猪流感病毒检测卡说明书(完整版)
三株H1N1亚型猪流感病毒M基因序列测定与进化分析
猪流感，是集约化养猪场普遍存在且难以根除的猪呼吸道疾病之一，也是世界上最常见的猪传染病之一，目前有10种血清亚型。
H1N1亚型SIV在中国日趋复杂和多变，与其他亚型流感病毒密切相关，并在其他谱系之间发生多重重组，其中基质蛋白位于流感病毒第7段，含有1 027个核苷酸，具有M1和M2两个相互重叠的编码区。
本试验通过对三株H1N1亚型SIV的M基因进行鉴定分析，为进一步防控猪流感病毒的流行和进化情况提供资料。
1 实验材料1.1 材料广东清远某养猪场采集的具有流感症状的猪的猪鼻腔拭子，置于－80℃冰箱保存。
SPF（无特定病原体）鸡胚购自广东新兴大华农禽蛋有限公司SPF实验动物中心。
基因工程菌为E.coil DH5α，感受态（T a KaRa，日本）；常规克隆T载体是pMD19-T Vector （T aKaRa，日本）。
1.2 实验相关试剂、试剂盒、培养基Ex T aq®（Catalog No. DRR001A）、dNTP Mix-ture（Catalog No. D4030RA）、pMD®19-T Vector （Catalog No. D102A）、E.Z.N.A.® Gel Extraction Kit （Catalog No. D2500-01），E.Z.N.A.® Plasmid Mini Kit I（Catalog No. D6943-01）：（Omega公司产品）。
RNase inhibitor（T aKaRa，日本）、DNase Ⅰ（T aKaRa，日本）、Surface RNase Erasol（北京天恩泽基因科技有限公司，中国）、FastStart SYBR Green Master (Rox)（Roche，瑞士）、RNAiso Plus RNA提取试剂（Catalog No. D9108A）、PrimeScript® One Step RT-PCR Kit Ver. 2（Catalog No. DRR055A）。
猪瘟抗体检测卡说明书(完整版)
猪瘟抗体快速检测试剂盒——（胶体金法）使用说明书【名称】通用名称：猪瘟抗体快速检测试剂盒（胶体金法）英文名称：Rapid Anti-CSFV Test汉语拼音：Zhuwen Kangti Kuaisu Jiance ShijiHe(Jiaoti Jin Fa)【用途】用于检测猪血清/血浆/全血样品中猪瘟(Classical Swine Fever, CSF)抗体。
【实验原理】猪瘟抗体快速检测试剂盒（胶体金法），系采用胶体金免疫层析技术，检测样品（血清、血浆或全血）中猪瘟抗体的方法。
在玻璃纤维纸上预包被金标记灭活猪瘟抗原（Au-Agl），在硝酸纤维素膜上检测线和对照线处分别包被猪瘟抗原(Ag2)和兔抗猪瘟抗体。
当检测样品为阳性时，样品中猪瘟抗体与胶体金标记猪瘟抗原（Au-Ag1）结合形成复合物，由于层析作用复合物沿纸条向前移动，经过检测线时与预包被的猪瘟抗原(Ag2)形成“Au-Ag1-猪瘟抗体-Ag2-固相材料”免疫复合物而凝聚显色，游离金标记抗原则在对照线处与兔抗猪瘟抗体结合而富集显色。
阴性样品则仅在对照线处显色。
操作简便，快速，结果直观、准确，灵敏度高，容易判定。
【试剂盒组成】1.猪瘟抗体检测卡50头份2.说明书1份3.一次滴管50根【操作方法】1.用1.5ml样品管，采血0.5-1ml待检测血清自然析出或用离心机离心10分钟左右，使血清析出。
2.将检测卡平置于桌面上，用吸管吸取被检血清，在检测卡的椭圆形加样孔内加入2滴约80~100ul。
