丁香水溶性化学成分的研究_刘洪宇
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[ 3] 张维库 , 杨国 恩 , 叶文 才 , 等 .对叶 大戟 化学 成分 的研 究 .中国中药杂志 , 2006, 31(20):1694-1696.
[ 4] 尚小雅 , 李帅 , 石建功 , 等 .红绒毛羊蹄甲的化学成分研 究 .中国中药杂志 , 2006, 31(23):1953-1955.
没食子酸
65.276 ±3.377
没食子酸乙酯 10.325 ±0.491
1.867 ±0.237 13.896 ±1.180 0.326 ±0.037 33.968 ±2.997
原儿茶酸
百度文库
61.613 ±3.214 0.276 ±0.025 6.674 ±0.609
结果表明这两类成分对这三种活性氧自由基均 具有良好的清除作用 , 但基于结构的不同 , 活性强弱
作者简介 :刘洪宇 , Tel:010-63703355-435, E-mail:liuhynn@hotmail.com。
JournalofChineseMedicinalMaterials 第 31卷第 7期 2008年 7月
· 999·
evidences.Results:Fivecompoundswereseparatedfromthewaterextracts.Theirstructureswereidentifiedasquercetin-3-O-glucuronide (1), quercetin-3-O-glucuronide6″-methylester(2), quercetin-3-O-glucopy-ranoside(3), eugenyl-β -rutinoside(4)andmyricetin(5). Conclusion:Compounds1 ～ 4 areisolatedfromthegenusforthefirsttime.
关键词 丁香 ;水提物 ;化学 成分 中图分类号 :R284.1/R284.2 文献标识码 :A 文章编号 :1001-4454(2008)07-0998-03
StudyonAqueousChemicalConstituentsfrom theFlowerBudsofEugeniacaryophylla
摘要 目的 :研究丁香水溶性化学成分 。 方法 :利用 HP-20大 孔吸附 树脂 、反相硅 胶柱色 谱 、反 相制备 薄层色 谱 、制备型反相高效液相色谱进行分离 , NMR和 MS等方 法进行结构鉴定 。 结果 :从丁香干燥 花蕾的水 提物中分离 鉴定了 5个化合物 , 分别为槲皮素 -3-O-葡萄糖醛酸苷 (1), 槲皮素 -3-O-葡萄糖醛 酸苷 6″-甲酯 (2), 槲 皮素 -3-O-葡萄 糖苷 (3), 丁香酚 -β-芸香糖 苷 (4), 杨梅酮 (5)。 结论 :化合物 1～ 4为首次从丁香属植物中分离得到 。
存在一定的差异 。 此外针对不同的自由基 , 各成分 表现出来的活性强弱也有所不同 , 例如 , 表 1中不同 酚性成分清除超氧阴离子 O2 -· 的 IC50 值显示槲皮 素清除超氧阴离子的作用最强 , 而没食子酸和原儿 茶酸相对较弱 。 清除 H2 O2 能力则是槲皮苷和山柰 酚较强 。但这些化合物共同特点是均具有邻二酚羟 基结构 。这与以往文献认为邻二酚羟基结构是影响
Keywords Eugeniacaryophylla;Aqueousextract;Chemicalcomstituents
丁香为桃金娘科 植物丁香 Eugeniacaryophylla 的干燥花蕾 , 主产于坦桑尼亚 、马来西亚 、斯里兰卡 、 印度尼西亚 , 我国海南 、广东 、广西 、云南等省有栽 培 ;具温中降 逆 、补肾 助阳之功效 〔1〕 。 丁香中含有 大量的挥发油类成分 〔2〕 , 具有抗菌 〔3〕 、脂质过氧化 作用抑制 、过氧化物歧化 酶抑制 〔4〕等活 性 , 但罕有 关于丁香水溶性化学成分研究的报道 。丁香作为一 种药食两用的传统中药 , 其水煎液亦具有健胃 、促胆 汁分泌 、抑 制 腹 泻 、镇 痛 、抗 凝 血 等 多 种 药 理 活 性 〔1〕 。作为一种既是食品又是药品的物品 , 丁香已 被收载于我国保健食品原料名单 , 迄今为止 , 我国已 经批准以丁香为原料的保健食品 40 个 。 为了对丁 香水溶性化学成分有进一步的了解 , 我们以购自枥 本天海堂公司 (日本 )的丁香药材为原料 , 对其水提 物化学成分进行了研究 , 分离鉴定了 5个化学成分 : 槲皮素 -3-O-葡萄糖醛酸苷 (1), 槲皮素 -3-O-葡萄糖 醛酸苷 6″-甲酯 (2), 槲皮素 -3-O-葡萄糖苷 (3), 丁香 酚 -β -芸香糖苷 (4), 杨梅酮 (5), 其中化 合物 1 ～ 4 为首次从该属植物中分离得到 。 1 仪器与材料
[ 5] 黄新安 , 蔡佳仲 , 胡英杰 , 等 .星宿菜化学 成分的研 究 . 中国中药杂志 , 2007, 32(7):596-599.
