食品中赭曲霉毒素的检测-HPLC法
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食品中赭曲霉毒素HPLC检测法
1.0液相色谱条件：
色谱柱：Cloversil-C18 4.6*150mm（5um）
流动相：乙腈/水/乙酸（99+99+2）
流速：1mL/min
检测器：荧光检测器，激发波长333nm,发射波长477nm
进样体积：20-50uL
2.0 样品的提取
2.1 粮食及粮食制品：
研磨样品，但不要研成粉末，使所称样品的95%通过20目筛，置25克研磨的样品于磨口量筒中，加入5克氯化钠和100mL提取液（甲醇：1%碳酸氢钠溶液=8:2），手动震荡3分钟，然后用定量滤纸过滤，收集滤液10ml，加40ml水稀释，混匀后，用玻璃纤维滤纸过滤，收集滤液A。
2.2酒类：
取脱气酒类样品(含二氧化碳的样品使用前先置于4℃冰箱冷藏30min，超声脱气)或不含二氧化碳样品20g于磨口量筒中，用提取液（150g氯化钠，20g碳酸氢钠，水定容至1L）至100ml，混匀，用定量滤纸过滤，收集滤液B。
2.3酱油、醋、酱及酱制品：
取25g样品，用提取液（甲醇：1%碳酸氢钠溶液=8:2）定容至50ml，混匀，用定量滤纸过滤，取10ml滤液，加40ml水稀释，混匀后，用玻璃纤维滤纸过滤，收集滤液C。
3.0 亲和柱操作
3.1粮食及粮食制品：
将免疫亲和柱连接于玻璃注射器下，准确移取10mL滤液A，注入玻璃注射器，调节压力，使上述滤液以1滴/秒的流速通过免疫亲和柱，直至空气进入柱子。
用10ml 纯水以2滴/秒的流速冲洗柱子，直至空气进入柱子。
3.2酒类：
将免疫亲和柱连接于玻璃注射器下，准确移取20mL滤液B，注入玻璃注射器，调节压力，使上述滤液以1滴/秒的流速通过免疫亲和柱，直至空气进入柱子。
用5ml 纯水以2滴/秒的流速冲洗柱子，直至空气进入柱子。
3.3酱油、醋、酱及酱制品：
将免疫亲和柱连接于玻璃注射器下，准确移取10mL滤液C，注入玻璃注射器，调节压力，使上述滤液以1滴/秒的流速通过免疫亲和柱，直至空气进入柱子。
用10mlPBS缓冲液及10ml纯水以2滴/秒的流速冲洗柱子，直至空气进入柱子。
4.0 洗脱
将甲醇分配器中的1.0 mL色谱级甲醇以1滴/秒的流速淋洗柱子，并将所有的样品
洗脱液（1.0mL）收集于玻璃试管中，混匀，上机检测。