第7章 需氧和兼性厌氧球菌鉴定
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（2）在普皿上：形成1～2mm、 圆形、光滑、边缘整齐、不透明、 有色菌落。不同菌株产生不同的 脂溶性色素，如：金黄色、白色、 柠檬色
金黄色葡萄球菌 金黄色脂溶性色素
2.培养特性
表皮葡萄球菌在普通琼 脂平皿上的白色色素
表皮葡萄球菌在血 平板上的白色色素
（3）在血皿上 金黄色葡萄球菌和溶血性葡萄球 菌，能产生溶血毒素，在血平板上产生β-溶血。其 他葡萄球菌无此现象
金黄色葡萄球菌在血平板上24h菌落
金黄色葡萄球菌在高盐甘露 醇平板上的淡黄色菌落
（4）在高盐甘露醇平 板上：大多数葡萄球 菌耐盐性强（10%～ 15%g/L NaCl培养基中 生长）。此平板常作 为选择性培养基，菌 可分解甘露醇使指示 剂呈淡黄色。G-菌在 此平板上不生长
（5）卵黄高盐琼脂平 板：金黄色葡萄球菌产 生卵磷脂酶，在此培养 基上，菌落周围可形成 白色沉淀环。表皮葡萄 球菌亦可生长，但无白 色沉淀环。
（2）血平板：菌落小，灰白色，半透明，不 同菌种的溶血现象不同，有α-溶血、β-溶血和 γ-溶血（不溶血）
α-溶血
β-溶血
γ-溶血
3. 分 类 根 据 下 述 链 球 菌 的 溶 血 特 征 和
Lancefield血清学等传统的分类法，目前仍然是临 床实验室鉴定链球菌的常规使用方法。
（1）根据培养基上溶血特性分类：
表皮葡萄球菌 S
腐生葡萄球菌 R
6.药敏试验 （2）药敏试验（临床上按CLSI选择抗菌药物进行试验）
（3）耐甲氧西林的葡萄球菌药敏试验 专家提示
MRSA和非MRSA
☞当临床上检测出 MRSA，即使对头孢菌素 类的体外药敏试验表现 为“敏感”时，也不宜 将这种假象向临床报告 ，以免造成错误导向。
7.鉴定 按科→属→种的顺序 （1）科间鉴别
分类 甲型（α）溶血性链球菌 乙型（β）溶血性链球菌 丙型（γ）链球菌
菌落特征
灰色、针尖状菌落、周围有草绿色溶血环（ α 溶血）
灰白色细小菌落、周围有宽大透明溶血环（ β 溶血 ）
灰白色小菌落、无溶血环
（2）根据抗原结构分类：链球菌Ag结构较
复杂，含多种抗原，主要有：
多糖抗原 *为群特异性抗原：位于细胞壁上，Lancefield将乙
A群杆菌肽 S
A、B和D群链球菌杆菌肽试验
3. 生化反应
（2）B群链球菌：CAMP+，马尿酸钠+ 思考：CAMP原理？
（3）D群链球菌：PYR+，七叶苷+ D群链球菌七叶苷+（上） A群链球菌七叶苷-（下）
B群CAMP+
吡咯烷酮 试验 （PYR） 检验方法吡咯烷酮 芳基酰胺 酶
3. 生化反应
（4）肺炎链球菌：Optochin S，胆汁溶菌+，菊糖+
5. 分类 葡萄球菌属可根据DNA的同源性、色素、
生化反应及是否产生凝固酶等不同方法进行分类。
凝固酶阳性
*根据是否产生凝固酶分
葡萄球菌
凝固酶阴性
6.抵抗力 葡萄球菌是抵抗力最强的无芽胞细菌。
二、临床意义
（一）致病物质
1、血浆凝固酶： 游离凝固酶 结合凝固酶
2、毒素 ： 葡萄球菌溶血素
杀白细胞素
肠毒素
本章重点：
1.葡萄球菌属、链球菌属、肠球菌属和奈瑟菌属的 主要生物学特性和微生物学检验
2.葡萄球菌属、链球菌属、肠球菌属和奈瑟菌属的 临床意义
概述
球菌的种类很多，根据革兰染色性不同分为革兰 阳性和革兰阴性球菌。