[ 6] 韩伟立 , 刘利 , 叶文才 , 等 .鲁桑 叶化学成分研究 .中国 中药杂志 , 2007, 32(8):695-698.
[ 7] 李勇军 , 骆宏丰 , 王永林 .头花 蓼黄酮类 化学成 分的研 究 .中国药学杂志 , 2000, 35(5):107-109.
[ 8] 李石生 , 邓京振 , 赵守训 .苦楝 中化学成 分的研 究 .中 草药 , 2000, 31(2):86-89.
[ 9] 李燕 , 王春兰 , 肖培根 , 等 .新疆雪莲黄酮类化学成分的 研究 .中国药学杂志 , 2007, 42(8):575-577.
(2007 -12 -03收稿 )
DO I :10.13863/j .issn1001 -4454.2008.07.022
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JournalofChineseMedicinalMaterials 第 31卷第 7期 2008年 7月
以建立量效关系曲线 , 通过量效曲线可求算出发光
抑制率为 50%时样品的浓度 (IC50 )值 。 一般用浓度 IC50来衡量样品对自由基的清除能力 。 IC50值越小 ,
化合 物 1:黄 色 粉 末 。 FAB-MSm/z:477 [ MH] -。1 H-NMR(CD3 OD, 400MHz)δ:7.58(1H, s, 2′H), 7.57 (1H, s, coveredwithδ7.58, 6′-H), 6.79 (1H, d, J=9.04Hz, 5′-H), 6.30(1H, d, J=1.48Hz, 8-H), 6.11(1H, d, J=1.48Hz, 6-H), 5.28(1H, d, J =7.56Hz, 1″-H), 3.73(1H, d, J=9.52Hz, 5″-H), 3.42-3.57(3H, m, 2″, 3″, 4″-H);13 C-NMR(CD3OD, 100MHz)δ:159.0(C2), 135.4 (C3), 179.1(C4), 162.9 (C5), 99.9 (C6), 165.0 (C7), 94.8 (C8), 158.3 (C9 ), 105.6 (C10 ), 122.8 (C1′), 117.2 (C2′), 145.9 (C3′), 149.8 (C4′), 116.0 (C5′), 123.5(C6′), 104.2(C1″), 75.4(C2″), 77.6(C3″), 72.8(C4″), 77.0(C5″), 172.1(C6″)。 其理 化常数 和光谱学数据与文献 〔5〕报道的一致 , 故鉴定为槲皮 素 -3-O-葡萄糖醛酸苷 (quercetin-3-O-glucuronide)。
表明样品清除自由基的能力越强 。
表 1 各化合物清除三种自由基的 IC50值 (n=3)
化合物
O2 -·
H2O2
· OH
槲皮素
1.439 ±0.092 0.098 ±0.011 4.766 ±0.672
山柰酚 槲皮苷
1.156 ±0.071 19.150 ±0.691
0.029 ±0.003 66.062 ±2.120 0.044 ±0.007 7.507 ±0.538
丁香药材购自枥本天海堂公司 (日本大阪 ), 经 日本富山大学和汉药总和研究所小松 かつ子教授鉴 定为桃金娘科丁 香属植物 丁香 E.caryophylla的干 燥花蕾 。标本保存于日本富山大学和汉药总和研究 所标本馆 。 2 提取与分离
丁香粗粉 300 g用 8倍 量的水回流提取 3次 , 每次 2 h;合并 提取液 , 在 60℃减压浓 缩后冷冻干 燥 , 得提取物冻干粉 62 g(收率为 20.67%)。将冻 干粉用适量水溶解后用 HP-20大孔吸附树脂色谱 ,
酚类化合物抗氧化活性的重要因素的结论相一致 。
参 考文 献
[ 1] 国家中医药管理局 中华 本草 编委会 .中 华本草 .第 1 版 .上海 :上海科学技术出版社 , 1999:2646-2647.
