降香挥发油的化学成分及抗菌活性研究_赵夏博
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Bioscience and Biotechnology/Chinese Academy of Tropical Agricultural Sciences, Haikou 571101, China; 3. College of Chemistry and Life Science, Leshan Normal University, Leshan 614000, China)
of Protection and Utilization of Biological Resources in Tarim Basin, Alar 843300, China; 2. Hainan Key Laboratory for Research and Development of Natural Products from Li folk Medicine, Institute of Tropical
ZHAO Xia-bo1,2, MEI Wen-li2, GONG Ming-fu3, BAI Hong-jin1, DAI Hao-fu2 (1. College of Life Science, Tarim University/Xinjiang Production and Construction Corps Key Laboratory
46 种组分，总离子流图见图 1。 通过 NIST08 数据库检索， 共鉴定出 16 种化合物， 占色谱流出峰总面积的 98.04%， 按照峰面积归一法进行定量分析， 得出挥发油中各化学 成分的相对质量分数，结果如表 1 所示。
编号
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16
Abstract: The volatile oil from the heartwood of Dalbergiae odoriferae T. Chen was extracted by hydrodistillation in a Clevengertype apparatus, and analyzed by gas chromatography-mass spectrometry (GC-MS). A total of sixteen compounds, constituting over 98.04% of the total oil, were identified from the volatile oil. The major components of volatile oil were caryophyllene oxide (54.22% ), 7,11 dimethyl-10-dodecen-1-ol (14.11%), 6,11-dimethyl-2,6,10-dodecatrien-1-ol (10.24%) and nerolidol (10.22%). In addition, antibacterial activity of the volatile oil was evaluated. The oil showed activity against S. aureus and MRSA.
降 香 的 化 学 成 分 多 样 ，主 要 为 挥 发 油[2-4]和 黄 酮 类 化 合 物[2]， 据 报 道 ， 降 香 挥 发 油 的 主 要 成 分 为 橙 花 叔 醇 、 氧 化 石竹烯、反式金合欢烯等，具有抗凝血和抗心肌缺血的作 用[5-7]， 与 丹 参 、 川 穹 等 活 血 化 瘀 类 中 药 配 伍 用 于 治 疗 心 脑 血管系统疾病，常制成注射剂[8]。 而目前有关降香挥发油 抗菌活性的研究较少。 本研究采用水蒸气蒸馏法提取降 香挥发油，用 GC-MS 联用技术对降香挥发油的化学成分
文 献 标 识 码 ：A
文 章 编 号 ：1004-874X （2012 ）03-0095-02
Study on chemical compositions and antibacterial activity of the volatile oil from Dalbergiae odoriferae
2 结果与分析
2.1 降香挥发油成分 采用 GC-MS 法对降香的挥发油进行了分析，分离出
丰度
5500000 5000000 4500000 4000000 3500000 3000000 2500000 2000000 1500000 1000000 500000
0 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 时 间 （min） 图 1 降香挥发油的总离子流量图
用滤纸片琼脂扩散法测定挥发油的抗菌活性，以硫酸 卡那霉素为阳性对照， 结果表明， 降香挥发油对 S. aureus 和 MRSA 均具有抑制作用， 其抑菌圈直径分别为 18.0 mm 和 11.0 mm，阳性对照分别为 32.0 mm 和 40.5 mm。
