空肠弯曲菌弯曲菌属
第十一章 弯曲菌属和螺杆菌属
采用C-13同位素呼吸试验检测的方法，患者只需要向特定 的一次性专用呼吸检测卡中轻吹一口气，就能检查出引起 胃肠病的病因“幽门螺杆菌”在患者体内的感染数量。通 过口服C-13尿素胶囊，进入胃部后，如果胃部存在幽门螺 杆菌，则此菌就会分解尿素酶水解尿素，尿素被水解后形 成CO₂（二氧化碳）随血液进入肺部并以气体排出，然后 检测患者呼出的气体中有没有被标记的C-13，如果有的话， 代表存在幽门螺杆菌。但需要注意的是，幽门螺杆菌正常 人体内都有，但是超过100dpm便易引起癌变。而且具有 传染性，是世界卫生组织指定的一类致癌源。
形小杆菌 • 暗视野或相差显微镜：投镖样或螺旋样运动
核酸检测
PCR方法检测粪便中弯曲菌核酸
（四）分离培养
• 关键：选择性培养基和孵育条件 • 常用培养基：改良的Skirrow’s 培养基、Campy-BAP等 • 培养条件：5%O2、10%CO2及85%N2 • 温度和时间：
空肠和大肠弯曲菌最适温度为42℃，一般72h后观察菌落； 胎儿弯曲菌最适温度是37℃，一般培养72h~7d观察菌落。 故临床标本需分别置于37℃和42℃中培养，以防漏检。 • 弯曲菌的菌落特征: 菌落细小，粉红灰色、灰白或黄灰色、轻微黏液样， 有些菌落沿接种线有拖尾样外观
• 弯曲菌能引起动物与人类的腹泻、胃肠炎和肠道外感染等疾 病。对人致病的有空肠弯曲菌、大肠弯曲菌、胎儿弯曲菌等。 可根据生长温度、生化反应结果进行鉴定
• 螺杆菌属有20余种，其中幽门螺杆菌是引起胃部疾病的重要 病原体，可以产生大量高活性脲酶。通过快速测定脲酶的活 性或代谢产物可以帮助诊断幽门螺杆菌感染
第十一章 弯曲菌属检验 螺杆菌属检验
南昌大学第二附属医院 张黎明
第一节 弯曲菌属
一、分类
什么是弯曲菌
什么是弯曲菌？
来源：中国食品公众科普网
弯曲菌是弯曲菌属的一个种类，弯曲菌属包括胎儿弯曲菌、空肠弯曲菌、结肠弯曲菌(c．colic)、幽门弯曲菌、唾液弯曲菌及海欧弯曲菌(c．laridis)。
对人类致病的绝大多数是空肠弯曲菌及胎儿弯曲菌胎儿两种，其次是大肠弯曲菌为革兰染色阴性微需氧杆菌。
长1.5-5μm、宽0.2-0.5μm，呈弧形、S形或螺旋形。
在1909年，人类就已经知道弯曲菌可以导致动物患病，但是直到上世纪80年代才被广泛认知。
在很多国家，弯曲菌是导致消费者腹泻的重要原因。
在发达国家目前报告数量的上升可能是因为通过基因学方法的确认，了解到很多病例的发病原因。
在发展中国家弯曲菌导致的疾病数量很多，特别容易引起婴幼儿的腹泻，大多数的成人来说都具备一定的免疫力。
弯曲菌属检验标准操作规程
弯曲菌属检验标准操作规程1.概述弯曲菌属是一类氧化酶阳性、有动力、微需氧、菌体弯曲的革兰阴性细菌，与人有关的包括空肠弯曲菌、空肠弯曲菌德莱亚种、唾液弯曲菌唾液亚种等21个种和亚种。
2.标本类型粪便、肛拭子等标本。
3.鉴定3.1 形态与染色革兰阴性，菌体细长，弯曲呈弧形。
3.2 培养特性粪便标本应选用CCDA活性炭无血液培养基(CSM)或Campy-CVA等选择培养基。
在弯曲菌CCDA平板上微需氧（5%CO2）培养48小时后，可形成半透明、边缘整齐的菌落。
3.3 生化反应氧化酶试验阳性，不分解糖类，H2S（醋酸铅）、马尿酸钠、触媒和硝酸盐还原试验均为阳性，脲酶试验阴性，42℃生长，对啶萘酸敏感，对头孢噻吩耐药。
3.4 鉴别要点3.4.1 本菌属特征革兰阴性弯曲菌，微需氧，氧化酶、触酶试验阳性，不分解糖类，42℃时生长。
3.4.2 空肠弯曲菌与胎儿弯曲菌的鉴别空肠弯曲菌马尿酸钠试验阳性，25℃时不生长；而胎儿弯曲菌则相反。
3.4.3 空肠弯曲菌与幽门螺杆菌的鉴别空肠弯曲菌脲酶试验阴性，42℃时生长；而幽门螺杆菌脲酶试验强阳性，42℃时不生长。
3.5 操作步骤3.5.1 氧化酶试验参见《氧化酶试验标准操作规程》。
3.5.2 鉴定从CCDA平板上挑取可疑菌落，用仪器鉴定或手工生化（触酶、H2S、马尿酸钠、奈啶酸敏感试验）进行菌落鉴定。
4.药敏参见《药物敏感性试验标准操作规程》及CLSI M100-S20最新版本文件。
5.质量控制见《质量管理程序》。
6.检验结果解释与分析本菌感染轻症病人，一般不需治疗。
体外药敏显示对氨基糖苷类、氟喹诺酮类、红霉素、四环素、氯霉素、林可霉素、呋喃妥因和亚胺培南均敏感，对青霉素、万古霉素、利福平、甲氧苄啶等耐药。
7.临床意义弯曲菌属可引起肠外感染和慢性持续性感染。
空肠弯曲菌是引起散发性细菌性肠炎最常见的菌种之一，引起婴幼儿和成人腹泻。