致病性球菌称病原性球菌主要引起化脓性炎症 又可称为化脓性球菌
第一节 葡萄球菌属
葡萄球菌属细菌为一类触酶阳性的革兰染 色阳性球菌，因常堆聚成葡萄串状而得名。广 泛分布于自然界并构成人体的正常菌群。大多 非致病，有少部分引起化脓性感染。主要包括 金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、腐生葡萄球 菌、溶血性葡萄球菌等35个种，17个亚种
多糖抗原
具有型特异性的半抗原。金黄色葡萄球菌-核糖醇 磷壁酸；表皮葡萄球菌等凝固酶阴性葡萄球菌-甘油磷 壁酸。检测磷壁酸抗体有助于金黄色葡萄球菌感染的 诊断和预后判断
SPA抗吞噬作用
Fc 受体 immunoglobulin
吞噬细胞表面
Protein A 细菌
Ag
SPA
金葡菌
IgG SPA作为载体的协同凝集试 验：广泛应用于多种微生物 的检出
应考虑将其鉴定到种。当MRSA对头孢菌素类的体外药敏试验表现为 “敏感”时，不能将这种假象向临床报告，以免造成错误导向。因 为体内活性试验已证实头孢菌素类对MRSA无效。
第二节 链球菌属
链球菌属细菌为一类触酶阴性的革兰染色阳性 球菌，广泛分布于自然界、人及动物肠道和健康人 鼻咽部
一、生物学特性
1.形态与染色 G+球菌，直径0.5～1um （1）液体培养基中链状排列，长短不一。短由4～8 个菌组成，长者可达20～30个细菌组成 （2）在固体培养基或脓汁标本中，呈短链、成双或
－
－
－
腐生葡萄球菌
－
－
＋
－
＋
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人葡萄球菌
－
－
＋
－
－
－
专家提示
☞金黄色葡萄球菌系毒力很强的致病菌，无论从任何标本中分 离出均应及时鉴定，进行药敏试验和尽快报告临床。
☞从输液导管、人工植入组织中分离出表皮葡萄球菌和从尿液
标本中分离出腐生葡萄球菌应视为病原菌 （葡萄球菌的尿液培养菌
落计数应考虑>103～104为阳性菌尿标准）。 ☞其它凝固酶阴性葡萄球菌引起感染流行或临床治疗失败时，
乳胶凝集试验原理
在纸板或玻片上滴加包被有人类纤维蛋白原和抗金黄色葡 萄球菌单克隆IgG抗体的蓝色胶乳颗粒，然后用接种环挑取待鉴 定葡萄球菌的新鲜培养物与之混匀，待检葡萄球菌如能产生结 合的凝固酶，可作用于包被在蓝色胶乳颗粒上的纤维蛋白原成 为纤维蛋白，沉积在葡萄球菌上使它们发生凝集；或待检菌菌 体（A蛋白）与吸附在蓝色胶乳颗粒IgG的Fab结合，引起蓝色胶 乳颗粒被动凝集，出现肉眼可见凝集团块为乳胶凝集试验阳性
表皮剥脱毒素
毒性休克综合征毒素-1
凝固酶（coagulase）
• 概念：使含有抗凝剂的人或兔血浆 ，发生凝固的酶类物质。
• 种类
➢结合凝固酶 bound coagulase ➢游离凝固酶 free coagulase
Negative slide coagulase test
Positive slide coagulase test
（5）甘露醇发酵试验：金黄色葡萄 球菌阳性。 （6）肠毒素试验：现多采用免疫学 方法快速检测肠毒素，主要以ELISA 为主。 （7）其他鉴定试验：临床上常用商 品化鉴定系统如 API葡萄球菌鉴定试剂盒。
API STAPH可鉴定试剂盒
5.生化反应
（8）其它非培养鉴定或检查方法： 1 ） 免 疫 学 方 法 ： 用 ELISA 或 对 流