广东农业科学 2012 年第 3 期
95
降香挥发油的化学成分及抗菌活性研究
赵夏博1,2， 梅文莉2， 龚明福3， 白红进1， 戴好富2 (1.新疆塔里木大学生命科学学院/新疆生产建设兵团塔里木盆地生物资源保护与利用重点实验室， 新疆 阿拉尔 843300；
2.中国热带农业科学院/热带生物技术研究所/海南省黎药资源天然产物研究与利用重点实验室， 海南 海口 571101； 3.乐山师范学院化学与生命科学学院， 四川 乐山 614000)
摘 要：用水蒸气蒸馏法提取降香挥发油 ，经 GC-MS 分析 鉴定 出 16 个化 合物 ，占 挥发 油总 量 的 98.04%，其 主要 成 分有 氧化
石 竹 烯 (54.22%) 、7,11- 二 甲 基 -10- 十 二 碳 烯 -1- 醇 (14.11%) 、6,11- 二 甲 基-2,6,10- 十 二 碳 三 烯-1- 醇 (10.24%) 和 橙 花 叔 醇 (10.22%) 等 。
Key words: Dalbergiae odoriferae; volatile oil; antibacterial activity
降香为豆科植物降香檀（Dalbergiae odoriferae T. Chen） 树干和根的干燥心材，为海南省特有植物，分布在白沙、 东方、乐东和三亚等地，现在福建、广东、广西也有分布。 降香是一种传统中药，具有行气活血、止痛、止血的功效， 多用于脘腹疼痛、肝郁胁痛、胸痹刺痛、跌扑损伤、外伤出 血[1]。 现代药理学研究表明其成分具有抗炎、中枢神经系 统抑制、抗凝血、血管舒张、抗高血脂、白细胞三烯生物合 成 的 抑 制 以 及 抗 肿 瘤 等 作 用 [2]。
进行分析，并测定其体外抗菌活性，现将结果报道如下。
1 材料与方法
1.1 试验材料 降香心材于 2010 年购自海南省海口市农贸市场，经
中国热带农业科学院热带生物技术研究所代正福Fra Baidu bibliotek究员 鉴定。
仪器：水蒸气蒸馏装置、美国安捷伦 7890A/5975C GCMS 联用仪。
无水 NaSO4 和乙醚均为分析纯。 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（Methicillin-resistant Staphylococcus aureus, MRSA）ATCC 9551 和 金 黄 色 葡 萄 球 菌（Staphylococcus aureus）ATCC 5165 由海南省药品检验 所提供。 MRSA 和 S.aureus 均采用牛肉膏蛋白胨培养基培 养[9]。 1.2 试验方法 1.2.1 挥发油的提取 称取粉碎后的降香心材 134 g，用 水蒸气蒸馏提取 3 h。 馏出液用乙醚萃取后，加入少量无 水 NaSO4，静 置 ，干 燥 ，得 挥 发 油 2.35 g，得 油 率 为 1.75%。 挥发油为浅黄色油状，具有特殊的清香味。 将所得挥发油 密封、避光、冷藏备用。
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1.2.2 GC-MS 条件 色谱柱：HP-5MS 石英毛细管柱(30 m × 0.25 mm；0.25 μm)；升温程序：从 60℃开始，以 3℃/min 升温至 240℃，保持 10 min；载气为 He，柱流量 1.0 mL/min， 进样口温度 230℃；分流比 25:1。 质谱条件：EI 源；电离电压 70 eV；离子源温度 230℃，四级杆温度 150℃，传输线温度 300°C；扫描质量范围 40~400 amu，进样量 1.0 μL。 1.2.3 抗菌活性的测定 将挥发油配成浓度为 20 mg/mL 的样品溶液，取 50 μL 滴加于直径为 6 mm 的灭菌滤纸片 上，待溶剂挥干后，将已点样的滤纸片贴于已涂供试菌悬 液的牛肉膏蛋白胨琼脂培养基上，室温静置培养，12 h 后 测定抑菌圈直径，包含滤纸片直径 6 mm，每个处理重复 3 次， 取 10 μL 浓度为 0.64 mg/mL 硫酸卡那霉素作为阳性 对 照 ，通 过 比 较 抑 菌 圈 直 径 大 小 来 确 定 抗 菌 活 性 [10]。
分子式
C12H22O C15H24 C12H20O3 C14H22O2 C15H24O C13H22O2 C13H22O2 C14H28O C15H24O C15H26O C15H24O C14H24O2 C15H24 C14H24O C15H26O C15H26O
分子量
182 204 212 222 220 210 210 212 220 222 220 224 204 208 222 222
表 1 降香挥发油主要化学成分及其含量
化合物
