(红对勾)2016届高三生物第一轮复习_专题1_基因工程课件_新人教版选修3_PPT幻灯片

五、蛋白质工程 1.流程图：
写出流程图中字母代表的含义： A._转__录__，B._翻__译__，C._分__子__设__计__，D._多__肽__链__，E._预__期__功__能__。 2.结果：改造了现有蛋白质或制造出_新__的__蛋__白__质__。 3.应用：主要集中应用于对_现__有__蛋__白__质__进行改造，改良生物性状。
3.将目的基因导入受体细胞(连线)：
4.目的基因的检测与鉴定：
类型 步 骤
检测内容
方法
分
第一步
转基因生物的DNA上是否 插入了_目__的__基__因__
子 检
第二步
目的基因是否转录出了 _m_R_N_A_
测
目的基因是否翻译成
第三步 _蛋__白__质__
DNA分子杂交技术(DNA 和DNA之间) 分子杂交技术(DNA和 mRNA之间)
(2)根据质粒的特点确定限制酶的种类。 ①所选限制酶要与切割目的基因的限制酶一致，以确保产生相同的黏 性末端。 ②质粒作为载体必须具备标记基因等，所以所选择的限制酶尽量不要 破坏这些结构，如图乙中限制酶SmaⅠ会破坏标记基因；如果所选酶 的切割位点不是一个，则切割重组后可能丢失某些片段，若丢失的片 段含复制起点区，则切割重组后的片段进入受体细胞后不能自主复制。
4.载体： (1)条件与目的：
条件 稳定并能复制
有一个至多个 限制酶切割位点
具有特殊的标记基因
目的 目的基因稳定存在且数量可扩大
可携带多个或多种外源基因 便于重组DNA的鉴定和选择
(2)作用。 ①作为运载工具，将目的基因转移到宿主细胞内。 ②利用它在宿主细胞内对目的基因进行大量复制。
【提Hale Waihona Puke Baidu技法】限制酶的选择技巧
【速记卡片】 1.基因工程的基本工具： (1)两种工具酶：限制酶、DNA连接酶。 (2)一种运输工具：载体。 2.载体的种类和条件： (1)常见三种类型：质粒、λ噬菌体的衍生物、动植物病毒。 (2)四条件：能够自我复制、有多个限制酶切割位点、具有标记基因、 对受体细胞无伤害。
3.基因工程的基本操作程序的四个主要步骤： 目的基因的获取→基因表达载体的构建→将目的基因导入受体细胞→ 目的基因的检测与鉴定。 4.目的基因的获取与检测： (1)三种获取方法：基因文库直接获得、PCR扩增、人工合成。 (2)四种检测方法：DNA分子杂交、DNA-mRNA分子杂交、抗原-抗体杂 交、个体生物学水平的抗性检测。
(1)根据目的基因两端的限制酶切割位点确定限制酶的种类。 ①应选择切割位点位于目的基因两端的限制酶，如图甲可选择PstⅠ。 ②不能选择切割位点位于目的基因内部的限制酶，如图甲不能选择 SmaⅠ。 ③为避免目的基因和质粒的自身环化和随意连接，也可使用不同的限 制酶切割目的基因和质粒，如图甲也可选择用PstⅠ和EcoRⅠ两种限 制酶(但要确保质粒上也有这两种酶的切割位点)。
2.DNA连接酶：
(1)类型：根据酶的来源不同，可分为E·coliDNA连接酶和 _T_4_D_N_A_连__接__酶_。
(2)作用：连接双链DNA片段，恢复被限制酶切开的两个核苷 酸之间的_磷__酸__二__酯__键__。
2.基因表达载体的构建——基因工程的核心： (1)目的。 ①使目的基因在_受__体__细__胞__中稳定存在，并且可以遗传给下一代。 ②使目的基因能够_表__达__和发挥作用。 (2)组成：_启__动__子__+目的基因+_终__止__子__+标记基因(如抗生素抗性基因)
【知识梳理】 一、基因工程的概念及优点 1.概念：按照人们的愿望，进行严格的设计，并通过体外_D_N_A_重__组__ 和_转__基__因__等技术，赋予生物以新的遗传特性，从而创造出更符合人 们需要的新的_生__物__类__型__和__生__物__产__品__。 2.优点： (1)与杂交育种相比：克服了_远__缘__杂__交__不__亲__和__的障碍。 (2)与诱变育种相比：_定__向__改造生物的遗传性状。
考点一 基因工程的工具 1.与DNA有关的四种酶：
比较 项目
作用 底物
作用 部位
形成 产物
限制酶
DNA分子
磷酸二酯键 黏性末端 或平末端
DNA连接酶
DNA分 子片段
磷酸二酯键
形成重组 DNA分子
DNA聚合酶
脱氧核苷酸
磷酸二酯键 新的
DNA分子
解旋酶
DNA分子
碱基对 间的氢键
形成单 链DNA
2.限制酶：
(1)识别序列的特点：呈现碱基互补对称，无论是奇数个碱基还是
偶数个碱基，都可以找到一条中心轴线，如
，以中心线为
轴，两侧碱基互补对称；
以 为轴，两侧碱基互补对称。
(2)切割后末端的种类：
3.限制酶和DNA连接酶的关系：
(1)限制酶和DNA连接酶的作用部位都是磷酸二酯键。 (2)限制酶不切割自身DNA的原因是原核生物中不存在该酶的识别序列 或识别序列已经被修饰。 (3)DNA连接酶起作用时，不需要模板。
二、基因工程的工具 1.限制性核酸内切酶： (1)简称：_限__制__酶__。 (2)来源：主要从_原__核__生物中分离纯化出来。 (3)特点：_识__别__双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一 条链中特定部位的两个核苷酸之间的_磷__酸__二__酯__键__断开。 (4)结果：产生_黏__性__末__端__或平末端。
【考题回访】
1.(2015·济南模拟)根据基因工程的有关知识，回答下列问题：
(1)限制性内切酶切割DNA分子后产生的片段，其末端类型有
和
抗原—抗体杂交技术
个体生物学 抗虫或抗病接种实验，以确定是否有抗性以及抗性 水平鉴定 的程度
四、基因工程的应用 1.植物基因工程：主要用于提高农作物的_抗__逆__能__力__，以及改良 _农__作__物__的__品__质__和利用植物_生__产__药__物__等方面。 2.动物基因工程：主要应用于动物品种改良、建立_生__物__反__应__器__、 _器__官__移__植__等方面。 3.基因工程药物：来源于转基因的_工__程__菌__。 4.基因治疗：把_正__常__基__因__导入病人体内，使该基因的_表__达__产__物__发 挥功能。