微球菌科、链球菌科和奈瑟菌科鉴别要点
7.鉴定 按科→属→种的顺序 （2）属间鉴别
葡萄球菌属与微球菌属鉴别要点
（3）种间鉴别 引起临床感染的最常见的5种葡萄球菌鉴别要点
菌名
血浆 凝固酶
耐热 DNA酶
脲酶
甘露糖 氧化
新生霉 素耐药
多粘菌素 B耐药
金黄色葡萄球菌 ＋
＋
D
＋
－
＋
表皮葡萄球菌
－
－＋
＋
－
＋
溶血葡萄球菌
3.生化反应：葡萄球菌的生化活性强，能分解多 种糖类，蛋白质和氨基酸，触酶阳性。
发酵葡萄糖
阴性对照
触酶阳性
4.细胞壁抗原 主要类型有下列两种
蛋白抗原 *又称为葡萄球菌A蛋白（SPA），具有种、属特异
性的完全抗原。 SPA可与人类的IgG的Fc段非特异性结 合，而不影响Fab段与特异性抗原结合的功能， 它作 为检测多种微生物抗原的实验室技术的重要试剂，可 进行简单、快速的协同凝集试验
➢ 意义 • 鉴别有无致病性的重要指标
➢ 致病机理： • 抵抗吞噬细胞吞噬或胞内消化 • 保护病菌不受血清中杀菌物质的破坏 • ※使感染易于局限化和形成血栓
肠毒素（enterotoxin）
➢耐热100℃30min，抗 胃肠液中蛋白酶
➢引起食物中毒，1-6小 时起病，1-2天恢复
➢作用机制：刺激呕吐中 枢导致以呕吐为主要症 状的食物中毒。
球菌，葡萄串状排列，疑为葡萄球菌”的初步报告。
3. 增菌培养 血液标本增菌培养，24h培养后每日 观察增菌液变化。如无变化，需培养7d，其中盲目 传代2次，如无细菌培养可报“血液标本经7d培养无 菌生长”。如发生混浊、内有胶胨样凝块等现象可 进行进一步分离培养和革兰染色
专家提示
☞正常情况下无菌状态的 体液标本如脑脊液，浆膜腔积 液和关节腔抽出液等，直接涂
第八章 病原性球菌检验
本章内容
1 概述 2 第一节 葡萄球菌属 3 第二节 链球菌属 4 第三节 肠球菌属 5 第四节 奈瑟菌属
学习目标：
1.掌握：葡萄球菌属、链球菌属、肠球菌属和奈瑟 菌属的主要生物学特性和微生物学检验，尤其是 它们的鉴定依据和鉴别要点
2.熟悉葡萄球菌属、链球菌属、肠球菌属和奈瑟菌 属的临床意义
Petrifilm RSA检测片,培养上耐热DNA酶反应为呈粉红色 环带包围着一个红色或蓝色的菌落，从而达到鉴别耐热核 酸酶的目的。
5.生化反应 （4）乳胶凝集试验
第一节 葡萄球菌属
阳性反应
阴性反应
Slidex Staph Plus可快速鉴定金黄色葡萄球菌
此试验不仅可检测金黄色葡萄球菌凝固酶，还可检测葡萄球菌A蛋白（SPA）
生 分离培养
生长现象
色素、溶血
物 检
鉴定
验
形态染色：革兰阳性球菌 生化反应：血浆凝固酶、甘露醇、耐热核酸酶
程 毒素测定 序
幼猫试验
药物敏感试验
报告
三、微生物学检验 1.标本：主要有血液、尿液、痰液、脑脊液、穿刺 液和浓液等。
2. 直接涂片：标本或增菌液直接涂片，革兰染色镜检见
革兰阳性呈葡萄串状排列球菌，即可做出 “查见革兰阳性
A群链球菌
B群链球菌 肺炎链球菌
链球菌幼龄时可 见荚膜，继续培养荚 膜消失
肺炎链球菌常常 呈双排列，故又称为 肺炎双球菌。在动物 体内它可形成较厚的 荚膜
链球菌属无鞭毛 、无芽胞
肺炎链球菌荚膜
2.培养特性 营养要求高，5%～10%CO2环境生长更好 （1）液体培养基（血清肉汤）：沉淀生长（上
清液澄清/微混）
链（溶血性）分成A、B、C、D等20个群。 蛋白抗原
