑制、少 数7天才能形成菌落，次代培养需 2~3天
• 圆形的小菌落，无色半透明呈露滴 状，直径约0.5~1mm，BAP上有轻度 溶血
弯曲菌感染讲课PPT课件
弯曲菌感染的地区分布
亚洲和非洲地区也有弯曲菌 感染的病例报告
弯曲菌感染的地区分布与当 地的气候、饮食习惯和人口
密度等因素有关
弯曲菌感染主要分布在欧洲 和北美地区
弯曲菌感染在全球范围内呈 上升趋势，需要加强防控措
施
弯曲菌感染的人群分布
感染途径：食用被污染的食 物或水源，与感染者接触
地区分布：全球范围内均有 分布，但发达国家更为常见
疫苗接种策略：针对易感人 群，如儿童和老人
疫苗种类：针对不同病菌亚 型研制的疫苗
疫苗效果评估：有效预防弯 曲菌感染，降低发病率和死
亡率
典型案例介绍
案例一：某男性患者因食用不洁食物导致弯曲菌感染，出现腹泻、腹痛等症状，经治疗后康复。
案例二：某家庭多人感染弯曲菌，经调查发现感染源为家庭内共同食用被污染的食物，通过隔 离和消毒等措施控制感染。
血液培养：在感染严重 时，血液培养可能阳性， 但阳性率较低。
组织病理学检查：在某 些情况下，可能需要通 过组织病理学检查来诊 断弯曲菌感染。
弯曲菌感染的治疗方案
药物治疗：使用抗生素等药物进行治疗 饮食调整：避免刺激性食物，保持清淡 补充营养：增强免疫力，提高抵抗力 预防措施：注意个人卫生，避免交叉感染
弯曲菌感染的流行情况
弯曲菌感染是一 种常见的食源性 疾病，主要通过 食用被污染的食 物传播。
弯曲菌感染的流 行病学特征是地 域性分布，与当 地的气候、饮食 习惯和人口密度 等因素有关。
弯曲菌感染的流 行情况在不同国 家和地区存在差 异，与当地的经 济、卫生条件和 人们的文化背景 等因素有关。
弯曲菌感染的流 行情况与季节有 关，通常在夏季 和秋季高发，与 气温、湿度等环 境因素有关。
弯曲菌属与螺杆菌属
3、检验方法
直接镜检 分离培养 鉴定
微生物学检测
菌种鉴定
• 42℃（空、大）和25℃（胎儿）生长 • 马尿酸钠水解试验： 空肠弯曲菌(+)
• 醋酸吲哚水解试验 空肠弯曲菌(+)
胎儿弯曲菌 (-)
• 萘啶酸、头孢噻吩敏感试验：
萘啶酸
头孢噻吩
空肠弯曲
+
-
胎儿弯曲菌 -
+
弯曲菌属温度生长试验
菌种 空肠弯曲菌 大肠弯曲菌 胎儿弯曲菌
可能的致病物质：
• 细胞毒素，包括细胞致死性肿胀毒素，志贺样毒素和溶血 毒素等。
• 肠毒素 • 内毒素
致病部位及表现：
• 感染部位通常在空肠、回肠粘摸上皮细胞，也可致结肠感 染。主要以其鞭毛和特异性外膜蛋白与空、回肠上皮细胞 结合、生长繁殖、产生毒素致病。
• 腹泻大多为水样便，小部分为脓血黏液便。
（1）粪便或肛拭标本：直接接种改良 Campy- BAP选择平板、 Skirrow氏培养 基。
血、脑脊液标本：布氏肉汤增菌后转种分
离培养基（布氏平板）。
（2）培养温度： 37℃ 、42℃
（3）微需氧条件
•
厌氧罐
•
气袋法
•
双平板法
•
蜡烛缸法
微生物学检测
3、检验方法
直接镜检 分离培养 鉴定
菌属鉴定
• 菌落生长特征 • 菌体形态特点（染色性、动力） • 氧化酶阳性、触酶阳性 • 硝酸盐还原试验阳性 • 脲酶阴性
螺杆菌属
（Helicobacter）
第三节 弯 曲 菌 属 Campylobacter
弯曲菌属可引起人和动物的腹泻胃肠炎和 肠道外感染等疾病。
全面认识弯曲菌及其防治措施
健康域公卫弯曲菌是一类微需氧的革兰氏阴性细菌，包括多个亚种，其中有10余种可导致人类疾病，本文将为您介绍弯曲菌的基本知识、传播途径以及如何预防弯曲菌感染。
常见的弯曲菌种类空肠弯曲菌这是弯曲菌属中最为出名的一种，也是导致食物传播疾病的主要原因。
它通常通过未煮熟的肉类或受污染的水传播。
