瑞士万通785DMP 自动电位滴定仪检测青霉素含量

注射用青霉素钾 、钠兽药产品是目前养殖业中 应用极为广泛的抗生素药物 。其含量测定方法从 最初的微生物效价法逐渐被简便快捷的羟胺法 、碘 量法 、咪唑法和中和法等化学方法所取代 。《中华 人民共和国兽药典》2000 年版一部[1] 又进一步将 青霉素的含量测定方法修订为硝酸汞电位滴定法 , 此法的突出优点是 ,准确 、快捷和不需采用对照品 , 而直接根据消耗的硝酸汞滴定液的摩尔数计算青 霉素含量的方法 ,精密度好 ,结果可靠 。为此许多 检验部门购置了瑞士万通 785DMP 自动电位滴定 仪 。但据笔者了解 ,将该仪器应用于青霉素含量测 定的单位不多 ,且瑞士万通公司在中国的代表处也 没有做过青霉素含量测定的针对性试验 。为此 ,笔 者经过反复试验并与中和法进行了比较 ,说明用 785DMP 自动电位滴定仪测定青霉素含量的方法可 行。 1 仪器与试剂 1. 1 仪器 785DMP 自动电位滴定仪 ,瑞士万通公 司 ;AE240 电子天平 ,梅特勒 托利多 (上海) 有限公 司 ;可控硅控温水浴锅 ,通州长江医疗器械厂 ;电热 恒温水浴锅 ,江苏南通竹行医疗器械厂 ;酸式滴定 装置 ;电炉 。 1. 2 试剂 青霉素钾对照品 : 批号 043729501 ,含
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表 1 电位滴定法参数设定
滴定参数 Titration parameters
停止条件 stop conditions
体积增量 V step 0. 10 mL 停止体积方式 stop V abs.
配加速率 dos. rate ma x. mL/ min 体积停止 Stop V 8 mL
漂移信号 Signal drift 10 mv/ min
电位停止 Stop U Off mv
平衡时间 equilibr. Time 20 s
终点停止 Stop EP 9
起始体积 Start V off
充液速率 Fillingrate max. mL/ min
C fmla
明文庆 (1968 年～) ,男 ,助理兽医师 ,从事于兽药饲料检验工作 。 © 1995-2006 Tsinghua Tongfang Optical Disc Co., Ltd. All rights reserved.
2003 ,37 (4) :50～52/ 明文庆 ,等 中国兽药杂志
last
固定测量值 Fix EP 1 at U Off mv
评估 pk/ HNP :
OFF
预选顺序 preselections
提示样品识别 req. ident :
off
提示样品量 req. smplsize : all
样品量限制 Limits mpl size : off
远程插座激 活 Activate pulse : off
formula RS1 = EP1 ×CO1 ×CO2 ×CO3/ CO0 RS1 text RS1
RS1 decimal places
2
RS1 unit :
%
RS1 cimit control :
OFF
report
report COM1 :full ;curve 按 C FMLA 键 ,输入已知值 :
等待时间 pause 10 s
统计 Hale Waihona Puke Baidu statistios
测量输入 meas. Input
1
状态 status :
off
温度设定 temperature 由室温定
等当点评估 evaluation
等当点判别 EPC
30 mv
等当点识别 EP recognition
99. 4
99. 63
0. 16
99. 5
99. 70
0. 15
99. 6
99. 57
0. 20
99. 4
99. 54
0. 18
99. 4
中和法/ %
100. 5 99. 7 99. 9 100. 7 100. 0 100. 4 99. 9 99. 9 99. 8 100. 0
© 1995-2006 Tsinghua Tongfang Optical Disc Co., Ltd. All rights reserved.