在室温下反应20分钟判定结果。
（检测卡如在4℃保存，必须恢复至室温后方可进行检测）【结果判定】阳性：对照线区（C）和检测线区(T)各出现一条紫红色线。
检测线(T)的颜色越深，表明猪瘟抗体的滴度越高。
阴性：只有对照线区（C）出现一条紫红色线。
无效：未出现紫红色线或只在检测区(T)出现紫红色线，对照线区(C)未出现紫红色线。
【诊断参考】被检样品加样后20分钟可与对照卡的色带滴度进行参考比较。
猪细小抗体检测卡说明书(完整版)
猪细小抗体金标快速检测卡使用说明书
【原理】
猪细小病毒抗体检测试剂盒(胶体金法)，系采用国际最先进的胶体金免疫层析技术检测样本(全血、血清、血浆)中抗猪细小病毒抗体的方法。
整个试验只需10分钟，操作简便、快速、准确，灵敏度高、结果直观、容易判定。
【操作步骤】
1．在检测卡的加样孔内加入2滴(100ul)待检血清或血液样品。
2．将检测卡平放于桌面上，在室温下静置5－10分钟内判定结果。
超过30分钟的结果只能作为参考。
【结果判定】
1. 阳性：在观察孔内，检测线区(T)及对照线区(C)同时出现紫红色线。
猪细小病毒抗体滴度越高，检测线(T)颜色越深。
2. 弱阳性：在观察孔内，检测线区(T)及对照线区(C)同时出现紫红色线，但检测线区(T)出现的颜色很浅。
3. 阴性：在观察孔内，只有对照线区(C)出现一条紫红色线。
4. 失效：在观察孔内，对照线区(C)和检测线区(T)都不出现紫红色线；或仅检测线区(T)出现紫红色线。
【注意事项】
铝箔打开后，检测卡应尽快使用；受潮后检测卡将失效。
常温保存，保质期18个月。
【特点】
敏感：阳性检出率达到98%；
特异：不与其它常见猪病如蓝耳病、伪狂犬、猪瘟发生交叉反应，特异性97%；
方便：肉眼判断、无需仪器、操作简单；
快速：5－10分钟即可以出结果，有利于疫情的快速鉴别和免疫水平监测；用途：适合于各级防检部门、猪场、兽医站广泛使用。
一例仔猪猪流感、猪瘟、猪圆环病毒2型和增生性肠炎混合感染的诊断
一
—７ —— ９—
例仔猪猪流感 ◆ 猪瘟◆ 猪圃环病毒 ２型 和增生性肠炎混合感染的诊断
赵彦宗， 苏丹萍 ， 东生 贺
（ 南农 业 大学兽 医学院 ， 东 广 州 ５（４） 华 广 １６２ ）
摘 要： 外地 购进 的猪 苗 ， 从 由于 生存环 境 的改 变必 然 产生应 激 ， 使猪 体 的抵抗 力下 降 ， 同时母 源抗 体 的逐 渐 消 失 ， 致仔 猪 导
型和增生性肠炎混合感染 ， 利用以建立 的方法体 系进行鉴定 。
４１ 瘟 病 毒抗 原 检 测 ． 、 Ｊ 犬食或绝食 、 鼻镜发绀 冰凉 、 两耳 发绀边缘坏死 、 眼结膜苍 白、 皮肤苍 自腹 下有 血点 、 粪便酱 油 色、 体温不高处于濒死期 。
病， 本病的剖检病理变化 明显 ， 易做出诊断 。
一
月初广州连降小雨 ， 天气阴冷 ， 空气 湿度 加大 ， 加了仔 增
猪感染疾病 的机会。通过流行病学调查 、 临床症状 、 剖检病变 、 实
验室检测进行综合判断。
１ 环境 条件 和猪群情况
猪舍南北走向 ， － Ｉ供 出入。仔猪 ４ 只有－ ＇ １ ０多头 ， 体重 ２ ５
通讯作者 ： 贺东生 （９ ８ ）男， １ ６一 ， 副教授 ， 博士， 邮箱：ｈ ￣ ｃ ｕ ｅ ｕｃ ｄ ｅ ｓａ ． ｄ． ｎ 基 金 项 目 ：教 育部 “ 新 团 队 计 划 ” ２ ０— ８ 创 （ ７ ６ ）与 番 禺科 技 局 ０
（ ８ Ｚ ６ － ） ２ ０ 一 一 ０ １ 资助 ０