10- 十 二 炔-1- 醇 檀香烯 3- 乙 酰 氧 基 -4-(1- 羟 基 -1- 甲 基 乙 基)-1- 甲 基 -环 己 烯 5- 异 丙 酯-2,8- 二 甲 基 -9- 氧 杂 三 环[4.4.0.0(2,8)] 癸 烷 -7- 酮 (E-) 金 合 欢 烯 氧 化 物 4-(2- 羟 基 -2,6,6- 三 甲 基 环 己 基)-3- 丁 烯-2- 酮 3-环 戊 基 丙 酸 环 戊 酯 7,11- 二 甲 基-10- 十 二 碳 烯 -1- 醇 1,5,5,8- 四 甲 基-12- 氧 化 双 环 [9.1.0] 十 二 烷-3,7- 丁 二 烯 橙花叔醇 氧化石竹烯 11- 十 二 炔-1- 醇 乙 酸 酯 金合欢烯 6,11- 二 甲 基-2,6,10- 十 二 碳 三 烯-1- 醇 2- 丁 基 -3- 甲 基 -5-(2- 甲 基 -2- 丙 烯 基 )环 己 酮 红没药醇
从表 1 可以看出，在鉴定出的 16 种化合物中，含量最 高的是氧化石竹烯，相对含量达到 54.22%，其次为 7,11二甲基-10-十二碳烯-1-醇， 相对含量达到 14.11%，6,11-二 甲基-2,6,10-十二碳三烯-1-醇的相对含量达到 10.24%， 橙花叔醇的相对含量达到 10.22%等。 2.2 降香挥发油活性测定结果
同时，测定了挥发油的体外抗菌活性，结果表明，降香挥发油对金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)和耐甲氧西林金黄色葡萄球
菌(Methicillin-resistant Staphylococcus aureus, MRSA)均具有抑制作用。
关键词：降香； 挥发油； 抗菌活性
中 图 分 类 号 ：R284.1
收 稿 日 期 ：2011-10-31 基 金 项 目 ：海 南 省 国 际 合 作 项 目(GJXM20100005) 作 者 简 介 ：赵 夏 博 （1986- ），女 ，在 读 硕 士 生 ，E-mail ：zxbzq123@ 163.com 通 讯 作 者 ：戴 好 富 （1974-），男 ，博 士 ，研 究 员 ，E-mail：hfdai2001@ yahoo.com.cn
保 留 时 间 （min）
24.408 25.896 26.523 27.897 28.796 29.091 29.612 29.95 30.041 30.248 30.74 30.837 31.164 32.825 32.915 33.509
相 对 含 量 （%）
0.04 0.31 0.08 0.23 0.46 0.44 0.76 14.11 3.47 10.22 54.22 0.23 0.14 10.24 2.63 0.46
of Protection and Utilization of Biological Resources in Tarim Basin, Alar 843300, China; 2. Hainan Key Laboratory for Research and Development of Natural Products from Li folk Medicine, Institute of Tropical
ZHAO Xia-bo1,2, MEI Wen-li2, GONG Ming-fu3, BAI Hong-jin1, DAI Hao-fu2 (1. College of Life Science, Tarim University/Xinjiang Production and Construction Corps Key Laboratory
46 种组分，总离子流图见图 1。 通过 NIST08 数据库检索， 共鉴定出 16 种化合物， 占色谱流出峰总面积的 98.04%， 按照峰面积归一法进行定量分析， 得出挥发油中各化学 成分的相对质量分数，结果如表 1 所示。
编号
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16
Abstract: The volatile oil from the heartwood of Dalbergiae odoriferae T. Chen was extracted by hydrodistillation in a Clevengertype apparatus, and analyzed by gas chromatography-mass spectrometry (GC-MS). A total of sixteen compounds, constituting over 98.04% of the total oil, were identified from the volatile oil. The major components of volatile oil were caryophyllene oxide (54.22% ), 7,11 dimethyl-10-dodecen-1-ol (14.11%), 6,11-dimethyl-2,6,10-dodecatrien-1-ol (10.24%) and nerolidol (10.22%). In addition, antibacterial activity of the volatile oil was evaluated. The oil showed activity against S. aureus and MRSA.