*型特异性抗原：位于菌体表面，有M、T、R和S蛋白。
链球菌Ag群中，对人类致病者90%属A群，B、C、D 、F、G群也常感染致化脓性疾患。
（3）综合溶血性、抵抗力、生化反应性状分类
3.生化反应 生化活性较活跃：触酶阴性，葡萄 糖+，菊糖－
（1）A群链球菌：杆菌肽 S
表皮剥脱毒素（exfoliative toxin）
• 烫伤样皮肤综合征（ staphylococcal scalded skin syndrome，SSSS）
毒性休克综合征毒素-1（TSST-1）
➢诱导单核细胞产生IL-1、TNF等细胞因子引 起机体发热。
➢可引起多个器官系统的功能紊乱或毒性休 克综合征（TSS）
片检查具有重要价值，其他体
液标本伴有炎症细胞也有参考 价值
4.分离培养 （1）血平板：35℃18～24h （2）高盐甘露醇平板或高盐 卵黄平板
(*进行葡萄球菌菌落特征复习)
5.生化反应： （1）触酶试验：阳性。 （2）凝固酶试验：玻片法和试管法。
5.生化反应 （3）耐热DNA试验
金黄色葡萄球菌 耐热DNA试验 (+) 性 表皮葡萄球菌 耐热DNA试验 (-)性
• 高热，低血压，休克 • 出疹 • 呕吐，腹泻 • 麻痹
（二）所致疾病：
化脓性 局部化脓性感染（脏器脓肿、皮肤
全身化脓性感染（败血症）
毒素性
食物中毒
毒性休克综合症 （高热、低血压、休克）
烫伤样皮肤综合症 （红斑、起皱、大疱、脱落
）
标本 脓汁，血液，剩余食物，呕吐物等
直接涂片镜检 革兰阳性球菌
微
肺炎链球菌Optochin S 胆汁溶菌（平板法） 胆汁溶菌（试管法）
二、临床意义
免疫电泳方法检测金黄色葡萄球菌磷 壁酸抗体
2）分子生物学方法：用商品化 Accu 探 针 对 培 养 物 进 行 鉴 定 ， 用 脉 冲 场 凝 胶 电 泳 法 （ PFGE） 对 葡 萄 球 菌 的 质粒和染色体进行限制性核酸内切酶 分析等
6.药敏试验
（1）药敏鉴别试验-新生霉素敏感试验
金黄色葡萄球菌 S
一、生物学特性 1.形态与染色 ➢革兰染色阳性 （G+） ，球形或椭圆形，葡萄串状排列 ➢无芽胞，无鞭毛，体外培养一般不形成荚膜
金黄色葡萄球菌（脓汁）镜下形态 金黄色葡萄球菌纯培养镜下形态
2. 培养特性 营养要求不高，在普通
营养琼脂（普皿）上生长良好。在 20%CO2中有利于毒素形成
（1）在液体培养基：呈均匀混浊生 长
金黄色葡萄球菌 金黄色脂溶性色素
2.培养特性
表皮葡萄球菌在普通琼 脂平皿上的白色色素
表皮葡萄球菌在血 平板上的白色色素
（3）在血皿上 金黄色葡萄球菌和溶血性葡萄球 菌，能产生溶血毒素，在血平板上产生β-溶血。其 他葡萄球菌无此现象
金黄色葡萄球菌在血平板上24h菌落
金黄色葡萄球菌在高盐甘露 醇平板上的淡黄色菌落
（4）在高盐甘露醇平 板上：大多数葡萄球 菌耐盐性强（10%～ 15%g/L NaCl培养基中 生长）。此平板常作 为选择性培养基，菌 可分解甘露醇使指示 剂呈淡黄色。G-菌在 此平板上不生长
（5）卵黄高盐琼脂平 板：金黄色葡萄球菌产 生卵磷脂酶，在此培养 基上，菌落周围可形成 白色沉淀环。表皮葡萄 球菌亦可生长，但无白 色沉淀环。
（2）血平板：菌落小，灰白色，半透明，不 同菌种的溶血现象不同，有α-溶血、β-溶血和 γ-溶血（不溶血）
α-溶血
β-溶血
γ-溶血
3. 分 类 根 据 下 述 链 球 菌 的 溶 血 特 征 和