(上接 49 页)
干燥总时间为 20 h 。 3. 3 选用全程 20 h 冷冻干燥曲线生产的“犬四 联”弱毒冻干苗 ,检测主要两项指标 ,结果残余水分 为 3 %;冻干后疫苗效价比冻干前降低 0. 5 个滴 度 。当超过 20 h 或少于 20 h 时 ,效价则降低 1～2 个滴 度 , 效 力 检 测 ( SN) : 20001 ～ 20004 批 ( CPV 、 CPIV) 血清抗体滴度均略高于 20005～200010 批 , 进一步证明选用全程为 20 h 冻干曲线是科学的 , 可行的 。
[ 摘 要 ] 采用瑞士万通公司生产的 785DMP 型自动电位滴定仪 ,按照《中国兽药典》2000 年版 一部电位滴定法测定青霉素含量 ,经反复试验 ,并与《中国兽药典》1990 年版一部规定的酸碱中 和法定量结果比较 ,证明 785DMP 自动电位滴定仪检测青霉素含量方法可行 ,并得出 785DMP 自 动电位滴定仪应设定的相关参数 ,供同行参考 。 [ 关键词 ] 785DMP 自动电位滴定仪 ;青霉素 ;参数
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中国兽药杂志 2003 ,37 (4) :50～52/ 明文庆 ,等
3 结论与讨论 3. 1 从表 1 可见 ,785DMP 电位滴定法结果与对照 品标示量接近 ,说明 785DMP 电位滴定法的准确度 高 ,可用于青霉素的含量测定 。 3. 2 从表 2 可算出 785DMP 电位滴定法结果的标 准偏差为 0. 15 ,而中和法结果的标准偏差为 0. 33 , 显然 785DMP 电位滴定法的精密度要比中和法的 精密度高 。 3. 3 参数设定的改变会影响结果的可靠性和试验 的合理性 。如 : EPC 变大会缩短滴定时间 ,变小会
表 3 注射用青霉素钾 (20010815) 所测结果比较
电位滴定法
总青霉素/ %
降解物/ %
占标示量的百分比/ %
99. 71
0. 18
99. 5
99. 35
0. 13
99. 2
99. 22
0. 12
99. 1
99. 57
0. 15
99. 4
99. 61
0. 16
99. 5
99. 60
0. 16
学技术出版社 , 1993 , 486 496. [4 ] 李六金 , 金昌德. 犬四联弱毒冻干疫苗的研究[J ] . 中国兽医
科技 , 1996 , 26 : 5 8. [ 5 ] 李六金 , 金昌德 , 李 秦 , 等. 犬细小病毒株的分离及疫苗应用
[2 ] 中国兽药典委员会. 中华人民共和国兽药典 一九九 ○年版一 部[ S] . 北京 : 农业出版社.
农业部公布新批准的兽药 GMP 合格企业 (车间)
根据《兽药生产质量管理规范》(简称兽药 GMP) 的规定 ,农业部组织的兽药 GMP 验收检查组对四川维 尔康动物药业有限公司等 4 家企业 (车间) 进行了兽药 CMP 检查验收 ,检查结果为 :四川维尔康动物药业 有限公司 、四川广汉正大饲料科技有限公司的粉剂和消毒剂车间达到静态检查标准 ;浙江国邦兽药有限公 司的原料药生产车间 、哈尔滨市亨通开发实业总公司兽药厂的粉针车间达到动态检查标准 。
延长滴定时间 ; stop EP 设为“1”,就会找不到第二 个终点 ,设为“9”是为了曲线更加圆滑 、完美 。dos. rate 设为最大只是为了缩短进液的时间 。 3. 4 试验表明 ,采用 785DMP 自动电位滴定仪按上 述参数设定进行青霉素测定 ,其效果令人满意。
参考文献 :
[1 ] 中国兽药典委员会. 中华人民共和国兽药典 二 ○○○年版一 部[ S] . 北京 : 化学工业出版社.