临床表现为水样便，每日3~20次，以后转为黏液脓血便。
空肠弯曲菌
6
（二）、传播途径
经水、食物传播：空肠弯曲菌污染的水和食物经口传播 是本病最常见的传播途径，饮用未经巴氏消毒牛奶可引集 体腹泻
经接触传播： 人与动物、儿童之间或母婴之间的接触均 可传播此病
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（三）、易感人群
普遍易感，各年龄组均可发病 发达国家中，1岁以下幼儿和20-29岁年轻人发病率最高，
空肠弯曲菌纯培养物革兰染色
空肠弯曲菌电镜图
4
对外界抵抗力不强，易被干燥、直射阳光及弱消 毒剂杀灭
对热敏感，60 ℃20分钟即可杀死，但耐寒，在4 ℃的粪便、牛奶中可存活3周，肉类冷冻保存3个 月仍可检出
5
二、流行病学
（一）、传染源
动物：空肠弯曲菌为人兽共患菌，广泛存在于野生或家 养动物肠道内，与人类感染有关的是家禽和家畜，是本病 的主要传染源
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四、临床表现
多数表现为较轻的胃肠炎，病程短且呈自限性，少数表现 为重症小肠肠炎
起病急，可有发热、头痛、全身乏力等前驱症状，继而出 现腹泻，每天2-10次不等，大便呈水样或黏液样，2-3天 常见肉眼血便，重型患者可有黏液血便
多数患者有痉挛性腹痛，便后可减轻，剧痛与急腹症相混 淆
肠道外并发症少见，仅限有基础疾病患者，病灶经血扩散
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引起菌血症或败血症
Guillain—Barri综合征是严重的并发症之一
是脊髓灰质炎消灭以来最常见的急性迟缓性神经性 病变，其症状多以肢体感觉麻痹开始，继而进行性 四肢无力，严重后表现为呼吸肌麻痹，其残疾率为7 ％～15％，死亡率3％～10％
临床上除静脉注射免疫球蛋白、激素治疗及血浆交 换法外，没有特效药物，医疗负担严重
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空肠弯曲杆菌的分离鉴定
２１ 主要试 剂 新鲜绵羊 血；新生牛血清 ； Ｔｑ Ｄ ．． ２ ａ ＮＡ
聚 合 酶 （Ｕ＃１、ｄ Ｔ ｓ ５ ｔ ） Ｎ Ｐ。
２１ 培养基 的制备 ．． ３
Ｃ ｒ， ｌ ｒ ａｙＢａ 氏运送培养基 ：４ ｇ ｉ ２ 培养
基 溶 于 ｌ０ ｍｌ 中 ， １ １ 高 压 蒸 气 灭 菌 １ｒｉ ，冷 却 至 Ｏ０ 水 ２℃ ５ ｎ ａ
菌 Ｃ ｒ— ｌ ｒ ａｙＢａ 氏运 送 培 养 基 ， 于４Ｃ带 回实 验 室 ，划 线 接 种 ｉ ＂
急性迟 缓性 瘫痪性疾 病 的脑脊液检 查有 典型 的 白蛋
于改 良Ｓ ｉｏ ｋｒ ｗ氏琼脂培养基 ，置于４ ．＇ ｒ ２ Ｃ、１％Ｃ ２ Ｏ ０ Ｏ 培养 箱培养４ ｈ ８ ，挑取疑 似菌落 ，染色镜 检，并进行纯 培养 。 于．０Ｃ冰箱保存 。 ８￣ ２１ 细菌的鉴 定 （ ）Ｐ Ｒ鉴定 。用酚氯 仿方法提取 ．． ５ １ Ｃ
尤其是免疫力低下者包括 获得性 免疫缺 陷综合征 、血液
病及接受化疗等患者易并发严重腹泻 ，且耐药菌株增加 引起局部暴发 。目前其发病机制 不完全 明了，尚无有效
１ 相关疾病的情况
１１ 原 发 性 疾病 ．
的疫苗进行预防，因此，研 究有效疫苗将成为预防其感
空肠 弯 曲杆菌 通过粪 ， Ｉ途径 传 Ｓ １
２ 空肠弯曲杆菌的分离鉴定试验
２１ 材 料 与 方 法 ．
２１１ 培 养基 ． ．
Ｃ ｒ ｌｉ氏运送培 养基、改 良Ｓ ｉｏ ａｙＢ ａ ｒ ｋｒ ｗ氏 ｒ
琼脂 培养基 、空肠 弯 曲菌 琼脂基 础培养 基及 空肠弯 曲菌
琼 脂 配 套 试 剂 、布 氏肉 汤 。
发病 。传染源 常 为家禽 、肉类 、鲜 奶 国外研究表 明有
医学微生物学――第十六章 其他细菌
医学微生物学――第十六章其他细菌第十六章其他细菌第一节弯曲菌属弯曲菌属（Campylobacter）是一类呈逗点状或S形的革兰阴性杆菌。
有13个种，广泛分布于动物界，可引起动物和人类的腹泻、胃肠炎和肠道外感染。
对人致病的有空肠弯曲菌、大肠弯曲菌、胎儿弯曲菌等，其中以空弯曲菌（C。
jejuni）空肠弯曲菌生物学特性形态细长，呈弧形、螺旋形、S形或海鸥状。
运动活泼，一端或两端有单鞭毛。
无芽胞，无荚膜，革兰阴性。
微需氧，需在5％O2、10％CO2和85％N2的环境中生长。
在36～37℃生长良好，但在42℃中选择性好，此温度可使粪便中其他细菌的生长受到抑制。