容 易发 病 。 近 某 实验 室从 外 地 购选猪 苗 用于 动物 实验 ， 发病 ， 过 流行 病 学调 查和 实验 室诊 断 ， 最 先后 通 确诊 为猪 流感 、 瘟 、 猪
猪流感的防控及检测样品采集方法
广西畜牧兽医2019年Vol.35(4)173措施，以免发展成为重度脱肛。
整复手术只是一个疗，调整母猪各项生理机能，才能确保母仔平安，将简单的外科手术，术后护理才是保证手术成功的关因脱肛造成的损失降到最低。
键，只有找出引起脱肛的根本原因并进行相应的治猪流感的防控及检测样品采集方法孔子荣】，李三木2,张书祥】，韩银华2,熊毅2*（1-广西大学动物科学技术学院，广西南宁530005,2.广西壮族自治区动物疫病预防控制中心，广西南宁530001）中图分类号:S858.285.3文献标识码：B 1猪流感及其防控意义猪流感（swine influenza，SB）呈世界性分布，各地均有流行，发病率高［1］（猪流感能直接引起患病猪的死亡，并使患病猪的生长或生产不良，对养猪业的危害极大，研究表明康复猪和隐形感染猪是以后猪流感的传染染，猪流感作为一种主要的免疫抑制疾病，在猪场中普遍存在且难以根除［1，2］（猪在感染猪流感病毒（SIB）后，易导致呼吸系统疾病的并发或者混合感染，加剧流感病毒危害性，加大死亡率。
猪也是流感病毒“混合器”，极易产生流感病毒基因重排带来极其严重的公共卫生安全问题，因此猪流感的防控极其重要。
2防控措施2.1综合防控适当减小饲养密度，避免猪由于拥挤造成的应激，建议保育舍每头仔猪应有0.3m2~0.4m2的生活空间，育肥猪应有0.7m2以上的生活空间。
加强猪舍通风换气能力，应采用自然通风和机械排风，避免由于空气条件恶劣损伤猪呼吸道,导致其防御能力降低而发病。
改善营养条件，良好的营养条件可提高猪对疾病的抵抗能力。
针对不同阶段的猪群要合理配制饲料，注意补充保证猪免疫功能的微量元素，有研究表明架子猪饲料中添加维生素E和硒，增加猪对猪流感的免疫反应水平叫强化生物安全，除了猪场选址布局合理以及完善的废物处理和消毒措施外，由于SIB既感染猪又感染人，因此还应特别注意人携带猪流感病毒的传入，外来人员不应带入猪场内参观⑷，避免生物性传播造成病毒传入。
15022263_H1、H3亚型猪流感病毒双重实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立及应用
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猪瘟ELISA抗体检测试剂盒说明书
猪瘟ELISA抗体检测试剂盒猪瘟病毒ELISA抗体检测试剂盒使用说明书【简介】试剂盒由抗原包被的微孔板，酶标羊抗猪IgG及其它试剂制成，应用间接ELISA原理检测猪血清中抗猪瘟病毒抗体。
【用途】猪瘟ELISA诊断试剂盒用于检测猪血清中猪瘟病毒抗体。
评估猪场猪瘟疫苗免疫状况，感染猪的血清学诊断。
【原理】本试剂盒是采用猪瘟抗原包被微孔板，在试验中，加入稀释的对照血清和待检血清，经温育后，若样品中含有抗猪瘟病毒的特异性抗体，则将与检测板上抗原结合，经洗涤除去未结合的抗体和其他成分后；再加入酶标二抗，与检测板上抗原抗体复合物发生特异性结合；再经洗涤除去未结合的酶结合物，在孔中加TM B底物液，与酶反应形成蓝色产物，加入HF溶液终止反应后，用酶标仪630nm波长测定各反应孔中的OD 值。