感染后通常表现为腹泻、腹痛、发热以及其他胃肠疾病症状。
结肠弯曲菌与空肠弯曲菌相似，结肠弯曲菌也能引起胃肠感染。
虽然病症和传播途径与空肠弯曲菌类似，但结肠弯曲菌在某些动物（例如猪）中更为常见。
弯曲热带菌这种菌是另一种能够造成人类疾病的弯曲菌属成员，能够引起食物中毒症状。
弯曲胎菌这种菌主要影响免疫系统较弱的个体，如老年人或有慢性疾病者。
这种细菌能够导致系统性感染，包括败血症和感染性关节炎。
弯曲乳茵菌这种菌也能够引起人类暂时性胃肠感染，通常通过与动物（特别是猫和狗）接触传播。
弯曲菌的形态特性弯曲菌呈逗点状、螺旋状、S形或弧形，大小通常在0.2—0.8微米宽和0.5—5微米长。
它们是单极或双极带有单一鞭毛的细菌，能够通过鞭毛快速旋转来运动。
弯曲菌没有胞外荚膜，不形成芽孢。
弯曲菌的生存环境弯曲菌是具有高度适应性的微生物，它们能在多种环境中生存和繁殖。
以下是弯曲菌所适应的几种生存环境：水域环境很多弯曲菌在水生环境中都能生存，包括淡水和海水。
湿润的条件为这些细菌提供了繁衍的理想环境。
宿主体内很多弯曲菌是寄生性的，它们在人类或动物的体内部分器官、细胞中生存。
例如，白喉杆菌寄生于人类的咽喉，梅毒螺旋体等弯曲菌可在人类的生殖系统中生存繁衍，鼠疫耶尔森菌主要存在于啮齿类动物，以鼠蚤为传播媒介。
土壤环境土壤也是某些弯曲菌的生存场所，尤其是那些有机物丰富的土壤。
这些弯曲菌通过土壤与植物、动物或人类相互作用。
院内环境医院和其他医疗机构可能成为耐药性弯曲菌的滋生地，因为这些地方经常使用抗生素，为耐药菌株的发展提供了条件。
极端环境有些弯曲菌具有极其强的适应能力，能在极端环境中生存，例如高盐环境、高温环境，乃至放射性环境。
医学微生物学――第十六章 其他细菌
医学微生物学――第十六章其他细菌第十六章其他细菌第一节弯曲菌属弯曲菌属（Campylobacter）是一类呈逗点状或S形的革兰阴性杆菌。
有13个种，广泛分布于动物界，可引起动物和人类的腹泻、胃肠炎和肠道外感染。
对人致病的有空肠弯曲菌、大肠弯曲菌、胎儿弯曲菌等，其中以空弯曲菌（C。
jejuni）空肠弯曲菌生物学特性形态细长，呈弧形、螺旋形、S形或海鸥状。
运动活泼，一端或两端有单鞭毛。
无芽胞，无荚膜，革兰阴性。
微需氧，需在5％O2、10％CO2和85％N2的环境中生长。
在36～37℃生长良好，但在42℃中选择性好，此温度可使粪便中其他细菌的生长受到抑制。
营养要求高，用含血清的培养基培养后，在同一培养基上可出现两种菌落，一种为灰白、湿润、扁平边缘不整的蔓延生长的菌落；另一种为半透明、圆形、凸起、有光泽的细小菌落。
生化反应不活泼，不发酵糖类，氧化酶阳性，马尿酸盐水解试验阳性。
有菌体（O）抗原、热不稳定抗原和鞭毛（H）抗原。
根据（O）抗原不同将空肠弯曲菌分为42个血清型。
抵抗力较弱。
培养物放置冰箱中很快死亡，56℃5min即被杀死。
干燥环境中仅存活3h，培养物放室温可存活2～24周。
致病性与免疫性空肠弯曲菌引起胃肠道感染主要是该菌产生细胞毒素和一种不耐热肠毒素，后者与大肠埃希菌的LT和霍乱肠毒素有部分抗原交叉。
空肠弯曲菌是引起散发性细菌性肠炎最常见的菌种之一。
该菌常通过污染饮食、牛奶、水源等被食入，或与动物直接接触被感染。
由于空肠弯曲菌对胃酸敏感，经口食入至少104个细菌才有可能致病，该菌在小肠内繁殖，侵入肠上皮引起炎症。
临床表现为痉挛性腹痛、腹泻、血便或果酱样便，量多；头痛、不适、发热。
通常该病自限，病程5～8d。
机体感染空肠弯曲菌后可产生特异性抗体，能通过调理作用和活化补体等作用增强吞噬细胞的吞噬、杀灭细菌及补体的溶菌作用。
诊断与防治可用粪便标本涂片、镜检，查找革兰氏阴性弧形或海鸥状弯曲菌，或用悬滴法观察鱼群样运动或螺旋式运动。