营养要求高，用含血清的培养基培养后，在同一培养基上可出现两种菌落，一种为灰白、湿润、扁平边缘不整的蔓延生长的菌落；另一种为半透明、圆形、凸起、有光泽的细小菌落。
生化反应不活泼，不发酵糖类，氧化酶阳性，马尿酸盐水解试验阳性。
有菌体（O）抗原、热不稳定抗原和鞭毛（H）抗原。
根据（O）抗原不同将空肠弯曲菌分为42个血清型。
抵抗力较弱。
培养物放置冰箱中很快死亡，56℃5min即被杀死。
干燥环境中仅存活3h，培养物放室温可存活2～24周。
致病性与免疫性空肠弯曲菌引起胃肠道感染主要是该菌产生细胞毒素和一种不耐热肠毒素，后者与大肠埃希菌的LT和霍乱肠毒素有部分抗原交叉。
空肠弯曲菌是引起散发性细菌性肠炎最常见的菌种之一。
该菌常通过污染饮食、牛奶、水源等被食入，或与动物直接接触被感染。
由于空肠弯曲菌对胃酸敏感，经口食入至少104个细菌才有可能致病，该菌在小肠内繁殖，侵入肠上皮引起炎症。
临床表现为痉挛性腹痛、腹泻、血便或果酱样便，量多；头痛、不适、发热。
通常该病自限，病程5～8d。
机体感染空肠弯曲菌后可产生特异性抗体，能通过调理作用和活化补体等作用增强吞噬细胞的吞噬、杀灭细菌及补体的溶菌作用。
诊断与防治可用粪便标本涂片、镜检，查找革兰氏阴性弧形或海鸥状弯曲菌，或用悬滴法观察鱼群样运动或螺旋式运动。
猪空肠弯曲菌感染的防治
5.1 预防 本病的预防需要通过加强 饲养管理，做好猪场的清扫和消毒工 作。猪舍应当每天进行打扫，打扫时需 要将各种污染物清理出去。而后进行 全面的消毒，在消毒时，需要注意不能 留有死角。常用的消毒剂为 0.1% 的新 洁尔灭，进行带猪消毒。消毒液要进行 轮换，防止病原菌产生耐药性。由于本 病主要通过消化道传播，因此需要严格 控制饲料和饮水的质量。防止病原的污 染。饲料还要防止在储存的过程中发生 霉变，导致猪采食后免疫力下降，甚至 发生中毒。本病的预防还可以在饲料中 添加益生菌，有利于肠道菌群的平衡。 5.2 治疗 本病的治疗通常是应用口 服药物。常用的药物有庆大霉素、卡那 霉素和新霉素等。另外一些广谱抗生 素也具有良好的效果，如土霉素和泰乐 菌素等。在治疗时需要给病猪补充矿 物质和多种维生素，有助于病理损伤的 修复和提升机体免疫力。
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猪空肠弯曲菌不仅能够引起猪的 感染发病，还可以引起人的感染，是一 种人畜共患病。其在各地均有发生，对 养猪业的危害较为严重。
1 病原及流行病学
本病的病原为空肠弯曲菌，属于螺 旋菌科、弯曲菌属的成员，该菌通过革 兰氏染色后呈阴性。菌体大小为 1.5× （0.2 ～ 0.5）μm 之间。菌体呈弯曲状， 末端较细，类似于逗号形状，也有的为 S 型等，常为 3 ～ 5 个排列。随着传代 次数的增加，该菌逐渐形成为球菌。在 菌体的单侧或对侧都有鞭毛，能够进行 运动，运动时呈直线或螺旋式，但通常 不会形成荚膜和芽孢。本菌具有较多 的血清型，可以多达 20 多种。本菌在 含 有 10% ～ 20% 之 间 的 CO2 的 环 境 中能够良好的生长。菌体对环境的抵 抗力较差，应用普通的消毒药物均可以 将其杀死。对高温较为敏感，当其处于 80℃的环境中，可在半小时内失活，在 100℃的水中瞬间失活。病原菌对紫外 线敏感，太阳光照射下，数小时也可以 将其杀灭。
猪空肠弯曲菌感染防治
发展对策ＬＩＶＥＳＴＯＣＫＡＮＤＰＯＵＬＴＲＹＩＮＤＵＳＴＲＹＮｏ．４，２０２２猪空肠弯曲菌感染防治臧洪英（山东省日照市东港区政务服务中心，山东日照２７６８００）摘 要：猪空肠弯曲菌感染是养猪过程中常见疾病之一。
空肠弯曲菌可感染多种畜禽，同时也可导致人类患急性胃肠道疾病。
空肠弯曲菌感染猪后可导致病猪出现严重的腹泻和脱水症状，甚至会造成病猪死亡，给养猪业造成巨大的经济损失。
因此，为保证养殖场经济效益与人类健康，养殖人员应做好该病的预防和治疗工作。
从猪空肠弯曲菌特点及临床症状入手，提出相应的防治措施。
关键词：猪；空肠弯曲菌；预防；治疗ｄｏｉ：１０．１９５６７／ｊ．ｃｎｋｉ．１００８－０４１４．２０２２．０４．０２７ 引言猪空肠弯曲菌又被称为空肠弧菌病，是一种传染性消化道疾病。
该病菌可导致病猪出现严重的腹泻和肠炎现象。
除感染猪群外，还可导致多种畜禽动物发病，诱发空肠弯曲菌肠炎，给养殖业带来巨大的经济损失。
另外，空肠弯曲菌还可感染人类，造成人类多器官出现炎症，诱发格林－巴利综合症、心血管疾病等。
猪空肠弯曲菌感染在世界范围内广泛存在，在我国小规模养猪场内发病率最大。
该病短时间内可快速传播，患病动物为病菌的主要传染源。
