血小板计数方法-血涂片法不容忽视

血小板计数方法-血涂片法不容忽视

摘要】目的探讨血涂片血小板计数方法的意义。方法取抗凝静脉血制成血涂片，经瑞氏染色后普通光学显微镜下间接数血小板，将其结果血细胞分析仪上测出血

小板计数和手工法计数进行比较。结果配对t检验比较，血小板降低组血涂片法

与血细胞分析仪计数进行比较，差异有统计学意义（P＜0.01），与手工法计数血

小板结果相比较，差异无统计学意义（P＞0.05），血小板正常组和增高组用血涂

片法分别与血细胞分析仪计数和手工法计数进行比较，各方法间差异无统计学意

义（P＞0.05）。结论结果显示，对血小板正常或升高的标本，血细胞分析仪计

数结果比较准确，但对血小板降低的标本，计数结果准确性较差。血涂片法间接

计数血小板直观、准确，具有一定的临床应用价值，对血细胞分析仪有复核作用。【关键词】血小板计数血涂片法血细胞分析仪手工法

作为血常规检查项目之一的血小板计数，临床医生和患者都越来越关心其检

查结果的准确性。因此，迫切要求准确计数血小板，保证实验室所测得的血小板

数是患者体内血小板数的真实体现。另一方面引起人们对血小板计数结果关注的

原因是目前所有的血小板计数方法都存在不少缺陷。迄今为止，所有计数血小板

的方法对于血小板减少的标本的准确性都比较差，亟需研究改进。本文采用两种

血涂片间接计数血小板的方法，将其结果与自动血细胞分析仪和手工法计数结果

进行比较，探讨血涂片法计数血小板的临床意义。

1 材料与方法

1.1标本采集收集2006年10月至2009年10月在本院住院及门诊患者标本

共150例。以同期血细胞分析仪所做质控结果为标准，根据血小板数量将患者标

本分成3组：血小板降低组（血小数小于100×109/L）50例；血小板正常组[血小

板数（100-300）×109/L]50例；血小板增高组（血小板数大于300×109/L）50例，所有标本均为乙二胺四乙酸抗凝静脉血。

1.2仪器与试剂日立牌CA-800型血细胞分析仪、普通显微镜、血细胞计数板。瑞氏染液、10g/L草酸铵稀释液。

1.3方法

1.3.1血涂片法取抗凝血10uL涂片，经瑞氏染色后分别用两种方法计数血涂

片中的血小板数。（1）血涂片A法：选择血涂片上细胞分布均匀的区域，在计

数1000个红细胞的同时计数血小板数，求得血小板与红细胞比值，将此比值乘

以同一份标本经血细胞分析仪测定所得的红细胞数，得到该血涂片法计数的血小

板数[3]。（2）血涂片B法：计数血涂片上100个白细胞的同时计数血小板数，

求得血小板与白细胞数，得到该血涂片法计数的血小板数[4]。

1.3.2血细胞分析仪法采用CA-800型血细胞分析仪测定标本的血小板、红细胞、白细胞数，所有标本采集后于1h内完成检测。

1.3.3手工法计数采用草酸铵稀释法同时计数血小板数。

1.4统计学方法数据处理、采用配对t检验比较和P值判断。

2 结果

结果见表1。由表1可见，血小板降低组4种方法两两比较，血涂片A、B法

及手工法分别与血细胞分析仪法比较，差异有统计学意义（P＜0.01），血涂片A、B法与手工法比较，差异无统计学意义（P＞0.05）；血小板升高组4种方法两两

比较，差异均无统计学意义（P＞0.05）；血小板正常组4种方法两两比较，差异

统计学意义（P＞0.05）。

表1 3种血小板计灵敏方法的结果比较（x±s）

3 讨论

目前所有的血小板计数方法都存在不少缺陷。世界卫生组织推荐的血小板计

数方法，除了存在细胞在计数板上散布的自然误差之外，最大的缺点是计数的血

小板太少，这一方法因操作者不同产生的变异系数可达10%-25%。作为目前临床

常用的自动化血细胞分析仪，其检测标本的数量及速度是手工法所无法比拟的。

由于血小板体积小、无色、易黏附，准确计数血小板很难，自动化的血细胞分析

仪无论是阻抗法还是光散射法，对于血小板及形态正常的标本，其结果一般也比

较可靠，但对于血小板明显减少和/或有形态异常者，其结果误差较大，有时甚至难以计数。尤其是在病理情况下，血中会出现一些大小近似血小板的所谓“非血小板颗粒”，这些所谓“非血小板颗粒”是导致影响血细胞分析析仪计数血小板的主要因素之一。因此，如果何准确计数血小板成为目前检验工作应需要探讨的问题。

研究报道显示，对血小板减少者，特别是当标本中血小板小于20×109/L时，

仪器法可信度较差，不能很好地反映血小板的真实数量，也不能保证检测结果的

准确性，本文采用血涂片间接计数血小板，可较直观地反映患者血小板数量的多少，尤其对于血小板减少者，表1、结果也说明了这一点。对于血小板正常或升

高的标本，采用文中的两种血涂片法计数血小板，其结果与自动血细胞分析仪计

数结果和手工法复检进行比较，各种方法之间差异均无统计学意义。而对血小板

减低组，两种血涂片计数结果与自动血细胞分析仪计数结果比较差异有统计学意

义（P＜0.01）。两种血涂片计数结果与手工法差异无统计意义，而手工法与自动血细胞分析仪计数结果比较差异无统计学意义（P＜0.01），这说明对血小板减少的标本来说，得用血涂片法计数观察。本文还将两种血涂片法计数血小板的结果

进行了比较，结果显示两种方法间差异无统计学意义。

采用血涂片计数血小板，虽然其结果不十分精确，但可以对血细胞分析仪结

果进行复核。同时血涂片法还有很好的保存性，当血小板数量正常而形态异常时，有利于辨认血小板的形态，更加有助于临床疾病的诊断和治疗。总而言之，对于

血小板数量减少的患者，血涂片法计数血小板不容忽视，这一方法简单、易行、

直观、准确，可在临床上广泛应用。