弯曲菌属和螺杆菌属-细菌特性
第一节 弯曲菌属 第二节 螺杆菌属
第一节 弯曲菌属
一、分类 二、细菌特性 三、临床意义
四、微生物学检验
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第二节 螺杆菌属
一、分类 二、幽门螺杆菌 （一）细菌特性 （二）临床意义 （三）微生物学检验
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细菌特性
形态特征
培养特性 生化反应
抵抗力
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临床意义
致病物质 所致疾病
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空肠弯曲菌革兰染色
空肠弯曲菌扫描电镜图
空肠弯曲菌的两端单鞭毛
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空肠弯曲菌菌落特征（Camp-BAP ）
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致病物质
侵袭力 鞭毛、特异性外膜蛋白
外毒素 肠毒素、细胞毒素
内毒素
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所致疾病
空肠弯曲菌 腹泻 （最常见） 格林巴利综合征
关节炎、败血症、脑膜炎
胎儿弯曲菌胎儿亚种
肠道外感染
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弯曲菌检验程序
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细菌特性
形态特征
Hale Waihona Puke 培养特性 生化反应抵抗力返回
临床意义
幽门螺杆菌是消化性溃疡最主要的病 因，长期感染易发展为萎缩性胃炎、溃
疡、胃腺癌和胃黏膜淋巴组织淋巴瘤。
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幽门螺杆菌革兰染色
幽门螺杆菌对数生长期形态（扫描电镜）
幽门螺杆菌鞭毛
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幽门螺杆菌菌落特征（血平板）
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幽门螺杆菌检验程序
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12弯曲菌与螺杆菌
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一、分类
• 胃弯曲菌样细菌 • 幽门弯曲菌 在胃窦部多见，且形态、培养及 某些生化特性与弯曲菌属相似，DNA GC比 也在弯曲菌属范围内 • 幽门螺杆菌(Helicobacter pylori, HP) 1989 年Goodwin等根据该菌的超微结构、形态、 菌体脂肪酸组成、生长特征和酶的活力、 16S rRNA 序列等
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– 马尿酸盐水解试验 凡马尿酸盐水解试验阳性、42℃生长、 氧化酶阳性、与镜检形态相符者，即可 报告空肠弯曲菌空肠亚种
– 醋酸吲哚水解试验 空肠、大肠弯曲菌(+)，胎儿弯曲菌(-)
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其他测定方法
