免疫细胞的分离及其表面标志检测技术

CD2可与绵羊红细胞（SRBC）结合，故又称绵 羊红细胞受体（E受体）。 E花环试验: 测定外周血T细胞总数
外周血淋巴细胞 + SRBC
T淋巴细胞CD2-多个SRBC形成致密花环
计数外周血T细胞总数
（2）CD3：
表达于全部T细胞表面 T细胞表面标志 由γ、δ、ε、ζ和η五种链组成的跨膜多肽
结合方式：跨膜结合（胞外区-跨膜区-胞内区）
锚合：糖基磷脂酰肌醇（GPI） 分布：白细胞、红细胞、巨核细胞/血小板、非
造血细胞
分化抗原分类
根据胞膜外区结构特点，可分为不同家族：
免疫球蛋白超家族（IgSF） 细胞因子受体超家族 C凝集素超家族 整合素家族 肿瘤坏死引子超家族（TNFSF） 肿瘤坏死因子受体超家族（TNFRSF）
Th细胞分类
根据分泌细胞因子不同将其分为： Th0 Th1 Th2 Th3（TGF-β）、Th17（IL-17）等
其他CD抗原也可作为区分Th1和Th2的相对特异标志:
Th1——CD3+CD4+CD30 Th2——CD3+CD4+CD30+
IL-5
辅佐B细胞增殖和 抗体生成，对清 除游离病原体起 重要作用
簇分化抗原 (cluster of differentiation ，CD ）
人类白细胞分化抗原以单克隆抗体鉴定为 主的聚类分析法
将识别同一分化抗原的来自不同实验室的 单克隆抗体归为一个分化群，简称CD （cluster of differentiation)
在许多场合下，抗体及其识别的相应抗原 都用同一个CD序号
（1）CD2：
表达：全部T细胞和NK细胞表面；
CD2-1，2，3 CD2-1，CD2-2表达于静止T细胞表面 CD-2，CD2-3表达于活化T细胞表面
生物学功能：粘附分子，又称LFA2，配体为LAF3 ①增强T细胞与APC或靶细胞之间的粘附，促进T细胞对
抗原的识别
②胞浆区可与多种酪氨酸激酶相连，介导信号传导
辅助T细胞（Th） 细胞毒T细胞（Tc） 调节T细胞（Treg）
NK细胞
形态基本相似，主要依靠 表面标志检测区分不同亚群
细胞表面标志 （cell surface marker）
存在于细胞表面的特异的可供鉴别的膜分子
不同淋巴细胞亚群 淋巴细胞分化的不同阶段 淋巴细胞的不同活化状态 介导与其它细胞、分子之间的相互作用以及
淋巴细胞 主要有T、B、NK细胞等， 在免疫应答中起核心作用
单核-巨噬细胞 包括单核细胞和巨噬细胞， 在免疫应答中起辅佐作用
其他免疫细胞 包括树突状细胞、中性粒细 胞、嗜酸性粒细胞、肥大细胞、血小板等， 参与免疫效应
第一节 淋巴细胞标志及亚群分类
淋巴细胞（lymphocyte）
T 细胞 B细胞
链复合体
通过其跨膜区的带负电的氨基酸与TCRαβ 或TCRγδ跨膜区带正电的氨基酸形成盐桥， 而形成稳定的TCR-CD3复合物
（2）CD3：
生物学功能：
胞浆区含有与免疫细胞活化信号转导有关的免疫受 体酪氨酸活化基序（ITAM）
TCR-CD3复合体： TCR负责识别抗原肽-MHC 分子复合物，CD3分子负责 传递活化信号进入细胞内
CD 抗原
鉴定与检测: 单克隆抗体（ McAb） CD抗原国际统一编号 目前已鉴定的CD分子达300多种，已
弄清130多种CD分子编码基因的核苷 酸序列及其染色体定位 很少通过单一CD抗原区分某一淋巴细 胞亚群
CD分组
T细胞相关CD B细胞相关CD 髓系细胞相关CD NK细胞相关CD 血小板相关CD 激活抗原 粘附分子 内皮细胞 细胞因子受体
CD8分子：细胞毒性T细胞标志
由α、β链借二硫键连接形成的异二聚体， 胞膜外结构属IgSF成员
α链V样区与MHCⅠ类分子非多态α3区域 结合
生物学功能：胞浆区可与p56lek激酶结合 参与信号传导
CD4和CD8分别是MHC-II类或MHC-I类分子
的受体，可加强和稳定T细胞表面TCR与抗原呈 递细胞或其它靶细胞表面非己抗原肽-MHC分子 复合物的结合，并有助于TCR-CD3信号传递。
第十五章
免疫细胞标志和功能检测技术
白杨娟
华西医院实验医学科临床免疫实验室
中枢免疫器官：胸腺、骨髓 免疫器官 外周免疫器官：淋巴结、脾脏等
免
疫
参与免疫应答或与
免疫细胞 免疫应答有关的各
淋巴细胞 单核巨噬细胞
系
种细胞
其他免疫细胞
统
免疫分子
Ig、补体、细胞因子、黏附分 子、神经递质、CD抗原等
参与免疫应答的细胞分为三类：
淋巴细胞生物功能
分化抗原 (differentiation antigen)
有核细胞在发育的不同阶段、不同的 细胞亚群和受不同刺激而活化过程中 出现或消失的细胞表面抗原
是区分淋巴细胞的重要标志
分化抗原 (differentiation ຫໍສະໝຸດ Baiduntigen)
性质：跨膜蛋白或糖蛋白（大多数） 碳水化合物半抗原（少数）
（3）CD4和CD8分子：
T细胞亚群的表面标志，将外周T细胞分为
两种不同亚群
CD4分子：T辅助细胞标志
单链跨膜蛋白，胞膜外结构属IgSF成员， 共4个IgSF结构域
第一、二结构域可与MHCⅡ类分子结合 HIV受体 生物学功能：TCR-CD3识别抗原的辅助受
体，通过与MHCⅡ类分子结合，通过其胞 浆区与p56lek激酶结合参与信号传导
一、T 淋巴细胞表面标志：
分化抗原（CD分子） 丝裂原受体 细胞因子受体
1. 分化抗原
Ｔ细胞表面主要CD抗原及其分布
CD抗原
CD2（ER） CD3 CD4 （HIVR） CD8 CD25（IL-2R） CD28 CTLA-4 CD40L
分布
全部Ｔ细胞和NK细胞 成熟Ｔ细胞 Th细胞、Mφ Tc细胞、部分NK细胞 活化Ｔ细胞 Ｔ细胞 活化Ｔ细胞 活化Ｔ细胞
CD3+CD4+CD8-T细胞 辅助性T细胞（T
helper，Th），主要识别MHCⅡ类分子结合的 外源性多肽抗原，具有辅佐或诱导免疫应答的 功能，部分细胞也有杀伤和抑制功能；
CD3+CD4-CD8+T细胞 细胞毒性T细胞
（cytotoxic T cell, CTL或Tc），主要识别 MHCⅠ类分子结合的内源性多肽抗原，具有杀 伤靶细胞和抑制免疫功能。