临床输血检测操作规程完整
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精心整理文件类型:作业指导书文件编号:JCXRMYY -JY-015-2009文件名称:临床输血检测操作规程第01版第0次修改第1页共
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ABO 血型鉴定
1
AB 型及
O 型
和B A
2
2.1
2.2
2.3
3
抗A、抗B血型定型试剂(单克隆抗体):河北医科大学生物医学工程中心,
10ml/支,储存要求:2℃~8℃避光保存,主要成分:分泌抗人A 型和抗人B 型血型原单抗的杂交瘤细胞培养上清液并补加一定量小鼠腹水抗体。0.9/%的生理
盐水:江西科伦医药有限公司。离心机,显微镜。
4、操作步骤
4.1、试管法
4.1.1 取洁净小试管(内径10mm×60mm)3支,分别标明抗—A、抗—B和抗—A
十B,用滴管分别加抗—A、抗—B 和抗—A 十 B 分型血清各l 滴(约50 ul)
于试管底部,再以滴管分别加入受检者5%红细胞盐水悬液1滴,混和。
4.1.2 另取洁净小试管(内径10mm×60mm)3 支,分别标明A、B 和O 细胞。用
5
33
溶血
类B
月日
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4.1.6 凝集强度判断标准
4+ 红细胞凝集成一大块,血清清晰透明。
3+ 红细胞凝集成数小块,血清尚清晰。
2+ 红细胞凝块分散成许多小块,见到游离红细胞。
1+ 肉眼可见大颗粒,周围有较多游离红细胞。
±镜下可见数个红细胞凝集在一起,周围有很多游离红细胞。
MF 混合凝集外观(mixed field)是指镜下可见少数红细胞凝集,而
极大多数红细胞仍呈分散分布。
- 表示阴性,镜下未见凝集,红细胞均匀分布。
4.2
和抗
型
min
5
ABO
抗-A
+ - + A - + -
- + + B + - -
- - - O + + -
+ + + AB - - -
注:+为凝集;-为不凝集。
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批准日期:年月日实施日期:年月日
文件类型:作业指导书文件编号:JCXRMYY -JY-015-2009
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6.2
6.3
6.4
新的试剂进行检测工作。
6.5 试管、滴管和玻片必须清洁干燥,防止溶血。
6.6 操作方法应按规定,一般应先加血清,然后再加红细胞悬液,以便容易核
实是否漏加血清。
6.7 按理IgM 抗-A 和抗-B 与相应红细胞的反应温度以4℃为最强,但为了防
止冷凝集现象的干扰,一般仍在室温(20—24℃)内进行试验,37℃可使反应减
弱。
6.8 离心时间不宜过长或过短,速度不宜过快或过慢,以防假阳性或假阴性结
果。
6.9 观察时应注意红细胞呈特异性凝集、继发性凝固以及缗钱状排列的区别。
6.10
6.11
6.12
2
5
月日
文件类型:作业指导书文件编号:JCXRMYY -JY-015-2009文件名称:临床输血检测操作规程第01版第0次修改第4页共12页
7、操作性能概要
7.1正反定型结果不一致的原因:
7.1.1 原因:
有技术性问题或红细胞和血清本身的问题,常见者有以下几种:
7.1.1.1 分型血清效价太低、亲和力不强。如抗—A血清效价不高,可将A亚型误定为O型,AB型误定为B型。
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症。
如发现ABO正反定型结果不一致,先要重复作试验1次。严格执行操作规程,使用质量合格的试剂以及细心观察和解释试验结果,就可解决明显的问题,对一些疑难问题月必须进一步研究。
7.1.2 检查步骤:
7.1.2.1 另从受检者采取l 份新鲜血液标本这样可以纠正因污染或搞错样本
造成的不符合。
7.1.2.2 将红细胞洗涤数次,配成5%生理盐水细胞悬液,用抗—A、抗—B、抗—Al,抗—A十B及抗H做试验可以得到其它有用的信息。
7.1.2.3 对受检红细胞作直接抗球蛋白试验,如结果呈阳性,表示红细胞已被
抗体致敏。
—I
月日
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血
%HAB分泌型的人有用。
7.1.2.7 如试验结果红细胞呈绢钱状排列,加等渗盐水l滴,混和,往往可使
绢钱现象消失。应注意不应先加盐水l 滴于受检者血清中而后和红细胞作试
验,以免使血清中抗体被稀释。
7.1.2.8 如受检者为A型血而疑为有类B抗原时,可用下列方法进行鉴别:
7.1.2.8.1 观察细胞与抗—A及抗—B的凝集强度,与抗—A的反应要比与抗36—B的反应强。这种区别用玻片法作试验更为明显。
7.1.2.8.2 用受检者红细胞与自身血清作试验,血清中的抗—B不凝集自身红
细胞上的类B抗原。
7.1.2.8.3 检查唾液中是否有A、B物质,如果是分泌型,可检出A物质而无
B
活的
8
9
全国临床检验操作规程(第3版)
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批准日期:年月日实施日期:年月日