• 免疫学方法 – 用特异性抗体包被的乳胶颗粒，可用于 鉴定空肠/大肠弯曲菌。 – 酶免疫方法测定粪便中弯曲菌抗原。 – 血清中抗体测定用于流行病学调查 • DNA探针和PCR扩增 – DNA-DNA杂交 – PCR扩增技术
第十一章 弯曲菌属与螺杆菌属
刘建华
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第一节 弯曲菌属
• 弯曲菌属（Campylobacter）是一类呈逗 点状或S形的革兰阴性菌，广泛分布于动 物界 • 动物与人类的腹泻、胃肠炎和肠道外感染 • 对人致病有空肠弯曲菌、大肠弯曲菌、胎 儿弯曲菌
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一、分类
• 弯曲菌原归属于弧菌属，1973年正式命名为 弯曲菌属 • 近年来发现了弯曲菌的许多新种和亚种，共 超过30个种和亚种。
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二、临床意义
• 感染非常普遍。高度适应，只能生活于胃 粘膜的细菌，菌体周围微环境的pH值为7.0， 胃窦为最佳定植部位 • HP感染 慢性浅表性胃炎或萎缩性胃炎
• 胃癌发病率较高
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致病机理
• 可能与下列因素有关：
1.特殊的螺旋状和端鞭毛有助于HP穿过胃粘 膜表面粘液层与胃粘膜上皮细胞接触；
临床检验技师-微生物检验(2019)讲义第十六章_弯曲菌属和幽门螺杆菌及检验
第十六章弯曲菌属和幽门螺杆菌及检验本章内容一、弯曲菌属二、幽门螺杆菌弯曲菌属——分类包括 5 个种和 5 个亚种。
致病：空肠弯曲菌是人类腹泻最常见的病原菌之一。
胎儿弯曲菌（胎儿亚种）在免疫功能低下时可引起败血症、脑膜炎等。
弯曲菌属——生物学特性形态与结构形态：细长、螺旋形或海鸥展翅状、S 形的弯曲杆菌。
-染色： G。
特殊结构：有单鞭毛，运动活泼，投镖式或螺旋状运动。
一端单鞭毛多见于胎儿亚种，两端单鞭毛多见于空肠弯曲菌，无芽胞，无荚膜。
培养特性营养要求：高；需加入血液、血清才能生长。
气体环境：微需氧；初次分离需在含5%O2、85%N2、10%CO2中生长，传代培养时能在10%C02环境中生长。
温度环境：空肠弯曲菌在43℃生长， 25℃不生长。
胎儿弯曲菌在25℃生长， 43℃不生长。
37℃都能生长。
菌落特征：选择培养基：Skirrow琼脂、ButzIer培养基和Campy-BAP培养基。
空肠弯曲菌初次分离时，经48h 培养：扁平湿润灰白色、半透明、边缘不整齐、常沿接种线扩散生长的菌落，不溶血。
圆形凸起半透明、针尖状、有光泽、单个细小菌落，不溶血。
抗原有菌体（ O）抗原、热不稳定抗原和鞭毛（H）抗原。
根据 O抗原可将空肠弯曲菌分为42 个血清型。
抵抗力较弱， 56℃ 5 分钟被杀死。
干燥环境中仅能存活 3 小时。
弯曲菌属——微生物检验及鉴定标本采集：粪便、血液或脑脊液。
形态学检查：革兰阴性逗点状、S 形或螺旋状小杆菌。
悬滴法：投镖式或螺旋状运动。
分离培养：粪便和肛拭子标本接种于Skirrow血琼脂平板和Campy-BAP平板。
血液或脑脊液标本接种布氏肉汤增菌后，转种弯曲菌分离培养基，置43℃、 37℃，在微需氧环境下培养24～72h，观察菌落特征。
生化反应糖类发酵氧化酶硝酸盐还触酶动力尿素明胶液化甲基红V-P 试马尿酸水试验试验原试验试验试验试验试验试验验解试验-++++----空肠弯+曲菌弯曲菌属——致病性及临床意义人类肠道感染和各种肠道外感染。
弯曲菌属