为降低猪空肠弯曲菌感染，提高畜产品质量安全，养殖人员应针对空肠弯曲菌的流行特点及病原特征开展相应的检测、防治工作。
病原学与流行病学１．１ 病原空肠弯曲菌隶属于螺旋菌科弯曲菌属。
该菌为革兰氏阴性菌，菌体大小为０．３～０．８μｍ。
空肠弯曲菌为末端较细的弯曲状，少数为Ｓ形，且通常多个排列，随着传代次数增加，菌形逐渐变为球形。
空肠弯曲菌有鞭毛，可呈直线或螺旋形运动，无荚膜、无芽孢。
空肠弯曲菌具有２０多种血清型，在普通培养基内生长速度缓慢，在血清培养基内可快速繁殖，培养过程中需要氧气。
该菌对环境抵抗力较差，日常使用的消毒剂可将其灭活。
另外，该菌对高温较为敏感，７０℃以上环境下可快速失活，１００℃的水中可瞬间失活。
第十章 弧菌和弯曲菌
第十章弧菌和弯曲菌弧菌属(Vibrio)广泛分布于自然界,尤以水中为多，有100多种。
主要致病菌为霍乱弧菌和副溶血弧菌（致病性嗜盐菌）。
前者引起霍乱；后者引起食物中毒。
弯曲菌属（Camphlobacter）形态似弧菌，因G+C含量与弧菌不同，因此另立新属为弯曲菌属。
对人致病的主要是空肠弯曲菌和肠道弯曲菌。
前者引起急性肠炎，较为常见；后者是人体免疫力下降时的机会致病菌，较少见。
本间介绍霍乱弧菌和空肠弯曲菌。
第一节霍乱弧菌霍乱弧菌（V.cholera）是人类霍乱的病原体,霍乱是一种古老且流行广泛的烈性传染病之一。
曾在世界上引起多次大流行，主要表现为剧烈的呕吐，腹泻，失水，死亡率甚高。
属于国际检疫传染病。
霍乱弧菌包括两个生物型：古典生物型（Classical biotype）和埃尔托生物型（EL-Tor bio-type）。
这两种型别除个别生物学性状稍有不同外，形态和免疫学性基本相同，在临床病理及流行病学特征上没有本质的差别。
自1817年以来，全球共发生了七次世界性大流行，前六次病原是古典型霍乱弧菌，第七次病原是埃尔托型所致。
1992年10月在印度东南部又发现了一个引起霍乱流行的新血清型菌株（0139），它引起的霍乱在临床表现及传播方式上与古典型霍乱完全相同，但不能被01群霍乱弧菌诊断血清所凝集，抗01群的抗血清对0139菌株无保护性免疫。
在水中的存活时间较01群霍乱弧菌长，因而有可能成为引起世界性霍乱流行的新菌株。
一、生物学性状（一）形态与培养特性新从病人分离出古典型霍乱弧菌和EL tor弧菌比较典型，为革兰氏阴性菌，菌体弯曲呈弧状或逗点状，菌体一端有单根鞭毛和菌毛，无荚膜与芽胞。
经人工培养后，易失去弧形而呈杆状。
取霍乱病人米泔水样粪便作活菌悬滴观察，可见细菌运动极为活泼，呈流星穿梭运动。
营养要求不高，在PH8.8～9.0的碱性蛋白胨水或平板中生长良好。
因其他细菌在这一PH不易生长，故碱性蛋白胨水可作为选择性增殖霍乱弧菌的培养基。
空肠弯曲菌的致病性及致病机制研究进展
性 滚动 ， 陈 旧培 养基 中菌 形 变 球 状 ， 丧失动力； 为 微
需 氧菌稿 日期 ： ２ ０ １ ３ — ０ ７ — １ ９
作者简介 ： 翟海华（ １ ９ ８ ８ 一） ， 女， 山 东 淄博 人 ， 硕士 ， 主 要 从 事 微 生 物 流 行 病 学研 究 。
动 物 医学进 展 ， ２ ０ １ ３ ， ３ ４ （ １ ２ ） ： １ ６ ４ — １ ６ ９
Ｐｒ ｏ ｇｒ ｅ ｓ ｓ ｉ ｎ Ｖｅ ｔ ｅ ｒ ｉ ｎ ａ ｒ ｙ Ｍ ｅ ｄ ｉ ｃ ｉ ｎｅ
空肠 弯 曲菌 的 致病 性及 致病 机 制研 究 进 展
翟 海 华 ， 王 娟 ， 王 君 伟。 盖 文 燕 ， 黄 秀梅 。 ， 曲 志娜 。
Ａｂ ｓ ｔ ｒ ａ ｃ ｔ ： Ｔｈｅ ｉ ｎｃ ｒ ｅ ａ ｓ ｉ ｎｇ ａ ｎｔ ｉ ｍｉ ｃ ｒ ｏ ｂｉ ａ ｌ ｒ ｅ ｓ ｉ ｓ ｔ ａ ｎｃ ｅ ｏ ｆ ｃ ｏ ｍｍ ｏ ｎ ｐ ａ ｔ ｈ ｏ ｇｅ ｎ ｓ ｈａ ｓ ｌ ｅ ｄ ｔ ｏ ａ ｇｒ ｏ ｗｉ ｎ ｇ ｃ ｏ ｎｃ ｅ ｒ ｎ ｂ ｏｔ ｈ ａ ｔ
染 色 阴性 菌 ； 具有 多形性 ， 呈 弧形 、 螺旋 形 、 海 鸥展 翅 形 或 Ｓ形 ； 无 芽胞 ； 一 端 或 两端 有 一 根 鞭 毛 ， 呈 螺 旋
纪８ ０年代 以来 ， 空肠 弯 曲菌就受 到 了 国 内外 的广泛 关注 。它 是引起 人 细 菌 性 腹 泻 的 最 重要 原 因之 一 ，
豢染梁粜粜靠 ｛ ＝ ∈ 豢米米斟 ∈ 稚 豢靠
Ｐｒ ｏ ｇ ｒ ｅ ｓ ｓ ｏ ｎ Ａｎｔ ｉ ｐｌ ａ ｓ ｍｉ ｄ Ｅｆ ｆ ｅ ｃ ｔ ｏ ｆ Ｃｈｉ ｎ ｅ ｓ ｅ Ｈｅ ｒ ｂ ａ ｌ Ｍｅ ｄ ｉ ｃ ｉ ｎ ｅ
猪空肠弯曲菌病的诊治方法