[ 2] 陈荣 , 梁敬钰 , 刘睿 , 等 .青橄榄 叶的化学成分研究 .林 产化学与工业 , 2007, 27(2):45-48.
JEOLJNA-LA 400WB-FT型核 磁 共 振 色 谱仪 (TMS为内标 );JEOLJMS-AX505 HAD型 FAB-MS 质谱仪 ;Jasco制备高 效液相色谱仪 , JascoPU-1587 型制备泵 , JascoUV-1575型检测器 , Jasco807-IT型 积分仪 ;YMC-Pack型 DOS制备柱 (250 ×20 mm, 5 μm);HP-20 大 孔 吸 附树 脂 购 自 三 菱 化 学 制 品 公 司 (日本 );C18反相硅胶购自 WakoPureChem.Inc.(日 本 );反相硅胶制备薄层板购自 Merk公司 (德国 ); 其它所有化学试剂均购自 KantoChem.Co.Ltd.(日 本 )。
Abstract Objective:TostudytheaqueouschemicalconstituentsoftheflowerbudsofEugeniacaryophylla.Methods:ThecompoundswereisolatedbyHP-20 resincolumnchromatography, RP-C18 columnchromatography, preparativeRP-C18 thin-layerchromatography, preparative RP-C18 high performance liquid chromatography, and their structures were established by NMR and MS
依次以水 、20%、40%、60%甲醇洗脱 , 收集得 4个馏 分 Fr.1(29.8 g)、Fr.2(10.0 g)、Fr.3(8.9 g)、Fr.4 (7.9 g)。其中 Fr.3经 C18反相硅胶柱色谱分离 , 以 水 -甲醇 (5 ∶1 ※1 ∶1)梯度洗 脱 后 , 得到 6 个馏 分 Fr.A(300 mg)、 Fr.B(1975 mg)、 Fr.C(490 mg)、 Fr.D(395 mg)、 Fr.E(325 mg)、 Fr.F(150 mg)。 Fr.B经 C18反相硅胶柱色谱分离 , 以水 -甲醇 (3∶1※ 1∶1)梯度洗脱 , 再经反相制备薄层色谱分离后 , 得 化合物 1(100 mg)、化合物 2(30 mg)、化合物 3(4 mg)。 Fr.C经反相制备薄层色谱分离 , 以甲醇 -水 (3 ∶2)为展开剂 , 得化合物 5(5 mg)。 Fr.D经制备型 反相高效液相色谱分离 。 以 40%甲醇溶液为流动 相 , 得化合物 4(8 mg)和化合物 5(2 mg)。 3 结构鉴定
LIUHong-yu1, ZHUShu3 , KOMATSUKatsuko3 , CAIShao-qing2 , LIYa-hui1, YUChao1 , JIANGYu1, SAYi1 (1.CenterforHealthFoodEvaluation, StateFoodandDrugAdministration, Beijing100070, China; 2.DivisionofPharmacognosy, SchoolofPharmaceuticalSciences, PekingUniversity, Beijing100083, China; 3.DivisionofPharmacognosy, InstituteofNaturalMedicine, UniversityofToyama, Sugitani930-0194, Japan)
丁香水溶性化学成分的研究
刘洪宇 1, 2 , 朱 姝 3 , 小松 かつ子 3 , 蔡少青2 , 李雅慧 1 , 余 超 1 , 姜 雨1 , 萨 翼 1 (1.国家药品食品监督管理局保健食品审评中心 , 北京 100070;2.北京大学医学部药学院生药学研究室 , 北京 100083;3.富山大学和汉医药学总和研究所生药资源科学分野 , 日本 930-0194)
[ 4] 尚小雅 , 李帅 , 石建功 , 等 .红绒毛羊蹄甲的化学成分研 究 .中国中药杂志 , 2006, 31(23):1953-1955.
