临床输血检测操作规程完整

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精心整理文件类型:作业指导书文件编号:JCXRMYY -JY-015-2009文件名称:临床输血检测操作规程第01版第0次修改第1页共

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ABO 血型鉴定

1

AB 型及

O 型

和B A

2

2.1

2.2

2.3

3

抗A、抗B血型定型试剂(单克隆抗体):河北医科大学生物医学工程中心,

10ml/支,储存要求:2℃~8℃避光保存,主要成分:分泌抗人A 型和抗人B 型血型原单抗的杂交瘤细胞培养上清液并补加一定量小鼠腹水抗体。0.9/%的生理

盐水:江西科伦医药有限公司。离心机,显微镜。

4、操作步骤

4.1、试管法

4.1.1 取洁净小试管(内径10mm×60mm)3支,分别标明抗—A、抗—B和抗—A

十B,用滴管分别加抗—A、抗—B 和抗—A 十 B 分型血清各l 滴(约50 ul)

于试管底部,再以滴管分别加入受检者5%红细胞盐水悬液1滴,混和。

4.1.2 另取洁净小试管(内径10mm×60mm)3 支,分别标明A、B 和O 细胞。用

5

33

溶血

类B

月日

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4.1.6 凝集强度判断标准

4+ 红细胞凝集成一大块,血清清晰透明。

3+ 红细胞凝集成数小块,血清尚清晰。

2+ 红细胞凝块分散成许多小块,见到游离红细胞。

1+ 肉眼可见大颗粒,周围有较多游离红细胞。

±镜下可见数个红细胞凝集在一起,周围有很多游离红细胞。

MF 混合凝集外观(mixed field)是指镜下可见少数红细胞凝集,而

极大多数红细胞仍呈分散分布。

- 表示阴性,镜下未见凝集,红细胞均匀分布。

4.2

和抗

min

5

ABO

抗-A

+ - + A - + -

- + + B + - -

- - - O + + -

+ + + AB - - -

注:+为凝集;-为不凝集。

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批准日期:年月日实施日期:年月日

文件类型:作业指导书文件编号:JCXRMYY -JY-015-2009

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6.2

6.3

6.4

新的试剂进行检测工作。

6.5 试管、滴管和玻片必须清洁干燥,防止溶血。

6.6 操作方法应按规定,一般应先加血清,然后再加红细胞悬液,以便容易核

实是否漏加血清。

6.7 按理IgM 抗-A 和抗-B 与相应红细胞的反应温度以4℃为最强,但为了防

止冷凝集现象的干扰,一般仍在室温(20—24℃)内进行试验,37℃可使反应减

弱。

6.8 离心时间不宜过长或过短,速度不宜过快或过慢,以防假阳性或假阴性结

果。

6.9 观察时应注意红细胞呈特异性凝集、继发性凝固以及缗钱状排列的区别。

6.10

6.11

6.12

2

5

月日

文件类型:作业指导书文件编号:JCXRMYY -JY-015-2009文件名称:临床输血检测操作规程第01版第0次修改第4页共12页

7、操作性能概要

7.1正反定型结果不一致的原因:

7.1.1 原因:

有技术性问题或红细胞和血清本身的问题,常见者有以下几种:

7.1.1.1 分型血清效价太低、亲和力不强。如抗—A血清效价不高,可将A亚型误定为O型,AB型误定为B型。

35

症。

如发现ABO正反定型结果不一致,先要重复作试验1次。严格执行操作规程,使用质量合格的试剂以及细心观察和解释试验结果,就可解决明显的问题,对一些疑难问题月必须进一步研究。

7.1.2 检查步骤:

7.1.2.1 另从受检者采取l 份新鲜血液标本这样可以纠正因污染或搞错样本

造成的不符合。

7.1.2.2 将红细胞洗涤数次,配成5%生理盐水细胞悬液,用抗—A、抗—B、抗—Al,抗—A十B及抗H做试验可以得到其它有用的信息。

7.1.2.3 对受检红细胞作直接抗球蛋白试验,如结果呈阳性,表示红细胞已被

抗体致敏。

—I

月日

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%HAB分泌型的人有用。

7.1.2.7 如试验结果红细胞呈绢钱状排列,加等渗盐水l滴,混和,往往可使

绢钱现象消失。应注意不应先加盐水l 滴于受检者血清中而后和红细胞作试

验,以免使血清中抗体被稀释。

7.1.2.8 如受检者为A型血而疑为有类B抗原时,可用下列方法进行鉴别:

7.1.2.8.1 观察细胞与抗—A及抗—B的凝集强度,与抗—A的反应要比与抗36—B的反应强。这种区别用玻片法作试验更为明显。

7.1.2.8.2 用受检者红细胞与自身血清作试验,血清中的抗—B不凝集自身红

细胞上的类B抗原。

7.1.2.8.3 检查唾液中是否有A、B物质,如果是分泌型,可检出A物质而无

B

活的

8

9

全国临床检验操作规程(第3版)

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批准日期:年月日实施日期:年月日

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