【试剂盒主要成分】1 包被抗原的微孔板 2块（96孔/块）2 阴、阳性对照血清各1管（0.5ml/管）3 羊抗猪酶标二抗 1瓶（20ml/瓶）4 20倍浓缩洗涤液 1瓶（30ml/瓶）5 底物A液、B液各1瓶（10ml/瓶）6 终止液 1瓶（10ml/瓶）7 样品稀释液 1瓶（50ml/瓶）8 血清稀释板 2块（96孔/块）9 说明书 1张【样品制备】取动物全血，按常规方法制备血清，要求血清清亮，无溶血。
【洗涤液配制】使用前，浓缩的洗涤液应恢复至室温（25℃左右），并摇动使沉淀的盐溶解（最好在37℃水中加热5-10m in），然后用蒸馏水或去离子水作20倍稀释（例如：每板用20 ml浓缩液加上380ml水），稀释好的洗涤液在4℃可以存放7天。
【样品稀释】在血清稀释板中按1：40的体积稀释待检血清（195μl样品稀释液中加5μl待检血清）。
注意：阳性对照和阴性对照1：40稀释，（234μl样品稀释液中加6μl对照血清）。
【注意事项】1 试剂盒使用前各试剂应平衡至室温，使用后放回2-8℃。
2 不同批号试剂盒的试剂组分不得混用，使用试剂时应防止试剂污染。
猪瘟抗原检测卡说明书(完整版)
猪瘟抗原快速检测试剂盒——（胶体金法）使用说明书【名称】通用名称：猪瘟抗原快速检测试剂盒（胶体金法）英文名称：Rapid CSFV Test汉语拼音：Zhuwen Kangyuan Kuaisu Jiance Shiji He(Jiaoti Jin Fa)【用途】用于检测猪血清/血浆/全血样品中猪瘟病毒(Classical Swine fever virus, CSFV)抗原，用于猪瘟的辅助诊断。
【实验原理】猪瘟病毒抗原快速检测试剂盒（胶体金法）采用胶体金免疫层析技术，在玻璃纤维纸上预包被金标记鼠抗猪瘟病毒单克隆抗体（Au-Ab1），在硝酸纤维素膜上检测线和对照线处分别包被鼠抗猪瘟病毒单克隆抗体（Ab2）和羊抗鼠IgG，检测样品为阳性时，样品中的猪瘟病毒抗原（Ag）可与包被在试纸条前端的胶体金标记的鼠抗猪瘟病毒单克隆抗体（Au-Ab1）结合，形成免疫复合物，由于层析作用，复合物沿膜带向前移动，经过检测线时与预包被的鼠抗猪瘟病毒单克隆抗体（Ab2）形成“Au-Ab1-Ag-Ag2-固相材料”免疫复合物而凝聚显色，游离金标记抗体在对照线处与羊抗鼠IgG体结合而富集显色。
阴性样品则仅在对照线处显色。
检测时只需将血清/血浆/全血加在检测卡的加样孔内，操作简便、快速，结果直观、准确，灵敏度高，容易判定。
【试剂盒组成】1.猪瘟抗原检测卡50头份2.说明书1份3.一次滴管50根【试验方法】1、将检测卡从铝箔袋中取出，水平放置并做好标记。
2、在检测卡的加样孔内加入2滴（70-100ul）待检血清/血浆/全血标本。
3、20分钟内观察并记录实验结果。
【结果判定】阳性：对照线区（C）和检测线区（T）各出现一条紫红色线。
阴性：只有对照线区（C）出现一条紫红色线。
无效：未出现紫红色线或只在检测区(T)出现紫红色线，对照线区(C)未出现紫红色线。
【注意事项】1. 操作前请仔细阅读说明书；2. 检测样品可以是血清/血浆/全血；3. 检测卡从铝箔袋中取出后，应尽快进行试验，避免放置于空气中过长时间，试剂吸潮后将失效；4. 实验环境应保持一定湿度，避风，避免在过高温度下进行试验；5. 试剂盒在室温下保存，如在2-8℃冷藏，使用前应平衡至室温后方可打开铝箔袋进行检测操作。
人猪流感(H1N1)病例标本采集和实验室检测指南
附件3.人猪流感（H1N1）病例标本采集和实验室检测指南（暂行）猪流行性感冒（ H1N1病毒）病毒的检测所有猪流行性感冒（ H1N1病毒）疑似病例应该采集上呼吸道标本来检测猪流行性感冒（ H1N1病毒）的病毒。