没食子酸
65.276 ±3.377
没食子酸乙酯 10.325 ±0.491
1.867 ±0.237 13.896 ±1.180 0.326 ±0.037 33.968 ±2.997
原儿茶酸
百度文库
61.613 ±3.214 0.276 ±0.025 6.674 ±0.609
结果表明这两类成分对这三种活性氧自由基均 具有良好的清除作用 , 但基于结构的不同 , 活性强弱
作者简介 :刘洪宇 , Tel:010-63703355-435, E-mail:liuhynn@hotmail.com。
JournalofChineseMedicinalMaterials 第 31卷第 7期 2008年 7月
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evidences.Results:Fivecompoundswereseparatedfromthewaterextracts.Theirstructureswereidentifiedasquercetin-3-O-glucuronide (1), quercetin-3-O-glucuronide6″-methylester(2), quercetin-3-O-glucopy-ranoside(3), eugenyl-β -rutinoside(4)andmyricetin(5). Conclusion:Compounds1 ～ 4 areisolatedfromthegenusforthefirsttime.
关键词 丁香 ;水提物 ;化学 成分 中图分类号 :R284.1/R284.2 文献标识码 :A 文章编号 :1001-4454(2008)07-0998-03
StudyonAqueousChemicalConstituentsfrom theFlowerBudsofEugeniacaryophylla
摘要 目的 :研究丁香水溶性化学成分 。 方法 :利用 HP-20大 孔吸附 树脂 、反相硅 胶柱色 谱 、反 相制备 薄层色 谱 、制备型反相高效液相色谱进行分离 , NMR和 MS等方 法进行结构鉴定 。 结果 :从丁香干燥 花蕾的水 提物中分离 鉴定了 5个化合物 , 分别为槲皮素 -3-O-葡萄糖醛酸苷 (1), 槲皮素 -3-O-葡萄糖醛 酸苷 6″-甲酯 (2), 槲 皮素 -3-O-葡萄 糖苷 (3), 丁香酚 -β-芸香糖 苷 (4), 杨梅酮 (5)。 结论 :化合物 1～ 4为首次从丁香属植物中分离得到 。
存在一定的差异 。 此外针对不同的自由基 , 各成分 表现出来的活性强弱也有所不同 , 例如 , 表 1中不同 酚性成分清除超氧阴离子 O2 -· 的 IC50 值显示槲皮 素清除超氧阴离子的作用最强 , 而没食子酸和原儿 茶酸相对较弱 。 清除 H2 O2 能力则是槲皮苷和山柰 酚较强 。但这些化合物共同特点是均具有邻二酚羟 基结构 。这与以往文献认为邻二酚羟基结构是影响
Keywords Eugeniacaryophylla;Aqueousextract;Chemicalcomstituents
丁香为桃金娘科 植物丁香 Eugeniacaryophylla 的干燥花蕾 , 主产于坦桑尼亚 、马来西亚 、斯里兰卡 、 印度尼西亚 , 我国海南 、广东 、广西 、云南等省有栽 培 ;具温中降 逆 、补肾 助阳之功效 〔1〕 。 丁香中含有 大量的挥发油类成分 〔2〕 , 具有抗菌 〔3〕 、脂质过氧化 作用抑制 、过氧化物歧化 酶抑制 〔4〕等活 性 , 但罕有 关于丁香水溶性化学成分研究的报道 。丁香作为一 种药食两用的传统中药 , 其水煎液亦具有健胃 、促胆 汁分泌 、抑 制 腹 泻 、镇 痛 、抗 凝 血 等 多 种 药 理 活 性 〔1〕 。作为一种既是食品又是药品的物品 , 丁香已 被收载于我国保健食品原料名单 , 迄今为止 , 我国已 经批准以丁香为原料的保健食品 40 个 。 为了对丁 香水溶性化学成分有进一步的了解 , 我们以购自枥 本天海堂公司 (日本 )的丁香药材为原料 , 对其水提 物化学成分进行了研究 , 分离鉴定了 5个化学成分 : 槲皮素 -3-O-葡萄糖醛酸苷 (1), 槲皮素 -3-O-葡萄糖 醛酸苷 6″-甲酯 (2), 槲皮素 -3-O-葡萄糖苷 (3), 丁香 酚 -β -芸香糖苷 (4), 杨梅酮 (5), 其中化 合物 1 ～ 4 为首次从该属植物中分离得到 。 1 仪器与材料
[ 5] 黄新安 , 蔡佳仲 , 胡英杰 , 等 .星宿菜化学 成分的研 究 . 中国中药杂志 , 2007, 32(7):596-599.