Lancefield血清学等传统的分类法，目前仍然是临 床实验室鉴定链球菌的常规使用方法。
（1）根据培养基上溶血特性分类：
表皮葡萄球菌 S
腐生葡萄球菌 R
6.药敏试验 （2）药敏试验（临床上按CLSI选择抗菌药物进行试验）
（3）耐甲氧西林的葡萄球菌药敏试验 专家提示
MRSA和非MRSA
☞当临床上检测出 MRSA，即使对头孢菌素 类的体外药敏试验表现 为“敏感”时，也不宜 将这种假象向临床报告 ，以免造成错误导向。
7.鉴定 按科→属→种的顺序 （1）科间鉴别
分类 甲型（α）溶血性链球菌 乙型（β）溶血性链球菌 丙型（γ）链球菌
菌落特征
灰色、针尖状菌落、周围有草绿色溶血环（ α 溶血）
灰白色细小菌落、周围有宽大透明溶血环（ β 溶血 ）
灰白色小菌落、无溶血环
（2）根据抗原结构分类：链球菌Ag结构较
复杂，含多种抗原，主要有：
多糖抗原 *为群特异性抗原：位于细胞壁上，Lancefield将乙
A群杆菌肽 S
A、B和D群链球菌杆菌肽试验
3. 生化反应
（2）B群链球菌：CAMP+，马尿酸钠+ 思考：CAMP原理？
（3）D群链球菌：PYR+，七叶苷+ D群链球菌七叶苷+（上） A群链球菌七叶苷-（下）
B群CAMP+
吡咯烷酮 试验 （PYR） 检验方法吡咯烷酮 芳基酰胺 酶
3. 生化反应
（4）肺炎链球菌：Optochin S，胆汁溶菌+，菊糖+
5. 分类 葡萄球菌属可根据DNA的同源性、色素、
生化反应及是否产生凝固酶等不同方法进行分类。
凝固酶阳性
*根据是否产生凝固酶分
葡萄球菌
凝固酶阴性
6.抵抗力 葡萄球菌是抵抗力最强的无芽胞细菌。
二、临床意义
（一）致病物质
1、血浆凝固酶： 游离凝固酶 结合凝固酶
2、毒素 ： 葡萄球菌溶血素
杀白细胞素
肠毒素
本章重点：
1.葡萄球菌属、链球菌属、肠球菌属和奈瑟菌属的 主要生物学特性和微生物学检验
2.葡萄球菌属、链球菌属、肠球菌属和奈瑟菌属的 临床意义
概述
球菌的种类很多，根据革兰染色性不同分为革兰 阳性和革兰阴性球菌。
致病性球菌称病原性球菌主要引起化脓性炎症 又可称为化脓性球菌
第一节 葡萄球菌属
葡萄球菌属细菌为一类触酶阳性的革兰染 色阳性球菌，因常堆聚成葡萄串状而得名。广 泛分布于自然界并构成人体的正常菌群。大多 非致病，有少部分引起化脓性感染。主要包括 金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、腐生葡萄球 菌、溶血性葡萄球菌等35个种，17个亚种
多糖抗原
具有型特异性的半抗原。金黄色葡萄球菌-核糖醇 磷壁酸；表皮葡萄球菌等凝固酶阴性葡萄球菌-甘油磷 壁酸。检测磷壁酸抗体有助于金黄色葡萄球菌感染的 诊断和预后判断
SPA抗吞噬作用
Fc 受体 immunoglobulin
吞噬细胞表面
Protein A 细菌
Ag
SPA
金葡菌
IgG SPA作为载体的协同凝集试 验：广泛应用于多种微生物 的检出
应考虑将其鉴定到种。当MRSA对头孢菌素类的体外药敏试验表现为 “敏感”时，不能将这种假象向临床报告，以免造成错误导向。因 为体内活性试验已证实头孢菌素类对MRSA无效。
第二节 链球菌属
链球菌属细菌为一类触酶阴性的革兰染色阳性 球菌，广泛分布于自然界、人及动物肠道和健康人 鼻咽部
一、生物学特性