２ 临床症状
临床 表 现有 多种 ， 括 无症 状 的 隐性 带 菌者 ， 包 有 轻 型腹 泻 、重 型 腹泻 及 其 他 临 诊症 状 。潜伏 期 ３ ５ — 天， 主要 症状 是 发 热 、 炎 、 泻 和腹 痛 ， 肠 腹 多数 病 猪 以 发 热为 首 发症 状 ， 细 菌性 痢疾 相 似 ， 病情 较 轻 。 与 但
肠炎的重要传染源之一 。猪本身有很高的带菌率， 通 常情况下可达 ９％以上 ，更是不容忽视的重要传染 ０ 源 。人亦 可作 为传染 源 ， 症状 的带 菌者对 人构 成威 无 胁 ， 感染 主要是 由动 物传 染而来 。 人 各种年龄的猪都易感 ，但小猪 比成年猪更易发 病。 本病传染途径有多种 ， 可经污染的饲料和饮水 ， 也 可通过接触和其他方式传播。 病猪都有典型的一时性 腹泻症状 ， 但也有无症状的隐性感染。 本病无季节性 。
分细胞 有浸 润性炎 症现 象 。
４ 诊 断 本病 主要 可根据 临床症状 和病理 变化作 出初
诊， 但易与其他细胞性肠炎 混淆 ， 因此最后确诊有赖 于细 菌培 养和 血清学 检查 。 粪便 暗视野及相关 显微镜 检查是快速 诊断技 术， 因弯曲菌具有特征性运动 ， 可将病猪粪便标本直 接置 显微 镜 下观 察 ， 可见 菌 体呈 螺 旋状 运 动 ， 但粪 便 中需要 有 足够数 量 的细菌 。 细菌培养是 目前最 主要的诊断方法 ，取新鲜粪 便标本 （ 或肛 门拭子 ） 插入 Ｃｒ — ｌｒ ａ ｙ Ｂａ 运送 培养基 ｒ ｉ 或碱性蛋 白胨水 ， ２ 小时内直接或经增菌后接种 在 ４ 于有 抗生素 （ 万古霉 素 ｌ ０毫克 ／ 、 升 多粘菌素 Ｂ ５０ ２ ０
空肠弯曲杆菌感染的研究现状
多被弯 曲菌污染 ， 如进食未加工或加工不适 当的肉、 、 以 蛋 奶 及 凉拌菜等均 可引起感染 。此外， 直接 与带菌动 物 、 宠物接
触， 常是屠宰场工人 和儿童被感染 的原 因。国际旅行常 常是
［ ４ Ｒ ｅ Ｊ ．ａ ｐｌｂｃｅ ｕ ｉｉｆ ｔ ｎ ａｄ Ｇ ｉａ ３ ］Ｃ ３ ｅｓ ＨＣ ｍ ｙ ａｔｒ ｊｎ ｎ ｃｉ ｎ ｕｌ ｉ ０ ｊ ｅ ｏ ｅ ｌｎ
目前研制 的 ｑ 灭 活全菌体 疫苗能诱 导机体产 生 ｃ 特异性 ｊ 抗体 ， 并在 ｃ 攻毒试验 中表现 出一定的保 护能力 。 ｊ ｊ ｃ 的抗原 性 变异 大 ， 切 的保 护性抗原 还不 十分 清楚 ， 确 因此 ， 预防 Ｃ ｉ
感染 ， 最好 应用全菌苗 。Ｃ 灭活全菌体疫苗 的研 制成功可望 ｉ 在 消灭传染源 ， 预防感染等方面起 到相应 的积极作用。
空 肠 弯 曲 菌 （ ．ｊｎ）菌 体 轻 度 弯 曲似 逗 点 状 ， Ｃｊ ｕ ｉ ｅ 长 １ ～ ｍ， ０２—０ ｍ。菌体一端 或两端有鞭 毛 ， 动活 ．５ ５ 宽 ． ． ８ 运 泼， 在暗视野镜下观察似飞蝇 。有英膜 ， 不形成芽孢。 革兰氏染色阴性微需氧杆菌 ，在含 ５ ２１％Ｃ ８％ ％０ 、０ ０ 、５ Ｎ 的环境 中生长最好。 最适温度为 ３ ７—４ ＂ 。 ２Ｃ 空肠弯 曲菌抵 抗 力不强 ，易 被干燥 、直射 日光及 弱消 毒剂所 杀灭 ，６ ５℃ ５ｉ ｍｎ可被杀死 ， 对物理和化学消毒剂均敏感。
有关学者指 出， 虽然研 究 ｃ 引起的腹泻流行很重要 ， ｊ 但 是过去 由于缺少合适 的动物模 型 ， 使得发病机制 的研究受到 限制 ， 特别 是关 于如何引起腹泻和控制腹泻还不是很 清楚 。
轴索型 Ｇ Ｓ和 ４ ％脱髓鞘型 Ｇ Ｓ Ｂ ２ Ｂ 患者有 Ｃ 前驱感染证 据。 ｊ １ 病原学
弯曲菌属Campylobacter 的检验
弯曲菌属Campylobacter的检验一类呈逗点状或S形的革兰氏阴性杆菌，广泛分布于动物界，其中有些可引起动物和人类腹泻、胃肠炎和肠道外感染。
目前弯曲菌属有18个种（含亚种），对人类致病的主要是空肠弯曲菌和胎儿弯曲菌的胎儿亚种，前者引起人类急性腹泻，后者在免疫功能低下时可引起败血症、脑膜炎等，其次是胎儿弯曲菌和大肠弯曲菌等。
1983年分离的幽门弯曲菌则与慢性胃炎和胃溃疡、十二指肠溃疡有关。
兽医临床上常见的有五个种（含亚种）：空肠弯曲菌、胎儿弯曲菌（胎儿亚种和性病亚种）、小肠弯曲菌、幽门弯曲菌。
其中以空肠弯菌最多见，胎儿亚种次之。
致病性（一）形态与染色1、0.2-0.4×1.5-3.0μm； G-, 呈弧形、S形或海鸥展翅状，不易着色；2、无芽孢，一端或两端各有一根鞭毛，运动活泼，形态似霍乱弧菌；3、从微需氧到厌氧，CO2有利于其生长。