推荐采集的呼吸道标本：疾病发病后应尽快采集如下标本：鼻咽拭子/吸取物或者鼻腔冲洗液/吸取物。
如果不能收集这些标本，可合并鼻拭子与口咽拭子。
气管插管的病人也应收集气管吸取物。
标本应置于无菌病毒运输液（ VTM ），并立即用冰块或冰排保存或置于4 ℃（冰箱），并马上运送至实验室。
临床样品收集人员及实验室人员的感染控制指导请见相关文件。
拭子理想的情况下，标本应使用头部为合成纤维的拭子（例如，聚酯纤维），用铝或塑料做杆。
不推荐棉拭子和木杆。
不能用海藻酸钙做的拭子收集标本。
标本采集管应包含3毫升病毒运输液（例如，含有蛋白质稳定剂，阻止细菌和真菌生长的抗生素，缓冲液）。
临床标本储存所有呼吸道标本应保存在4℃，并尽快放置在-70℃。
如果没有-70℃度冰箱，标本应保存在4℃，但不应超过4天。
临床标本运输临床标本应按照A类包装要求运送，并用干冰运输。
所有标本应标示清楚。
疑似病例标本运送应包含的信息请参照禽流感标本运输。
检测程序呼吸道标本应首先应用real time RT-PCR方法检测A型流感病毒的M基因、Swine （ H1N1）的HA基因和NP基因，以及质控对照RNP基因。
同时，接种MDCK细胞或SPF鸡胚进行病毒分离，并测定病毒的全基因组序列。
推荐的检测方法用Real-time RT-PCR方法检测猪流行性感冒（ H1N1病毒）病毒。
其他检测方法快速流感抗原检测一些商用快速检测可以区分A和B型流感病毒。
快速检测实验A型流感阳性的病例符合可能病例的标准（见上文）。
这些实验对检测人感染猪流行性感冒（ H1N1病毒）病毒临床标本的敏感性和特异性未知，而且检测季节性流感病毒的灵敏度不佳。
因此，快速检测阴性结果可能是假阴性，不能作为猪流感感染的最后诊断。
H3N2亚型猪流感病毒HA基因序列测定及抗原性分析
作者 简 介 ： 大飞 （９ １ ． ， 东 莱 阳人 ， 士研 究 生 ． 从 事 流 感 病毒 分子 生 物 学及 分子 疫 苗 的研 究 。 ＊通讯 作 者 刘 １８ 一） 男 山 硕 主要
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Ｃｏ ｔ ｕ ｔｏ ｆ ａ Ｂｉ ｉｔ ｏ ｃ Ｅｘ ｅ ｓ ｏ ｃ ｏ ｎ ａ ｎｉ ｈ ｒ ｔ ｕ ｔ ｒ ｌ ｎｓｒ ｃ ｉ ｎ Ｏ ｃ ｓ ｒ ｎｉ ｐｒ ｓ ｉ ｎ Ｖｅ ｔ ｒ Ｃｏ ｔ ｉ ｎｇ ｔ ｅ ５ Ｎｏ ｓ ｒ ｃ ｕ ａ Ｒｅ ｉ ｎ Ｇｅ ｅ ａ ｄ Ｓｔ ｕ ｔ ｒ ｌＰｒ ｔ ｉ １ Ｇｅ ｅ Ｏ ｇ ｏ ｎ ｎ ｒ ｃ ｕ ａ ｏ ｅ ｎ Ｐ ｎ ｆ ＦＭ ＤＶ ｆＡｓａ １ Ｏ ｉ
有较 高的 同源性 （ 为 ９ ． ） 交叉血凝 抑制 试验 显示 ， ３株 与其他 ３毒株 抗 原性 差异 明显 。鉴 于猪在 流 均 ９４ 。 Ｓ
感病毒传播 与复 制 间的特殊 地位 ， 密切监 测猪 流感 。 应 关键词 ： 猪流 感病毒 ； ＨＡ 基 因 ； 隆 ； 原性 分析 克 抗
ＨＡＮ ａ －ｏ ｇ ， Ｉ ｊ～ ｉ ｇ ， Ｘｉｏ ｒ ｎ Ｌ Ｕ ｉｘｎ 。 ＹＡＮＧ ｎ ， ＵＮ －ｏ ｇ ， ｉｎ ｑａ ｇ ， Ｂｉ。 Ｓ Ｙｕ ｌｎ 。 ＬＩ ａ － ｉｎ Ｊ
ＬＡＮ 。， Ｎ ａ — ｉ ｇ Ｘｉ ＹＩ Ｘｉ ｎｇ ｐ ｎ 。，ＬＩＢａ — ｕ ｏ ｙ 。，ＬＩＸｕ － ｕｉ ， ｅ ｒ 。 ＨＵ ｎｇ ｈａ Ｙｏ — ｏ
维普资讯
动物 医学进展 。０ ８ ２ （ ） ５９ ２ ０ ， ９ ３ ：—
Ｐｒ ｇｒ ｓ ｎ Ｖｅ ｅ ｉ ａ ｙ Ｍ ｅ ｃｎ ｏ ｅ ｓ ｉ ｔ ｒｎ ｒ ｄｉｉ ｅ