[ 6] 韩伟立 , 刘利 , 叶文才 , 等 .鲁桑 叶化学成分研究 .中国 中药杂志 , 2007, 32(8):695-698.
[ 7] 李勇军 , 骆宏丰 , 王永林 .头花 蓼黄酮类 化学成 分的研 究 .中国药学杂志 , 2000, 35(5):107-109.
[ 8] 李石生 , 邓京振 , 赵守训 .苦楝 中化学成 分的研 究 .中 草药 , 2000, 31(2):86-89.
[ 9] 李燕 , 王春兰 , 肖培根 , 等 .新疆雪莲黄酮类化学成分的 研究 .中国药学杂志 , 2007, 42(8):575-577.
(2007 -12 -03收稿 )
DO I :10.13863/j .issn1001 -4454.2008.07.022
· 998·
JournalofChineseMedicinalMaterials 第 31卷第 7期 2008年 7月
以建立量效关系曲线 , 通过量效曲线可求算出发光
抑制率为 50%时样品的浓度 (IC50 )值 。 一般用浓度 IC50来衡量样品对自由基的清除能力 。 IC50值越小 ,
化合 物 1:黄 色 粉 末 。 FAB-MSm/z:477 [ MH] -。1 H-NMR(CD3 OD, 400MHz)δ:7.58(1H, s, 2′H), 7.57 (1H, s, coveredwithδ7.58, 6′-H), 6.79 (1H, d, J=9.04Hz, 5′-H), 6.30(1H, d, J=1.48Hz, 8-H), 6.11(1H, d, J=1.48Hz, 6-H), 5.28(1H, d, J =7.56Hz, 1″-H), 3.73(1H, d, J=9.52Hz, 5″-H), 3.42-3.57(3H, m, 2″, 3″, 4″-H);13 C-NMR(CD3OD, 100MHz)δ:159.0(C2), 135.4 (C3), 179.1(C4), 162.9 (C5), 99.9 (C6), 165.0 (C7), 94.8 (C8), 158.3 (C9 ), 105.6 (C10 ), 122.8 (C1′), 117.2 (C2′), 145.9 (C3′), 149.8 (C4′), 116.0 (C5′), 123.5(C6′), 104.2(C1″), 75.4(C2″), 77.6(C3″), 72.8(C4″), 77.0(C5″), 172.1(C6″)。 其理 化常数 和光谱学数据与文献 〔5〕报道的一致 , 故鉴定为槲皮 素 -3-O-葡萄糖醛酸苷 (quercetin-3-O-glucuronide)。
表明样品清除自由基的能力越强 。
表 1 各化合物清除三种自由基的 IC50值 (n=3)
化合物
O2 -·
H2O2
· OH
槲皮素
1.439 ±0.092 0.098 ±0.011 4.766 ±0.672
山柰酚 槲皮苷
1.156 ±0.071 19.150 ±0.691
0.029 ±0.003 66.062 ±2.120 0.044 ±0.007 7.507 ±0.538
丁香药材购自枥本天海堂公司 (日本大阪 ), 经 日本富山大学和汉药总和研究所小松 かつ子教授鉴 定为桃金娘科丁 香属植物 丁香 E.caryophylla的干 燥花蕾 。标本保存于日本富山大学和汉药总和研究 所标本馆 。 2 提取与分离
丁香粗粉 300 g用 8倍 量的水回流提取 3次 , 每次 2 h;合并 提取液 , 在 60℃减压浓 缩后冷冻干 燥 , 得提取物冻干粉 62 g(收率为 20.67%)。将冻 干粉用适量水溶解后用 HP-20大孔吸附树脂色谱 ,
酚类化合物抗氧化活性的重要因素的结论相一致 。
参 考文 献
[ 1] 国家中医药管理局 中华 本草 编委会 .中 华本草 .第 1 版 .上海 :上海科学技术出版社 , 1999:2646-2647.