（二）培养特性•微需氧，最适生长环境: 氧气5％、二氧化碳10％、氮气85％；通常42℃初分离空肠弯和大肠弯曲菌，其他菌株37℃生长良好。
•营养要求高，普通培养基不生长，常用含头孢哌酮的选择性培养基，以抑制肠道正常菌群。
•含血的Skirrow培养基、头孢哌酮-万古霉素-两性霉素琼脂培养基（CVA）和不含血的碳-头孢哌酮-去氧胆酸盐（CCDA）、碳基选择性培养基（CSM）和半固体动力培养基等常用于分离该属的细菌。
•在凝固血清和血琼脂培养基上培养36小时可见无色半透明毛玻璃样小菌落，单个菌落呈中心凸起，周边不规则，无溶血现象。
（四）抵抗力•抵抗力较弱，易被干燥、直射日光及弱消毒剂所杀灭，56℃、5min可被杀死。
但耐寒，在4℃冰箱或水中可存活4周。
•对红霉素、新霉素、庆大霉素、四环素、氯霉素、卡那霉素等抗生素敏感。
但近年发现了不少耐药菌株。
（五）抗原构造•本菌抗原构造比较复杂，与肠道杆菌一样具有O、H和K抗原。
•根据O抗原，可把空肠弯曲菌分成45个以上血清型。
弯曲菌属简介
弯曲菌属简介（一）概述弯曲菌属细菌是一类微需氧，不分解糖类，氧化酶阳性，菌体弯曲呈逗点状、S形或螺旋状，有动力的革兰阴性菌。
包括5个种和5个亚种。
对人类致病的主要是空肠弯曲菌和胎儿弯曲菌胎儿亚种。
前者是人类腹泻最常见的病原菌之一，后者在免疫功能低下时可引起败血症、脑膜炎等。
来源：考试大（二）生物学性状1.形态染色：革兰阴性、细长、螺旋形或海鸥展翅状、S形的弯曲杆菌。
一端或两端具有单鞭毛，运动活泼，有时呈螺旋状运动。
一端单鞭毛多见于胎儿亚种，两端单鞭毛多见于空肠弯曲菌，无芽胞，无荚膜。
2.培养特性：微需氧菌，初次分离时需在含5%O2、85%N2、10%CO2气体环境中生长，传代培养时能在10%CO2环境中生长。
本属菌最适生长温度随菌种而异（生长温度差异可作为菌种鉴别要点）。
营养要求高，在普通培养基上不生长。
需加入血液、血清才能生长。
常用的选择培养基有Skirrow琼脂和Campy-BAP培养基。
这些培养基以血琼脂为基础，加人多种抗生素，能抑制肠道正常菌群，而有利于本菌的分离。
空肠弯曲菌初次分离时，经48h培养可形成两种菌落；一种为扁平、湿润、灰白色、半透明、边缘不整齐、常沿接种线扩散生长的菌落；另一种为圆形、凸起、半透明、针尖状、有光泽、单个细小菌落。
两种菌落均不溶血。
在布氏肉汤内呈均匀混浊生长。
3.生化反应：本属细菌生化反应不活泼。
不分解糖类、不液化明胶、不分解尿素，V-P和甲基红试验均阴性。
氧化酶均为阳性，大多数弯曲菌能还原硝酸盐、触酶试验为阳性，空肠弯曲菌马尿酸水解试验阳性。
4.抗原结构：有菌体（O）抗原、热不稳定抗原和鞭毛（H）抗原。
根据O抗原可将空肠弯曲菌分为42个血清型。
5.抵抗力：抵抗力较弱，56℃5分钟即被杀死。
干燥环境中仅能存活3小时。
（三）微生物学检验1.标本采集：立即送检，及时接种。
2.检验方法及鉴定（1）直接涂片1）悬滴标本检查：显微镜下观察有无投镖式或螺旋状运动的细菌。
2）革兰染色检查：为革兰阴性逗点状、S形或螺旋状小杆菌。
空肠弯曲菌——精选推荐
食品卫生微生物学检验空肠弯曲菌检验1 范围本标准规定了食品中空肠弯曲菌(Campylobacter jejuni)的检验方法。
本标准适用于食品和食源性疾病样品中空肠弯曲菌的检验。
2 设备和材料除微生物实验室常规灭菌与培养设备外，其他设备与材料如下：2.1 冰箱：2℃～8℃。
2.2 恒温培养箱：25℃±l℃，36℃±l℃，42℃±l℃。
2.3 恒温振荡培养箱：36℃±l℃，42℃±l℃。
2.4 水浴装置：36℃±l℃，l00℃。
2.5 微需氧培养装置：提供微需氧条件(5％氧气、l0％二氧化碳和85％氮气)。
2.6 均质器。
2.7 电子天平：感量0.1g2.8 过滤装置及滤膜(0.22µm，0.45µm)。
2.9 显微镜：l0×～100×，有相差功能。
2.10 离心机：离心力≥20 000×g。
2.11 全自动微生物鉴定系统(VITEK 2)。
2.12 全自动酶联荧光免疫分析仪(VIDAS或mini VIDAS)。
3培养基和试剂3.1 Bolton肉汤：按第A.1章规定。
3.2 改良CCD(mCCD)琼脂：按第A.2章规定。
3.3 哥伦比亚琼脂：按第A.3章规定。
3.4 布氏肉汤：按第A.4章规定。
3.5 氧化酶试剂：按第A.5章规定。
3.6 马尿酸钠水解试剂：按第A.6章规定。
3.7 Mueller Hinton琼脂：按第A.7章规定。
3.8 吲哚乙酸酯纸片：按第A.8章规定。
3.9 Skirrow琼脂：按第A.9章规定。
