流式细胞仪数据分析
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1.1电源要求:220V (±10%)、50HZ(±10%)
1.2环境温度:5-35℃
1.3在相应湿度10-80%的环镜下工作
2. 设备用途:
细胞分析和分选功能
2.1分析功能:
2.1.1细胞周期测定,DNA含量分析,RNA测量与分析
2.1.2细胞凋亡检测,
2.1.3蛋白质总量测定,
2.1.4生物活性的测定,
2.1.5细胞內钙离子流动试验,Ca2+浓度测定,细胞内pH值测量,
2.1.6细胞內Oxidative Burst代谢产物,细胞表面电荷检测。
2.1.7抗原特异性免疫细胞的检测、分选和细胞治疗技术
2.1.8检测细胞因子,可溶性荧光蛋白等
*2.2细胞分选
流式一体化分选功能,采用捕获管技术,分选速度300个细胞/秒,分选纯度98%
3. 技术规格:
3.1主机系统
*3.1.1流式细胞仪主机系统:含15mw 488nm氩离子蓝色激光器,635nm红色激光器,4个荧光探测器和2个散射光探测器
*3.1.2光路: 双激光立体空间激发方式实现四色荧光分析:488nm激光器激发的三色荧光,635nm激光器激发第四色荧光.采用测向光路设计
*3.1.3滤光片:488nm激光的荧光通道包括530/30nm、585/42nm、670nm LP;635nm激光的荧光通道:661nmLP
*3.1.4可选用荧光:FITC, PE, PerCP,PI, PE-Cy5, PerCP-Cy5.5, PE-Cy,APC, Rhodamine, Cyanine等
*3.1.5必须配流式一体化分选系统
3.1.6光电倍增管:光谱检测范围300nm-1100nm 电压150V-990V
3.1.7荧光检测灵敏度:<100MESF
3.1.8全峰宽变异系数:CV<2%
3.1.9样本获取速度:>10,000个细胞/秒
3.1.10检测颗粒大小: 0.1um(min)-50um(max)
3.1.11最少样本体积:100μl
3.1.12流动室孔径:430um X 180um
3.1.13自动抽吸系统: 换样时自动吸去管道内剩余样本,避免样本之间的相互干扰
*3.1.14脉冲处理系统:能同时分析脉冲信号峰值、脉冲积分(面积)及脉冲宽度,用脉冲宽度和面积区分双连体细胞(如假四倍体细胞)
3.2 数据处理系统
苹果MAC Pro 工作站
3.2.1 CPU: 双核,主频2.8G
3.2.2 内存:2G
3.2.3 硬盘:容量300G
3.2.5 光驱:DVD-ROM, CD-RW
3.2.6 显示器:19英寸液晶显示器
3.3 应用软件
3.3.1全自动仪器校正软件
3.3.2多功能流式应用软件
3.3.3 DNA分析软件
4.资料
4.1有仪器全套电路图及中文操作手册
4.2有中华人民共和国医疗器械注册证
工作条件:
1.1电源要求:220V (±10%)、50HZ(±10%)
1.2环境温度:5-35℃
1.3在相应湿度10-80%的环镜下工作
2. 设备用途:
细胞分析和分选功能
2.1分析功能:
2.1.1细胞周期测定,DNA含量分析,RNA测量与分析
2.1.2细胞凋亡检测,
2.1.3蛋白质总量测定,
2.1.4生物活性的测定,
2.1.5细胞內钙离子流动试验,Ca2+浓度测定,细胞内pH值测量,
2.1.6细胞內Oxidative Burst代谢产物,细胞表面电荷检测。
2.1.7抗原特异性免疫细胞的检测、分选和细胞治疗技术
2.1.8检测细胞因子,可溶性荧光蛋白等
*2.2细胞分选
流式一体化分选功能,采用捕获管技术,分选速度300个细胞/秒,分选纯度98%
3. 技术规格:
3.1主机系统
*3.1.1流式细胞仪主机系统:含15mw 488nm氩离子蓝色激光器,635nm红色激光器,4个荧光探测器和2个散射光探测器
*3.1.2光路: 双激光立体空间激发方式实现四色荧光分析:488nm激光器激发的三色荧光,635nm激光器激发第四色荧光.采用测向光路设计
*3.1.3滤光片:488nm激光的荧光通道包括530/30nm、585/42nm、670nm LP;635nm激光的荧光通道:661nmLP
*3.1.4可选用荧光:FITC, PE, PerCP,PI, PE-Cy5, PerCP-Cy5.5, PE-Cy,APC, Rhodamine, Cyanine等
*3.1.5必须配流式一体化分选系统
3.1.6光电倍增管:光谱检测范围300nm-1100nm 电压150V-990V
3.1.7荧光检测灵敏度:<100MESF
3.1.8全峰宽变异系数:CV<2%
3.1.9样本获取速度:>10,000个细胞/秒
3.1.10检测颗粒大小: 0.1um(min)-50um(max)
3.1.11最少样本体积:100μl
3.1.12流动室孔径:430um X 180um
3.1.13自动抽吸系统: 换样时自动吸去管道内剩余样本,避免样本之间的相互干扰
*3.1.14脉冲处理系统:能同时分析脉冲信号峰值、脉冲积分(面积)及脉冲宽度,用脉冲宽度和面积区分双
连体细胞(如假四倍体细胞)
3.2 数据处理系统
苹果MAC Pro 工作站
3.2.1 CPU: 双核,主频2.8G
3.2.2 内存:2G
3.2.3 硬盘:容量300G
3.2.4 独立显卡
3.2.5 光驱:DVD-ROM, CD-RW
3.2.6 显示器:19英寸液晶显示器
3.3 应用软件
3.3.1全自动仪器校正软件
3.3.2多功能流式应用软件
3.3.3 DNA分析软件
4.资料
4.1有仪器全套电路图及中文操作手册
4.2有中华人民共和国医疗器械注册证
流式细胞仪数据分析
5.1 数据采集及显示
光信号转换成电压脉冲后,再通过模数转换器转换成为计算机能够储存处理的数字信号。流式细胞仪的数据以FSC标准格式存储,该标准由“分析细胞学协会”制定。
根据FSC标准,数据存储格式应包括三个文件:样本获取文件,数据设置文件和数据分析结果。4参数(FSC,SSC,FITC和PE)的单细胞分析会生成8位数据。当单个样品累计
收集到10000个细胞时,FCS数据文件为80kB。
数据采集存储完毕后,细胞亚群可以几种不同格式显示。单参数如FSC或FITC(FL1)可使用直方图,横轴表示荧光通道。纵轴表示在该通道内收集到的细胞数量(如图5-1)。
处在同一通道的每一细胞均符合该通道的信号值,而且具有相同的信号密度。通道右侧信号的荧光强度明显高于左侧,越靠右侧荧光亮度越强。图5-1 流式数据分析图双参数可在二维散点图中同时显示,X轴显示通道1(FL1),Y轴显示通道2(FL2)。3维图通过X,Y,Z三个轴分别显示每个通道的细胞量(如图5-1)。