降 香 的 化 学 成 分 多 样 ，主 要 为 挥 发 油[2-4]和 黄 酮 类 化 合 物[2]， 据 报 道 ， 降 香 挥 发 油 的 主 要 成 分 为 橙 花 叔 醇 、 氧 化 石竹烯、反式金合欢烯等，具有抗凝血和抗心肌缺血的作 用[5-7]， 与 丹 参 、 川 穹 等 活 血 化 瘀 类 中 药 配 伍 用 于 治 疗 心 脑 血管系统疾病，常制成注射剂[8]。 而目前有关降香挥发油 抗菌活性的研究较少。 本研究采用水蒸气蒸馏法提取降 香挥发油，用 GC-MS 联用技术对降香挥发油的化学成分
文 献 标 识 码 ：A
文 章 编 号 ：1004-874X （2012 ）03-0095-02
Study on chemical compositions and antibacterial activity of the volatile oil from Dalbergiae odoriferae
2 结果与分析
2.1 降香挥发油成分 采用 GC-MS 法对降香的挥发油进行了分析，分离出
丰度
5500000 5000000 4500000 4000000 3500000 3000000 2500000 2000000 1500000 1000000 500000
0 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 时 间 （min） 图 1 降香挥发油的总离子流量图
用滤纸片琼脂扩散法测定挥发油的抗菌活性，以硫酸 卡那霉素为阳性对照， 结果表明， 降香挥发油对 S. aureus 和 MRSA 均具有抑制作用， 其抑菌圈直径分别为 18.0 mm 和 11.0 mm，阳性对照分别为 32.0 mm 和 40.5 mm。
广东农业科学 2012 年第 3 期
95
降香挥发油的化学成分及抗菌活性研究
赵夏博1,2， 梅文莉2， 龚明福3， 白红进1， 戴好富2 (1.新疆塔里木大学生命科学学院/新疆生产建设兵团塔里木盆地生物资源保护与利用重点实验室， 新疆 阿拉尔 843300；
2.中国热带农业科学院/热带生物技术研究所/海南省黎药资源天然产物研究与利用重点实验室， 海南 海口 571101； 3.乐山师范学院化学与生命科学学院， 四川 乐山 614000)
摘 要：用水蒸气蒸馏法提取降香挥发油 ，经 GC-MS 分析 鉴定 出 16 个化 合物 ，占 挥发 油总 量 的 98.04%，其 主要 成 分有 氧化
石 竹 烯 (54.22%) 、7,11- 二 甲 基 -10- 十 二 碳 烯 -1- 醇 (14.11%) 、6,11- 二 甲 基-2,6,10- 十 二 碳 三 烯-1- 醇 (10.24%) 和 橙 花 叔 醇 (10.22%) 等 。
Key words: Dalbergiae odoriferae; volatile oil; antibacterial activity
降香为豆科植物降香檀（Dalbergiae odoriferae T. Chen） 树干和根的干燥心材，为海南省特有植物，分布在白沙、 东方、乐东和三亚等地，现在福建、广东、广西也有分布。 降香是一种传统中药，具有行气活血、止痛、止血的功效， 多用于脘腹疼痛、肝郁胁痛、胸痹刺痛、跌扑损伤、外伤出 血[1]。 现代药理学研究表明其成分具有抗炎、中枢神经系 统抑制、抗凝血、血管舒张、抗高血脂、白细胞三烯生物合 成 的 抑 制 以 及 抗 肿 瘤 等 作 用 [2]。
进行分析，并测定其体外抗菌活性，现将结果报道如下。
1 材料与方法
1.1 试验材料 降香心材于 2010 年购自海南省海口市农贸市场，经
中国热带农业科学院热带生物技术研究所代正福Fra Baidu bibliotek究员 鉴定。
仪器：水蒸气蒸馏装置、美国安捷伦 7890A/5975C GCMS 联用仪。
无水 NaSO4 和乙醚均为分析纯。 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（Methicillin-resistant Staphylococcus aureus, MRSA）ATCC 9551 和 金 黄 色 葡 萄 球 菌（Staphylococcus aureus）ATCC 5165 由海南省药品检验 所提供。 MRSA 和 S.aureus 均采用牛肉膏蛋白胨培养基培 养[9]。 1.2 试验方法 1.2.1 挥发油的提取 称取粉碎后的降香心材 134 g，用 水蒸气蒸馏提取 3 h。 馏出液用乙醚萃取后，加入少量无 水 NaSO4，静 置 ，干 燥 ，得 挥 发 油 2.35 g，得 油 率 为 1.75%。 挥发油为浅黄色油状，具有特殊的清香味。 将所得挥发油 密封、避光、冷藏备用。