Ｈ３ Ｎ２亚 型 猪 流 感 病 毒 ＨＡ 基 因序 列测 定 及 抗原 性分 析
猪流感的症状 猪流感的诊断与防控措施 - 养猪技术
猪流感的症状猪流感的诊断与防控措施-养猪技术猪流感是一种由猪流感病毒引起的急性呼吸系统传染病,具有很高的发病率,但致死率较低。
其特征为突发，咳嗽，呼吸困难，发热及迅速转归。
猪流感是猪体内因病毒引起的呼吸系统疾病。
猪流感由甲型流感病毒(A型流感病毒)引发，通常爆发于猪之间，传染性很高但通常不会引发死亡。
一般多在冬春季节以及气候骤变时发生，该病也常继发猪副嗜血杆菌病。
下面具体来了解一下：猪流感的症状猪流感的诊断与防控措施。
1、流行特点猪流感主要是导致病猪呼吸系统出现病症的一种急性传染病。
该病的发生呈明显的季节性，通常在季节交替、忽热忽冷、温度骤变时候容易发生。
猪场只要ILIJ现发病，就会快速呈现流行，且任何年龄、品种、性别的猪都能够感染。
该病发生后能够以非常快的速度传播，往往具有2～7天的潜伏期，主要传染源是病猪以及带毒猪。
凶此，有时该病不容易被发现，也无法及时被有效控制，从而导致大规模传染。
该病主要通过接触传播和呼吸道传播。
病猪和带毒猪的鼻液以及呼吸系统（如气管、肺脏等）内都含有流感病毒，且通过其污染的饮食器具、飞沫以及呼吸系统分泌物不断传播。
尤其在环境卫生较差、饲养密度过大、通风不良的猪舍中，该病毒更容易蔓延、扩散。
只要猪的呼吸系统感染流感病毒，就会导致呼吸道以及支气管、气管发生病变，从而使其表现出流感的相应症状。
2、临床症状猪突然出现发病，基本上全群同时发生。
发病初期，病猪体温急剧升高，一般可达到40～42℃，精神极度沉郁，食欲不振或者完全废绝，呼吸加快，伴有阵发性痉孪性咳嗽，眼、鼻有黏液性分泌物流出。
由于关节、肌肉疼痛，往往躺卧在地，拒绝站立或者走动，或者钻卧在垫草中，呈现跛行，在对其进行捕捉时往往会发ILIJ惨叫。
病程持续时间较短，如果没有ILIJ现并发症，大部分病猪会在6～7天后恢复；如果继发出现支气管肺炎、支气管炎，会促使症状加重，甚至造成死亡。
3、诊断初步诊断。
根据流行病学以及病猪的临床症状，即主要在气候骤变时大量出现发病，尤其是夏季来临温度突然急剧升高超过35℃，且持续3～5天高温时，能够呈地方流行性，据此作出初步诊断。
猪流感病毒(H1亚型)ELISA抗体检测试剂盒
等特点， 适合基层实验室技术人员使用； 可用于检测猪流
感病毒 （ Ｈ１ 亚型 ） 的抗体 ， 有利于猪 场对该病 的控 制 ； 试剂 盒重复性好 ， 批 间变异系数小 ， 特异性 良好 ， 敏感性高 。
四、 检 测 原 理
一
流感病毒亚型分 类的关键是 Ｈ Ａ基 因， 以猪流感病毒 猪 流感病 毒 （ ｓ Ｉ Ⅵ 属正 粘病 毒 科成 员 ， 可 引起 猪 流感 （ ＨＡ） 基 因的原核 表达产物 作为 包被抗原 ， 可以特 异性检 （ ｓ Ｉ ） 。ｓ Ｉ 是一种 以突然发病 、 咳嗽 、 呼吸 困难 、 发热和 衰竭 ， 测猪血清中的流感病毒 Ｈ１ 亚型的抗体水平。 五、 试 剂 盒 质 量 的 相 关 试验 以及随 后的迅速恢 复或死 亡 为特征 的急性感 染的呼 吸系 １ ． 特异性试验 统疾病。各品种 、 性 别和年龄 的猪 均能感染 ， 发病率高。猪 群 暴发流感时 ， 发病率可高达 １ ０ ０ ％。