3.10 0.1％蛋白胨水：按第A.10章规定。
3.11 CFA显色平板n。
3.12 1mol／L碳酸氢钠(NaHC0。
)溶液。
3.13 3％过氧化氢溶液。
3.14 API Campy生化鉴定试剂盒。
3.15 VITEK 2 NH生化鉴定卡。
4检验程序空肠弯曲菌检验程序见图1图1 空肠弯曲茵检验程序5操作步骤5.1 样品处理5.1.1 一般样品取25g(或25 mL)样品(水果、蔬菜、水产品为50g)加入盛有l00 mL Bolton肉汤的有滤网的均质袋中(无滤网的均质袋可使用无菌纱布过滤)，用拍击式均质器均质1 min～2 min；或加入盛有l00 mL Bolton肉汤的均质杯中，以8 000 r／min～10 000 r／min均质l min～2min，经滤网或无菌纱布过滤。
猪空肠弯曲菌病的防治
病 的 培 养 。有 溶 血 和 不 溶 血 两 种 菌 落 。 本 菌 不 发 酵 糖 类 ， 分解 尿 素 ， 液 化 明 胶 ＭＲ试 验 ， 哚 试验 均 为 不 不 吲 阴性 。 对 ｌ ％牛 胆 汁 、 古 霉 索 、 菌 肽 、 黏 菌 素 Ｂ、 万 杆 多 新 生 霉 素 和三 甲 氧 苄 氨 霉 素 有 抵 抗 力 ， 这 一 特 性 可用 于 纯 菌 分 离 。 对链 霉 素 、 霉 素 、 红 四环 素 族 的抗 生 索 敏 感 。 本 菌 抵 抗 力不 强 ，６ ５ ℃５分 钟 被 杀 多 ，紫 外 线 ５分 钟 可 Ｅ 灭活 对 ｆ燥 、 阳光 和一 般 消毒 剂 敏感 。 二 、 行 病 学 本 菌ｌ ｆ然 界分 布很 广 泛 ， 在 于 流 在 ｜ 存 各 种 动 物 体 的 肠 道 内 ， 粪 便 中 排 出 ， 染 外 界 环 境 从 污
置 微 镜 下 观 察 ， 见 纠 莆 体 的 螺 旋 状 运 动 ， 粪 便 巾 可 但
需 有足够数逯的细蒲。 ２、 菌 培 养 是 Ｈ前 最 主 要 的 诊 断 方 法 ， 新鲜 粪 便 细 取 标 本 （ 肛 门 拭 子 ） 入 Ｃ ｒ — ｌｉ 运 送 培 养 基 或 碱 性 或 插 ａ ｙ Ｂ ａｒ ｒ
蛋 白 胨 水 ，在 ２ ４小时 内 直接 或 经 增 菌后 接 种 于有 抗 生 素 （ 古霉 素 ｌ 万 Ｏ毫 克／ 、 升 多黏 素 Ｂ ５０单 位 ／ ， ｛ ２０ 升 ｌ ｛ 氧 氨 嘧 啶 ５毫 克 ／ ， 升 二性 素 Ｂ 毫 克／ ） 升 的硫 乙 醇
酸 钠 培 养 基 。置 ４ ℃ ， ｌ ％～ Ｏ ３ 在 Ｏ ２ ％的二 氧化 碳 巾 ， 养 培
性 隐 窝 增 生 现 象 ， 时 细 胞 内有 弯 曲 菌 存 在 ， 分 细 胞 同 部
空肠弯曲菌检测培训
鉴定过程
❖ 5、吲哚乙酸酯水解试验
❖ 挑取菌落（菌量要大）至羟基吲哚醋酸盐 纸片上，再滴加一滴灭菌蒸馏水。如果吲 哚乙酸脂水解，则在 5 min～10 min 内 出现深蓝色；若无颜色变化则表示没有发 生水解。(10min之内观察，否则会出现假 阳性结果)
弯曲菌的鉴定
特征
空肠弯曲 结肠弯曲 海鸥弯曲 乌普萨拉
2、氧化酶试验
使用无菌棉签蘸取可疑菌落，将氧化酶试剂直 接滴加到沾有菌的棉签上，如果在 10 s 内出 现紫红色、紫罗兰或深蓝色为阳性。弯曲菌属 为阳性。
鉴定过程
❖ 3、过氧化氢酶试验 ❖ 挑取菌落，加到干净玻片上的 3％过氧化氢
溶液中，如果在 30 s 内出现气泡则判定结 果为阳性。空肠弯曲菌、结肠弯曲菌和海鸥 弯曲菌为阳性。
沙门氏菌属的生物学特性
培养特性：
❖ 微需氧菌，在含2.5～5%氧和10%CO2的环境中生长最好。最适温度为37～ 42℃。在正常大气或无氧环境中均不能生长
❖ Skirrow琼脂平板上： 42±1℃微需氧培养48±2h，一种可疑菌落为灰色、 湿润、扁平、有光泽、呈沿接种线向外扩散生长倾向；另一种可疑菌落 为分散突起的单个菌落，其菌落大小一般为1～2mm，边缘整齐，发亮。
❖ mCCD琼脂平板上：42±1℃微需氧培养48±2h，其菌落大小一般为1～2mm， 光泽、潮湿、扁平、呈扩散生长倾向
❖ 血平板上：灰色菌落。
生化特性：
❖ 空肠弯曲菌氧化酶试验阳性，过氧化氢酶试验阳性，马尿酸钠水解试验
阳性，吲哚乙酸酯水解试验阳性。
食品安全国家标准
食品微生物学检验 空肠弯曲菌
microbiologial examination of food hygiene —examination of campylobacter jejuni
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嗜肺军团菌