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弯曲菌属温度生长试验
菌种 空肠弯曲菌 大肠弯曲菌 胎儿弯曲菌 简明弯曲菌
43℃ + + -
25℃ + -
37℃ + + + +
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弯曲菌属
弯曲菌属是一类呈逗点状或S形的革兰阴 性杆菌，广泛分布于动物界，其中有些 可引起动物和人类腹泻、胃肠炎和肠道 外感染。
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形态染色
革兰阴性菌，螺旋形、S形，一端或两端 有单鞭毛，无芽孢，无荚膜，运动活泼， 暗视野下呈投标样运动，
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培养特性
微需氧 最适生长温度随菌种而定 营养要求高，常用改良弯曲菌培养基 （Campy-BAP） 两种类型菌落：扁平湿润边缘不整齐， 沿穿刺线扩散生长；圆形、突起、湿润、 黏液样外观
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临床意义
致病物质：黏附作用，尿素酶，蛋白酶， 细胞毒素等 与人类慢性胃炎、消化道溃疡有密切关 系
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微生物学检验
标本采集：胃、十二指肠粘膜标本 显微镜检查： 直接镜检 活检标本革兰染色 组织学切片染色检查 分离培养 快速脲酶试验:5~30钟内观察结果 PCR法
应
氧化酶阳性 触酶阳性 不分解和不发酵糖 不分解尿素
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临床意义
传播方式：经口感染 致病物质：产生肠毒素、细胞毒素、内 毒素等致病物质 空肠弯曲菌可引起急性肠炎、格林巴利 综合征 胎儿弯曲菌可引起败血症、脑膜炎等
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弯曲菌属检验
标本采集：粪便，肛拭，剩余食物，立 即送检 镜检： 悬滴法动力检查观察投标样或螺旋动力 染色检查：革兰阴性细小弯曲菌 培养：微需氧、温度
初级检验士考试(微生物学检验)讲义第十六章弯曲菌属和幽门螺杆菌及检验知识讲解
弯曲菌属和幽门螺杆菌及检验● 考点弯曲菌属幽门螺杆菌一、弯曲菌属一类微需氧，不分解糖类，氧化酶阳性，菌体弯曲呈逗点状、S形或螺旋状，有动力的革兰阴性菌。
对人类致病的主要是空肠弯曲菌和胎儿弯曲菌胎儿亚种。
（一）生物学特性1.形态染色G-、细长、螺旋形或海鸥展翅状、S形的弯曲杆菌。
一端或两端具有单鞭毛，运动活泼。
无芽胞，无荚膜。
2.培养特性微需氧菌，初次分离时需在含5%O2、85%N2、10%CO2气体环境中生长，传代培养时能在10%C02环境中生长。
最适生长温度随菌种而异（生长温度的差异可用于菌种鉴别）营养要求高，在普通培养基上不生长。
常用的选择培养基有Skirrow琼脂、Butzler培养基和Campy-BAP 培养基。
空肠弯曲菌初次分离时，可形成两种菌落：扁平、湿润、灰白色、半透明、边缘不整齐、常沿接种线扩散生长的菌落；圆形、凸起、半透明、针尖状、有光泽、单个细小菌落。
3.生化反应生化反应不活泼。
不分解糖类、不液化明胶、不分解尿素，V-P和甲基红试验均阴性。
氧化酶均为阳性，大多数弯曲菌能还原硝酸盐、触酶试验为阳性，空肠弯曲菌马尿酸水解试验阳性。
4.抗原结构菌体（O）抗原：将空肠弯曲菌分为42个血清型。
热不稳定抗原鞭毛（H）抗原5.抵抗力抵抗力较弱，56℃5分钟即被杀死。
