桑寄生质量标准的研究

桑寄生质量标准的研究

目的建立药材桑寄生的含量测定方法，进一步将桑寄生与槲寄生区别开来，减少经营单位和医疗使用单位的混用现象，从而提高中药材桑寄生的质量。方法以槲寄生对照药材为阴性对照，桑寄生对照药材为阳性对照，用HPLC法测定10批中药材桑寄生中槲皮素的含量。结果槲寄生中不含有槲皮素，桑寄生中槲皮素含量在1.40～2.66 mg/g范围内，线性良好（r=0.999 6）。平均加样回收率为99.5%，RSD=0.2%。结论该方法简便准确，重复性好，可更加精准的控制桑寄生的质量。

标签：桑寄生；HPLC；槲皮素；含量测定；槲寄生

桑寄生为桑寄生科植物桑寄生Taxillus chinensis（DC.）Danse的干燥带叶茎枝。冬季至次春采割，除去粗茎，切段，干燥，或蒸后干燥[1]。桑寄生入药始载于《神农本草经》，名“桑上寄生”，列入上品。《名医别录》云：“一名茑，生弘农川谷桑树上，三月三日采茎叶，阴干。”《新修本草》载：“此多生槲、榉、柳、水杨、枫等树上，子黄，大如小枣子。惟虢州有桑上者，子汁甚粘，核大似小豆；叶无阴阳，如细柳叶而厚；晚茎粗短。江南人相承用为续断，殊不相关。且寄生实九月始熟而黄。”《蜀本草》云：“按诸树多有寄生，茎叶并相似。”又云：“叶如橘而厚软，茎如槐而肥脆，今处处有。方家惟须桑上者，然非自采即难以别，可断茎而视之，以色深黄者为验。《图经本草》叶似龙胆而厚阔，茎短似鸡脚，作树形。三月、四月花，黄赤色，六月、七月结子黄绿色，如小豆，以汁稠粘者良也。”综上所述，古代所用的桑寄生，系来源于桑寄生科不同属的数种植物，除现作桑寄生入药的钝果寄生属、梨果寄生属外，尚包括槲寄生属植物。

历史上，槲寄生和桑寄生用名较为混乱，且由于二者功效相似及用药习惯的沿袭，临床上二者一直是混用的。从《名医别录》到《本草纲目》的一些本草著作，关于桑上寄生一项大都指槲寄生，直至近代。《植物学大辞典》1918年将Lorantheceae译为槲寄生，于是“槲寄生”一词在药学界广为应用了。到1977年版《中华人民共和国药典》已将槲寄生与桑寄生分别列为两种中药，它们分属桑寄生科的桑寄生属和槲寄生属[2]。现质量标准[1]中不含含量测定项槲皮素，为了控制桑寄生的质量，更好的区别桑寄生与槲寄生，特研究设立了高效液相色谱法（HPLC）测定桑寄生中槲皮素的含量[3]，此方法操作很简单，数据比较稳定，结果很准确。

1 材料与仪器

1.1材料

中药材桑寄生批号：20151012、20151013、20151014、20151032、21051033、20151034、20151035、20151036、20151047、20151048；槲寄生阴性对照药材（中国药品生物制品检定所）批号：121038-201014；桑寄生阳性对照药材（中国药品生物制品检定所）批号：121075-200402 对照品：槲皮素（中国药品生物制品

检定所）批号：100081-200406；含量测定所用的甲醇为青岛试剂厂生产的色谱纯，其他试剂均为分析纯。

1.2使用的仪器

Agilent高效液相色谱仪；检测器为ΜV-2450型紫外-可见分光；工作站为Sepμ 3000色谱。

2 实验方法与结果

2.1色谱条件

色谱柱：Agilent SB-C18色谱柱（4.6×250 mm，5μm）；柱温30 ℃。流速：1.0 mL/min、流动相：甲醇：0.5%磷酸溶液（47：53）；检测波长：360 nm。理论板数按槲皮素峰计算不得低于2500[4]。

2.2对照品溶液的配置

精密称取对照品槲皮素10 mg，置100 mL量瓶中，适量加80%甲醇使溶解并稀释至刻度，摇匀。精密量取10 mL，至50 mL量瓶中，加80%甲醇稀释至刻度，制成每1 mL含20 μg的槲皮素对照品溶液。

2.3供试品溶液的配置

取10批桑寄生样品粉末（过4号筛）各约2 g，精密称定，置锥形瓶中，精密加入甲醇-盐酸（23-2）50 mL，称定重量，加热回流2 h，取出，放冷，用甲醇补足减失重量，摇匀，滤过，弃去初滤液，取续滤液即得[6]。

2.4检测波长的确定

紫外-可见分光光度法，采用的仪器为北京普析TI-1901，以槲皮素对照品溶液的溶剂甲醇为空白对照，扫描200～400的紫外光区，测的槲皮素的最大吸收为260 nm，即为检测波长。

2.5阴性对照溶液制备

取槲寄生对照药材粉末约1 g，精密称定，置锥形瓶中，精密加入甲醇-盐酸（23-2）50 mL，称定重量，加热回流2 h，取出，放冷，用甲醇补足减失重量，摇匀，滤过，弃去初滤液，取续滤液即得阴性对照溶液。

2.6阳性对照溶液的制备

取桑寄生对照药材粉末约1 g，精密称定，置锥形瓶中，精密加入甲醇-盐酸（23-2）50 mL，称定重量，加热回流2 h，取出，放冷，用甲醇补足减失重量，

摇匀，滤过，弃去初滤液，取续滤液即得阳性对照溶液。

2.7测定法

分别精密吸取对照品溶液10 μL、阴性对照溶液10 μL、阳性对照溶液10 μL 和10批供试品溶液各10 μL，注入液相色谱仪，测定，即得。见图1。

2.8线性关系考察

实验对浓度为20 μg/mL的槲皮素对照品溶液进行线性考察。精密吸取对照品溶液2 μL、5 μL、10 μL、15 μL、20 μL、25 μL注入高效液相色谱仪（HPLC）中，按照上述条件测定吸收峰面积，计算进样量，以峰面积积分值横坐标，进样量为纵坐标（μg），根据面积归一化法绘制出标准曲线，得到槲皮素回归方程Y=3147.214x+268.159，r=0.9996，实验采用的对照品浓度呈现良好的线性关系。