革兰阴性杆菌 有鞭毛 无芽胞 有微荚膜
致病物质
微荚膜 毒素 菌毛 多种酶
免疫性
嗜肺军团菌为胞内寄生菌
细胞免疫在抗感染中起主要作用
所致疾病
军团病 主要通过呼吸道吸入带菌飞沫。 中央空调冷却塔用水污染军团菌而 导致感染。 临床类型： 流感样型（轻症型） 肺炎型（重症型） 肺外感染
诊断与防治
生物学特性
G
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小杆菌有荚膜
鲍－金（Bordet-Gengou）培养基：
致病物质 不侵入血流 荚膜、菌毛、内毒素及多种生 物活性物质，百日咳毒素、皮 肤坏死毒素等
所致疾病-百日咳
• 传染源：早期病人和带菌者 • 病程分三期：卡他期 痉挛期 阵发性剧咳 恢复期
免疫力
局部粘膜免疫，持久
诊断与防治
其他细菌
空肠弯曲菌 幽门螺杆菌
铜绿假单胞菌
流感嗜血杆菌 百日咳鲍特菌
嗜肺军团菌
弯曲菌属
空肠弯曲菌 (Campylobacter)
(C.jejuni）
生物学特性 致病性 诊断与防治
生物学特性
G 形态细长，呈弧形、螺旋 形、 S形或海鸥状 单鞭毛 微需氧，42℃能生长，营养要 求高
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空肠弯曲菌
致病性
生物学特性
(Pseudomonas)
假单胞菌属
致病性与免疫性 诊断与防治
生物学特性 G 直或微弯杆菌。有荚膜， 鞭毛 需氧 产生带荧光的绿色水 溶性色素
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铜绿假单胞菌
致病性与免疫性
内毒素,有菌毛、荚膜、胞外酶、外 毒素致病 可感染人体的任何组织和部位
继发后化脓性炎症
婴儿：流行性腹泻
皮肤化脓性感染
标本：可采集下呼吸道分泌物、胸水、 活检肺组织及血液等 检查：直接法荧光抗体染色镜检 活检组织标本Dieterle镀银法色 预防：加强水源管理 治疗：首选红霉素
X和V因子巧 克力色平板
流感嗜血杆菌
巧克力色培养基培养形成 露滴状菌落
卫星现象
（satellite phenomenon）
致病物质与免疫性
• 荚膜 • 菌毛 • 内毒素 • IgA蛋白酶
免疫性
致病物质
以体液免疫为主
所致疾病
•继发性（内源性）感染 流行性感冒 常 继 发 于 麻疹 百日咳 结核病等 •原发性（外源性）感染 临 床 类 型 慢性支气管炎 中耳炎 鼻窦炎等
分离培养 鼻咽拭或咳碟法接种
鲍－金培养基 “ 白百破”（DPT）三联疫苗
死疫苗
类毒素
预防
主动免疫
治疗
首选红霉素
嗜肺军团菌 （L. pneumophila)
军团菌属 （ Legionella）
生物学特性 致病物质与免疫性 所致疾病 诊断与防治
生物学特性
G 杆菌Dieterle镀银法
Giemsa法染色 端生或侧生鞭毛，有微荚膜 感染组织 球杆菌，人工培养 多形态性 需氧菌
微需氧菌，需血液或血清
菌落S
致病性与免疫性
与胃窦炎、十二指肠溃疡和胃 溃疡关系密切 可能与胃癌的发生也有关
幽门螺杆菌
去看看 吧
幽门螺旋菌
左：显微数码摄像
右：结构示意图
幽门螺杆菌与疾病
• • • • 胃炎 消化性溃疡 胃癌 胃粘膜相关淋巴样组织（MALT） 淋巴瘤
铜绿假单胞菌 （P.aeruginosa）
急性化脓性感染
诊断与防治
诊断 标本
痰液、 脑脊液、 鼻咽分泌物、 血液和脓液等。 分离培养
直接涂片
脓汁、脑脊液、
镜检
结合临床症状初步诊断 预防 治疗
荚膜多糖菌苗
Hale Waihona Puke 可选用广谱抗生素。百日咳鲍特菌 (B. pertussis)
鲍特菌属 (Bordetella)
生物学特性
致病物质
所致疾病与免疫性 诊断与防治
散发性细菌性肠炎
细胞毒素和一种 不耐热肠毒素
诊断与防治
☂粪便标本涂片、镜检 ☂主要是注意饮水和食
品卫生
幽门螺杆菌
（Helicobacter)
不能生长：42 ℃，25 ℃
螺杆菌属
（H. pylori） 最适温度：37℃
生物学特性 致病性与免疫性 幽门螺杆菌与疾病
生物学特性
在胃粘膜粘液层中常呈鱼群样排列， 传代培养可变为杆状或球型。
诊断与防治
标本取炎症分泌物、脓液、血液等分离 培养 预防：伤口、手术器械等严格消毒 治疗：可选用庆大霉素、多粘菌素等
嗜血杆菌属 (Haemophilus) 流感嗜血杆菌 （H.influenzae）
生物学特性
致病物质与免疫性
所致疾病
诊断与防治
生物学特性
需氧/ 兼性厌 氧
+ G ，多形性
有毒株有荚膜