近年来 中国 的养猪业 使用试剂盒检测猪繁殖与呼吸 综合征 、猪伪狂犬病 、 由过去的家庭式 饲养模 式逐步向规模化 发展 ， 但由于饲养 猪萎缩 性鼻炎 、 猪胸膜肺 炎 、 副猪嗜血 杆菌 、 猪 口蹄疫 、 猪 规模大 、 饲养 密度 高 、 应 激 因素多 ， 加上 中国独特 的生态 、 瘟、 猪 弓形 虫、 猪水疱性 口炎 、 猪衣原 体 、 猪流感病毒 Ｈ３亚 地理 、 气候 条件和人们的生活 习惯 ， 使得候鸟 、 水禽 、 猪、 人 型、 猪流感病 毒 Ｈ９亚型 、 猪流感病 毒 Ｈ１ 亚型 １ ３种病原 频繁接触并交叉循环感染 ， 极 易引起 ｓ Ｉ 等群发性疾病的反 的阳性 参考血 清 ，结果显 示非猪 流感 病毒 Ｈ１亚型 血清 复流行。因此 ， 了解 ｓ Ｉ 在中国流行情况及开展 Ｓ Ｉ Ｖ流行病 ＯＤ６ ３ ０ ｎ ｍ 值均低于阳性判定标准 ， 判为阴性 ， 而猪流感病 学的研 究 ， 不 仅可 促进中 国畜牧业 的健康稳 定发展 ， 满足 毒 Ｈ１ 亚型阳性参考血清则为阳性（ 见表 １ ） ； 试剂盒对来 自 疫病防制的需要 ， 也将为流感 的预测预报及 防制对 策的制 未 免 疫 猪 流 感 病 毒 Ｈ１亚 型 疫 苗 的 猪 血 清 ３ ０份 进 行 定提供 根本 立足 点和理论 依据。因此 ， 快速 、 特 异、 敏感、 便于操作 的诊 断和检测方 法的使用 ， 阳 性 猪繁殖 猪 伪狂 猪萎缩 猪胸膜 副猪嗜 猪口蹄 猪瘟 猪 形 猪水疱 猪在原 猪流感 猪流癣 猪流感 口性 对 阴 性 犬 瘸 性鼻炎 肺炎 ｍ杆菌 疫 虫 性口擞 摘 毒 桶 毒 病 毒 照 对照 将为有 效预 防和 控制猪 流 感的 发生提 供有 力 ｍ清 与砰 综 合 征 Ｈ ３ Ⅱ ｍ Ⅱ Ｈ １ Ⅱ 型 型 型 的手段和重要的工具。
猪禽流感(AIV)说明书
猪禽流感禽流感（（AIV ）酶联免疫酶联免疫分析分析分析试剂试剂盒使用说明书盒使用说明书盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。
检测范围检测范围：： 96T1.8ng/L -65 ng/L使用目的使用目的：：本试剂盒用于测定猪血清、血浆及相关液体样本中禽流感（AIV ）含量。
实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中猪禽流感（AIV ）水平。
用纯化的猪禽流感（AIV ）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入禽流感（AIV ），再与HRP 标记的禽流感（AIV ）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB 显色。
TMB 在HRP 酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的禽流感（AIV ）呈正相关。
用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），通过标准曲线计算样品中猪禽流感（AIV ）浓度。
试剂盒组成 1 30倍浓缩洗涤液 20ml ×1瓶 7 终止液6ml ×1瓶 2 酶标试剂 6ml ×1瓶 8 标准品（120 ng/L ） 0.5ml ×1瓶 3 酶标包被板 12孔×8条 9 标准品稀释液 1.5ml ×1瓶 4 样品稀释液 6ml ×1瓶 10 说明书 1份 5 显色剂A 液 6ml ×1瓶 11 封板膜 2张 6显色剂B 液6ml ×1/瓶12密封袋1个标本标本要求要求1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。