其余参数与总青霉素测定的参数一 致 。按 “USER METH”键 ,保存方法 ,文件名为“Qms2”,即 为降解物测定的参数 ,每次检测降解物只要调出 “Qms2”即可 。
注 : EP1 为终点 ; CO1 为每毫升硝酸汞滴定液 (0. 02 mol/ L) 相当于总青霉素和降解物的毫克数 ; CO2 为硝酸汞滴定液 (0. 02 mol/ L) 的 F 值 ; CO3 为 百分比 ;CO0 为样品重 。 2. 1. 2 操作方法 按《中华人民共和国兽药典》2000 年版一部[1]青霉素钾含量测定方法进行检测 。 2. 2 中和滴定法 按《中华人民共和国兽药典》1990 年版一部[2]青霉素钾含量测定方法进行检测 。 2. 3 两种方法检测结果及比较 见表 2 ,表 3 。
经审核 ,农业部于 2003 年 2 月 12 日批准上述 4 家企业 (车间) 为兽药 GMP 合格企业 (车间) 。对通过 动态检查的浙江国邦兽药有限公司的原料药生产车间 、哈尔滨市亨通开发实业总公司兽药厂的粉针车间 核发《兽药 GMP 生产企业 (车间) 合格证》,该合格证有效期五年 ,有效期满前 6 个月 ,需向农业部畜牧兽医 局提出再检查申请 。对通过静态检查的四川维尔康动物药业有限公司 、四川广汉正大饲料科技有限公司 的粉剂和消毒剂车间核发《兽药 CMP 生产企业 (车间) 静态合格证》,该证有效期为一年 ,期满前 3 个月 ,需 向农业部畜牧兽医局申请动态检查 。
参考文献
[1 ] 王明俊 , 冀锡霖 , 陈永亻间 , 等. 兽医生物制品学[M] . 北京 :中 国农业出版社 , 1997 , 346 372.
[2 ] 殷 震 , 刘景华. 动物病毒学 [ M] . 北京 : 科学出版社 , 1997 ,
1159 1161. [ 3 ] 蔡宝祥 , 殷 震 , 谢三星. 动物传染病诊断学[M] . 南京 :江苏科
量 99. 9 % ,中国药品生物制品检定所提供 ;注射用 青霉素钾 : 批号 20010815 ,1 ×106 万 IU ,安徽雉河 动物药业有限公司生产 ;蒸馏水 ;0. 01、0. 1、1 mol/ L 氢氧化钠溶液 ;1 mol/ L 硝酸溶液 ;pH 4. 6 醋酸盐缓 冲液 ;0. 02 mol/ L 硝酸汞滴定液 ; 酚酞指示液 ; 0. 1 mol/ L 盐酸滴定液 。 2 方法与结果 2. 1 电位滴定法 2. 1. 1 785DMP 自动电位滴定仪参数的设定 2. 1. 1. 1 总青霉素测定的参数设定 开机后 ,按 “MODE”键选择“MET”“U”滴定模式 。按“PARAM” 键 ,进行参数设定 ,见表 1 。按 DEF 键 ,进行公式设 定:
CO1 7. 450 CO2 1. 010 CO3 100
按“USER METH”键 , 保 存 方 法 , 文 件 名 为 “Qms1”,即为总青霉素测定的参数 ,每次检测总青 霉素只要调出“Qms1”即可 。 2. 1. 1. 2 降解物测定的参数设定 将测定参数中 部分参数修改为 : titration parameters V step 0. 02 ml stop conditions Stop EP 1
试验次数
1 2 3
表 2 青霉素钾化学对照品所测结果比较
电位滴定法
总青霉素/ %
降解物/ %
含量/ %
99. 97
0
99. 89
0
100. 01
0
100. 0 99. 9 100. 0
中和法/ %
100. 4 100. 7 100. 1
对照品标示量/ % 99. 9
试验次数
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
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中国兽药杂志 2003 ,37 (4) :50～52/ 明文庆 ,等
瑞士万通 785DMP 自动电位滴定仪 检测青霉素含量
明文庆 ,钱志平
(安徽省兽药饲料监察所 , 安徽合肥 230022) [ 收稿日期 ]2002 09 16 [ 文献标识码 ] B [ 文章编号 ] 1002 1280 (2003) 04 0050 03 [ 中图分类号 ]TQ460. 72