干燥环境中仅能存活3小时。
（二）微生物检验属的鉴定要点：氧化酶阳性，革兰阴性，菌体弯曲或呈S形。
最常用的鉴定试验有生长温度（25℃、37℃、42℃）试验、过氧化氢酶试验、马尿酸盐水解试验、硝酸盐和亚硝酸盐还原试验。
（三）临床意义主要引起人类肠道感染和各种肠道外感染。
空肠弯曲菌是引起散发性细菌性肠炎最常见的菌种之一；胎儿弯曲菌主要引起肠道外感染，其中胎儿亚种为主要的人类致病菌，导致菌血症、胆囊炎、腹膜炎、肺部感染等。
（四）治疗原则二、幽门螺杆菌一类氧化酶和过氧化氢酶均阳性、微需氧、在37℃能够生长，在25℃和42℃均不能生长的革兰阴性弯曲的细菌。
弯曲菌属Campylobacter 的检验
弯曲菌属Campylobacter的检验一类呈逗点状或S形的革兰氏阴性杆菌，广泛分布于动物界，其中有些可引起动物和人类腹泻、胃肠炎和肠道外感染。
目前弯曲菌属有18个种（含亚种），对人类致病的主要是空肠弯曲菌和胎儿弯曲菌的胎儿亚种，前者引起人类急性腹泻，后者在免疫功能低下时可引起败血症、脑膜炎等，其次是胎儿弯曲菌和大肠弯曲菌等。
1983年分离的幽门弯曲菌则与慢性胃炎和胃溃疡、十二指肠溃疡有关。
兽医临床上常见的有五个种（含亚种）：空肠弯曲菌、胎儿弯曲菌（胎儿亚种和性病亚种）、小肠弯曲菌、幽门弯曲菌。
其中以空肠弯菌最多见，胎儿亚种次之。
致病性（一）形态与染色1、0.2-0.4×1.5-3.0μm； G-, 呈弧形、S形或海鸥展翅状，不易着色；2、无芽孢，一端或两端各有一根鞭毛，运动活泼，形态似霍乱弧菌；3、从微需氧到厌氧，CO2有利于其生长。
（二）培养特性•微需氧，最适生长环境: 氧气5％、二氧化碳10％、氮气85％；通常42℃初分离空肠弯和大肠弯曲菌，其他菌株37℃生长良好。
•营养要求高，普通培养基不生长，常用含头孢哌酮的选择性培养基，以抑制肠道正常菌群。
•含血的Skirrow培养基、头孢哌酮-万古霉素-两性霉素琼脂培养基（CVA）和不含血的碳-头孢哌酮-去氧胆酸盐（CCDA）、碳基选择性培养基（CSM）和半固体动力培养基等常用于分离该属的细菌。
•在凝固血清和血琼脂培养基上培养36小时可见无色半透明毛玻璃样小菌落，单个菌落呈中心凸起，周边不规则，无溶血现象。
（四）抵抗力•抵抗力较弱，易被干燥、直射日光及弱消毒剂所杀灭，56℃、5min可被杀死。
但耐寒，在4℃冰箱或水中可存活4周。
•对红霉素、新霉素、庆大霉素、四环素、氯霉素、卡那霉素等抗生素敏感。
但近年发现了不少耐药菌株。
（五）抗原构造•本菌抗原构造比较复杂，与肠道杆菌一样具有O、H和K抗原。
•根据O抗原，可把空肠弯曲菌分成45个以上血清型。
第十六章 弯曲菌属与螺杆菌属
鉴定要点
1.为氧化酶阳性，G-菌体弯曲或呈S型。 2.萘啶酸、头孢噻吩敏感试验：空肠弯曲菌
对萘啶酸敏感、噻吩耐药；胎儿弯曲菌对 萘啶酸耐药、对头孢噻吩敏感。
3.马尿酸盐试验：有助于鉴定空肠弯曲菌空 肠亚种，凡试验阳性、在42℃条件下生长， 氧化酶阳性且与镜检形态相符者，即可报 告为空肠弯曲菌空肠亚种。
3.培养特征 为微需氧菌，最佳气体环境通常 为含5％氧气、10％二氧化碳及85％氮气。
4.抵抗力不强，在室温下可迅速死亡。对热 敏感，标本在4℃冰箱可保存3周。
微生物检验
1.粪便直接镜检，G-呈弧形、呈投镖式运动。 2.核酸检测粪便弯曲菌flaA基因，体外扩增
空肠／大肠弯曲菌为1．3kb。 3.分离培养 粪便等标本可接种选择平板进行
第十六章 弯曲菌属与螺杆菌属
第一节 弯曲菌属
是一类呈逗点状或s 形的G- 菌，广泛分布 于动物界，其中有些可引起动物与人类的 腹泻、胃肠炎和肠道外感染等疾病。对人 致病有空肠弯曲菌、大肠弯曲菌、胎儿弯 曲菌等，其中空肠弯曲菌是腹泻的常见病 原菌。