若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP ）活性。
操作步骤1. 标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
60 ng/L 5号标准品 150µl 的原倍标准品加入150µl 标准品稀释液 30 ng/L 4号标准品 150µl 的5号标准品加入150µl 标准品稀释液 15 ng/L 3号标准品 150µl 的4号标准品加入150µl 标准品稀释液 7.5ng/L 2号标准品 150µl 的3号标准品加入150µl 标准品稀释液 3.75 ng/L1号标准品150µl 的2号标准品加入150µl 标准品稀释液2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。
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猪流感病毒检测试纸条使用说明书
【原理】
猪流感是由正粘病毒科A型流感病毒属的特定病毒引起的。
A型猪流感病毒可根据其血凝素和神经氨酸酶蛋白再进一步细分为H1N1,H1N2和H3N2等。
猪流感病毒（SIV）抗原快速检测卡采用了快速免疫层析检测技术，用于检测猪鼻腔拭子中的猪流感病毒抗原。
本检测卡对A型猪流感病毒的所有亚型都有极高的敏感性。
把待检样本加入到加样孔后，与胶体金标记的抗SIV单克隆抗体一起沿层析膜移动。
若样品中存在SIV抗原时，与检测线上的抗体结合而显示酒红色。
如果样品中不存在SIV抗原时，则不产生颜色反应。
【试剂组成】
1. 猪流感病毒快速检测卡50片/盒
2. 样本稀释液50管/盒
3．棉签50支/盒4．一次性手套5支
【操作方法】
操作流程
1）应采集急性、体温高的及未经处理的病猪鼻拭子。
棉签应插入鼻腔，并在内壁上反复旋转擦拭。
2）立即将棉签插入装有样品缓冲液的试管，将棉签在试管壁上反复用力旋转至少10次，并混匀溶液，使标本尽可能溶解在溶液中。
在液面上方的试管壁上挤压棉签，使液体尽可能被挤出，丢弃棉签。
3）从密封袋中取出检测卡。
将检测卡放置在平整表面，用吸管从试管内吸取上层清亮液体，缓慢、逐滴的准确滴加4滴到有“S”标记的加样孔内。
4）在室温下放置10-15分钟判断结果，超过15分钟结果无效。
【结果判定】
1. 阳性：在观察孔内，若对照线C显色，检测线T同时显色，判为阳性。
2. 阴性：在观察孔内，若对照线C显色，而检测线T不显色，判为阴性。
3. 无效：在观察孔内，若对照线不显色，则结果无效，建议重新测试。
【检测方法的局限性】
1. 检测线红色线条的颜色深浅直接与检测病毒多少相关。
当检测病毒含量很高时，检测线可能在出现后，红色又慢慢变淡，此时建议将样品数倍稀释后再进行检测，红色线条就可以稳定了。
2. 当检测线出现模糊的色迹，但不显示为清楚的线形时，判为阴性。
3. 本试剂是定性筛选试剂，一个明确的临床诊断结果应该由医生在考虑到所有的临床和实验室的现象后作出。
【注意事项】
1. 本品如果购买时发现过期、破损、污染、无效的产品，请在购买处进行更换。
2. 测试样品来自动物，可能有潜在感染性，样品和使用过的试剂应被看作微生物危险品处理。
3. 所有检测卡启封后马上使用，此前不要随意打开。
4. 本品为一次性产品，请勿二次使用；请勿使用非本品随附的稀释液。
【储存及有效期】
1. 保存于干燥阴凉处（2~30℃），有效期为12个月，生产日期见外包装盒。
2. 打开包装后，1小时内使用。