[ 2] 陈荣 , 梁敬钰 , 刘睿 , 等 .青橄榄 叶的化学成分研究 .林 产化学与工业 , 2007, 27(2):45-48.
JEOLJNA-LA 400WB-FT型核 磁 共 振 色 谱仪 (TMS为内标 );JEOLJMS-AX505 HAD型 FAB-MS 质谱仪 ;Jasco制备高 效液相色谱仪 , JascoPU-1587 型制备泵 , JascoUV-1575型检测器 , Jasco807-IT型 积分仪 ;YMC-Pack型 DOS制备柱 (250 ×20 mm, 5 μm);HP-20 大 孔 吸 附树 脂 购 自 三 菱 化 学 制 品 公 司 (日本 );C18反相硅胶购自 WakoPureChem.Inc.(日 本 );反相硅胶制备薄层板购自 Merk公司 (德国 ); 其它所有化学试剂均购自 KantoChem.Co.Ltd.(日 本 )。
Abstract Objective:TostudytheaqueouschemicalconstituentsoftheflowerbudsofEugeniacaryophylla.Methods:ThecompoundswereisolatedbyHP-20 resincolumnchromatography, RP-C18 columnchromatography, preparativeRP-C18 thin-layerchromatography, preparative RP-C18 high performance liquid chromatography, and their structures were established by NMR and MS
依次以水 、20%、40%、60%甲醇洗脱 , 收集得 4个馏 分 Fr.1(29.8 g)、Fr.2(10.0 g)、Fr.3(8.9 g)、Fr.4 (7.9 g)。其中 Fr.3经 C18反相硅胶柱色谱分离 , 以 水 -甲醇 (5 ∶1 ※1 ∶1)梯度洗 脱 后 , 得到 6 个馏 分 Fr.A(300 mg)、 Fr.B(1975 mg)、 Fr.C(490 mg)、 Fr.D(395 mg)、 Fr.E(325 mg)、 Fr.F(150 mg)。 Fr.B经 C18反相硅胶柱色谱分离 , 以水 -甲醇 (3∶1※ 1∶1)梯度洗脱 , 再经反相制备薄层色谱分离后 , 得 化合物 1(100 mg)、化合物 2(30 mg)、化合物 3(4 mg)。 Fr.C经反相制备薄层色谱分离 , 以甲醇 -水 (3 ∶2)为展开剂 , 得化合物 5(5 mg)。 Fr.D经制备型 反相高效液相色谱分离 。 以 40%甲醇溶液为流动 相 , 得化合物 4(8 mg)和化合物 5(2 mg)。 3 结构鉴定
LIUHong-yu1, ZHUShu3 , KOMATSUKatsuko3 , CAIShao-qing2 , LIYa-hui1, YUChao1 , JIANGYu1, SAYi1 (1.CenterforHealthFoodEvaluation, StateFoodandDrugAdministration, Beijing100070, China; 2.DivisionofPharmacognosy, SchoolofPharmaceuticalSciences, PekingUniversity, Beijing100083, China; 3.DivisionofPharmacognosy, InstituteofNaturalMedicine, UniversityofToyama, Sugitani930-0194, Japan)
丁香水溶性化学成分的研究
刘洪宇 1, 2 , 朱 姝 3 , 小松 かつ子 3 , 蔡少青2 , 李雅慧 1 , 余 超 1 , 姜 雨1 , 萨 翼 1 (1.国家药品食品监督管理局保健食品审评中心 , 北京 100070;2.北京大学医学部药学院生药学研究室 , 北京 100083;3.富山大学和汉医药学总和研究所生药资源科学分野 , 日本 930-0194)