96
1.2.2 GC-MS 条件 色谱柱：HP-5MS 石英毛细管柱(30 m × 0.25 mm；0.25 μm)；升温程序：从 60℃开始，以 3℃/min 升温至 240℃，保持 10 min；载气为 He，柱流量 1.0 mL/min， 进样口温度 230℃；分流比 25:1。 质谱条件：EI 源；电离电压 70 eV；离子源温度 230℃，四级杆温度 150℃，传输线温度 300°C；扫描质量范围 40~400 amu，进样量 1.0 μL。 1.2.3 抗菌活性的测定 将挥发油配成浓度为 20 mg/mL 的样品溶液，取 50 μL 滴加于直径为 6 mm 的灭菌滤纸片 上，待溶剂挥干后，将已点样的滤纸片贴于已涂供试菌悬 液的牛肉膏蛋白胨琼脂培养基上，室温静置培养，12 h 后 测定抑菌圈直径，包含滤纸片直径 6 mm，每个处理重复 3 次， 取 10 μL 浓度为 0.64 mg/mL 硫酸卡那霉素作为阳性 对 照 ，通 过 比 较 抑 菌 圈 直 径 大 小 来 确 定 抗 菌 活 性 [10]。
分子式
C12H22O C15H24 C12H20O3 C14H22O2 C15H24O C13H22O2 C13H22O2 C14H28O C15H24O C15H26O C15H24O C14H24O2 C15H24 C14H24O C15H26O C15H26O
分子量
182 204 212 222 220 210 210 212 220 222 220 224 204 208 222 222
表 1 降香挥发油主要化学成分及其含量
化合物
10- 十 二 炔-1- 醇 檀香烯 3- 乙 酰 氧 基 -4-(1- 羟 基 -1- 甲 基 乙 基)-1- 甲 基 -环 己 烯 5- 异 丙 酯-2,8- 二 甲 基 -9- 氧 杂 三 环[4.4.0.0(2,8)] 癸 烷 -7- 酮 (E-) 金 合 欢 烯 氧 化 物 4-(2- 羟 基 -2,6,6- 三 甲 基 环 己 基)-3- 丁 烯-2- 酮 3-环 戊 基 丙 酸 环 戊 酯 7,11- 二 甲 基-10- 十 二 碳 烯 -1- 醇 1,5,5,8- 四 甲 基-12- 氧 化 双 环 [9.1.0] 十 二 烷-3,7- 丁 二 烯 橙花叔醇 氧化石竹烯 11- 十 二 炔-1- 醇 乙 酸 酯 金合欢烯 6,11- 二 甲 基-2,6,10- 十 二 碳 三 烯-1- 醇 2- 丁 基 -3- 甲 基 -5-(2- 甲 基 -2- 丙 烯 基 )环 己 酮 红没药醇
从表 1 可以看出，在鉴定出的 16 种化合物中，含量最 高的是氧化石竹烯，相对含量达到 54.22%，其次为 7,11二甲基-10-十二碳烯-1-醇， 相对含量达到 14.11%，6,11-二 甲基-2,6,10-十二碳三烯-1-醇的相对含量达到 10.24%， 橙花叔醇的相对含量达到 10.22%等。 2.2 降香挥发油活性测定结果
同时，测定了挥发油的体外抗菌活性，结果表明，降香挥发油对金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)和耐甲氧西林金黄色葡萄球
菌(Methicillin-resistant Staphylococcus aureus, MRSA)均具有抑制作用。
关键词：降香； 挥发油； 抗菌活性
中 图 分 类 号 ：R284.1
收 稿 日 期 ：2011-10-31 基 金 项 目 ：海 南 省 国 际 合 作 项 目(GJXM20100005) 作 者 简 介 ：赵 夏 博 （1986- ），女 ，在 读 硕 士 生 ，E-mail ：zxbzq123@ 163.com 通 讯 作 者 ：戴 好 富 （1974-），男 ，博 士 ，研 究 员 ，E-mail：hfdai2001@ yahoo.com.cn
保 留 时 间 （min）
24.408 25.896 26.523 27.897 28.796 29.091 29.612 29.95 30.041 30.248 30.74 30.837 31.164 32.825 32.915 33.509
相 对 含 量 （%）
0.04 0.31 0.08 0.23 0.46 0.44 0.76 14.11 3.47 10.22 54.22 0.23 0.14 10.24 2.63 0.46