该菌借助于鞭毛和外膜蛋白与空肠上皮细胞 结合，侵入生长繁殖，产生肠毒素、细胞毒 素和内毒素等物质，引起肠炎和肠道外感染。
4.醋酸吲哚水解试验：空肠弯曲菌为阳性， 胎儿弯曲菌为阴性。
5.用抗体包被的乳胶颗粒，遇到相应的弯曲菌 时便可出现反应。可用于鉴定空肠／大肠弯 曲菌，具有高度敏感性和特异性。
探针：DNA-DNA杂交可以用于鉴别大肠弯曲 菌与马尿酸水解阴性的空肠弯曲菌、区别空 肠弯曲菌和其他的弯曲菌。
第二节 螺杆菌属
的菌落形态为圆形孤立的小菌落，无色 半透明呈露滴状。
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三、生物学特性
• 3.生化反应
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试验项目 空肠弯曲杆菌 空肠弯曲杆菌 多氏亚种结肠弯曲杆菌 胎儿弯曲菌 胎儿亚种琢豚弯曲杆菌 乌普萨拉弯曲杆菌 25℃生长 － +/－ － + D 0 37℃生长 ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ 42℃生长 ＋ +/－ ＋ D ＋ ＋ 硝酸盐还原试验 ＋ － ＋ ＋ ＋ ＋ 3.5%Nacl耐受试验 － － － － － － 硫化氢试验（纸条法） ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ 硫化氢试验（TSI） － － D － ＋ － 过氧化氢酶试验 ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ － 氧化酶 ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ 麦康凯琼脂 ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ － 1％甘氨酸生长试验 ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ 马尿酸水解试验 ＋ ＋ － － － － 奈啶酮酸试验 S S S R R S 头孢菌新素试验 R R R S S S
第二十章 弯曲菌属和幽门螺杆菌及检验
消化系统
• 腹泻
• 腹泻（diarrhea）是一种常见症状，是指排便 次数明显超过平日习惯的频率，粪质稀薄，水 分增加，每日排便量超过200g，或含未消化食 物或脓血、粘液。腹泻常伴有排便急迫感、肛 门不适、失禁等症状。腹泻分急性和慢性两类。 急性腹泻发病急剧，病程在2～3周之内。慢性 腹泻指病程在两个月以上或间歇期在2～4周内 的复发性腹泻。 正常人一般每日排便一次，个别人每日排便2～ 3次或每2～3日一次，粪便的性状正常，每日 排出粪便的平均重量为150～200g，含水分为 60％～75％。
•
你知道的导致腹泻的原因有哪些？
腹泻常见病因
• • (1)肠道炎症：肠道炎症所引起的腹泻可分为感染性炎症性腹泻和非感染性腹泻两类： ①感染性炎症性腹泻：为最常见的一类腹泻，常见于： a.病毒感染：按发病率高低顺序分别为：轮状病毒(其中包括A组轮状病毒、成人腹泻轮 状病毒)、肠腺病毒、诺沃克病毒、埃可病毒、星状病毒、冠状病毒、嵌杯样病毒、 Norwalk因子以及其他病毒感染所引起的腹泻等。 b.细菌感染：细菌感染所致的感染性腹泻十分常见，呈全球性分布，如细菌性痢疾、 沙门氏菌感染、霍乱、副溶血弧菌感染、弯曲菌感染、溃疡性肠结核以及金黄色葡萄 球菌胃肠炎等。 c.真菌感染：如肠念珠菌病等。 d.寄生虫感染：如阿米巴肠病、梨形鞭毛虫病、血吸虫病、钩虫病、姜片虫病以及绦 虫病等。 ②非感染性腹泻：如炎症性肠病(包括慢性非特异性溃疡性结肠炎和克隆病)、急性出 血性坏死性肠炎、放射性肠炎以及缺血性肠病等均可有腹泻，结肠憩室炎或结肠息肉 并发结肠炎也可伴有腹泻。 (2)肿瘤：肠道肿瘤，如小肠恶性淋巴瘤、结肠癌以及直肠癌等，导致肠粘膜的浸润、 糜烂和溃疡等病变，均可引起腹泻；Apud瘤、胃泌素瘤、类癌以及胰性霍乱等，则由 于产生大量的胃肠肽类物质而引起腹泻。 (3) 吸收障碍：小肠粘膜受损，如小儿乳糜病、热带和非热带斯泼卢病、乳糜管或肠系 膜淋巴结病变等引起的肠腔内菌群失调以及小肠部分切除或短路手术等，均可引起营 养物质的吸收障碍而引起腹泻。 (4)食物中毒：如葡萄球菌肠毒素所引起的食物中毒、海豚中毒以及肉毒中毒等。 (5)化学品中毒：如砷、汞、磷及酒精等中毒。 (6)药物作用：泻剂如硫酸镁等；拟副交感神经药如新斯的明、乙酰胆碱及毛果芸香碱 等；广谱抗生素如林可霉素及氯林可霉素；降压药如胍乙啶及利血平等都能引起腹泻。 (7)肠变态反应性疾病：因对乳品及鱼虾等食物过敏，引起肠的变态反应性疾病，导致 腹泻。 (8)其他：如尿毒症及营养不良等。
三、生物学特性
• 2.培养特性 • 弯曲菌为微需氧菌，空肠弯曲菌和其他大多数弯曲菌生长时需氧浓度 为5%~10%（V/V）。最佳气体环境为含5%氧气、10%二氧化碳及 85%氮气 • 营养要求高，在普通培养基上不生长。需加入血液、血清才能生长。 常用的选择培养基有Skirrow琼脂和Campy-BAP培养基。这些培养 基以血琼脂为基础，加人多种抗生素，能抑制肠道正常菌群，而有利 于本菌的分离。空肠弯曲菌初次分离时，经48h培养可形成两种菌落； 一种为扁平、湿润、灰白色、半透明、边缘不整齐、常沿接种线扩散 生长的菌落；另一种为圆形、凸起、半透明、针尖状、有光泽、单个 细小菌落。两种菌落均不溶血。在布氏肉汤内呈均匀混浊生长。
一、分类
• 弯曲菌原归属于弧菌属，1973年正式命名为 弯曲菌属 • Campylobacter源自希腊语意为弯曲的杆状 • 1984年在伯杰手册中将其分为5个种(亚种)。 近年来发现了弯曲菌的许多新种和亚种。
二、临床意义
• 空肠/大肠弯曲菌广泛分布于温血动物。未经处理的水以及 生牛乳是人类感染的主要来源。弯曲菌的传播途径主要以食 物和水的传播为多见，经口摄入是本菌最主要的传播方式 – 腹泻是空肠弯曲菌感染最常见的临床表现
– 感染后可引发吉兰-巴雷综合症和反应性关节炎 • 胎儿弯曲菌主要引起肠外感染
– 其中胎儿亚种为主要的人类致病菌
– 可致人类菌血症、心内膜炎、血栓性静脉炎、活动性关 节炎、脑膜炎、肺部感染、胸膜炎、腹膜炎、胆囊炎等
三、生物学特性
• 1.形态染色 • 革兰阴性，菌体弯曲呈逗点、弧形、S形、螺旋形或典型 的海鸥展翅（gull wing）形。陈旧培养物可呈球形或长 丝状。无芽胞。 • 通常空肠/大肠弯曲菌的鞭毛是较细且紧密盘绕的两端单 鞭毛；胎儿弯曲菌胎儿亚种的鞭毛为波浪状的一端单鞭毛。 弯曲菌的运动非常活泼，呈投镖样或螺旋样前进
பைடு நூலகம்
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弯曲菌属与螺杆菌属
• 弯曲菌属与螺杆菌属是分类学上两个独立 的菌属 • 大小及形态相似，显微镜下为革兰染色阴 性菌，呈弧形或螺旋形菌，较难区别 • 为了便于鉴别诊断，将这两类细菌放在同 一章介绍
第一节 弯曲菌属
• 弯曲菌属（Campylobacter）是一类呈逗 点状或S形的革兰阴性菌，广泛分布于动 物界 • 其中有些可引起动物与人类的腹泻、胃肠 炎和肠道外感染等疾病 • 对人致病有空肠弯曲菌、大肠弯曲菌、胎 儿弯曲菌等，其中空肠弯曲菌是腹泻的常 见病原菌