1.形态与染色 G+球菌，直径0.5～1um （1）液体培养基中链状排列，长短不一。短由4～8 个菌组成，长者可达20～30个细菌组成 （2）在固体培养基或脓汁标本中，呈短链、成双或
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腐生葡萄球菌
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人葡萄球菌
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专家提示
☞金黄色葡萄球菌系毒力很强的致病菌，无论从任何标本中分 离出均应及时鉴定，进行药敏试验和尽快报告临床。
☞从输液导管、人工植入组织中分离出表皮葡萄球菌和从尿液
标本中分离出腐生葡萄球菌应视为病原菌 （葡萄球菌的尿液培养菌
落计数应考虑>103～104为阳性菌尿标准）。 ☞其它凝固酶阴性葡萄球菌引起感染流行或临床治疗失败时，
乳胶凝集试验原理
在纸板或玻片上滴加包被有人类纤维蛋白原和抗金黄色葡 萄球菌单克隆IgG抗体的蓝色胶乳颗粒，然后用接种环挑取待鉴 定葡萄球菌的新鲜培养物与之混匀，待检葡萄球菌如能产生结 合的凝固酶，可作用于包被在蓝色胶乳颗粒上的纤维蛋白原成 为纤维蛋白，沉积在葡萄球菌上使它们发生凝集；或待检菌菌 体（A蛋白）与吸附在蓝色胶乳颗粒IgG的Fab结合，引起蓝色胶 乳颗粒被动凝集，出现肉眼可见凝集团块为乳胶凝集试验阳性
表皮剥脱毒素
毒性休克综合征毒素-1
凝固酶（coagulase）
• 概念：使含有抗凝剂的人或兔血浆 ，发生凝固的酶类物质。
• 种类
➢结合凝固酶 bound coagulase ➢游离凝固酶 free coagulase
Negative slide coagulase test
Positive slide coagulase test
（5）甘露醇发酵试验：金黄色葡萄 球菌阳性。 （6）肠毒素试验：现多采用免疫学 方法快速检测肠毒素，主要以ELISA 为主。 （7）其他鉴定试验：临床上常用商 品化鉴定系统如 API葡萄球菌鉴定试剂盒。
API STAPH可鉴定试剂盒
5.生化反应
（8）其它非培养鉴定或检查方法： 1 ） 免 疫 学 方 法 ： 用 ELISA 或 对 流
微球菌科、链球菌科和奈瑟菌科鉴别要点
7.鉴定 按科→属→种的顺序 （2）属间鉴别
葡萄球菌属与微球菌属鉴别要点
（3）种间鉴别 引起临床感染的最常见的5种葡萄球菌鉴别要点
菌名
血浆 凝固酶
耐热 DNA酶
脲酶
甘露糖 氧化
新生霉 素耐药
多粘菌素 B耐药
金黄色葡萄球菌 ＋
＋
D
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表皮葡萄球菌
－
－＋
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－
＋
溶血葡萄球菌
3.生化反应：葡萄球菌的生化活性强，能分解多 种糖类，蛋白质和氨基酸，触酶阳性。
发酵葡萄糖
阴性对照
触酶阳性
4.细胞壁抗原 主要类型有下列两种
蛋白抗原 *又称为葡萄球菌A蛋白（SPA），具有种、属特异
性的完全抗原。 SPA可与人类的IgG的Fc段非特异性结 合，而不影响Fab段与特异性抗原结合的功能， 它作 为检测多种微生物抗原的实验室技术的重要试剂，可 进行简单、快速的协同凝集试验
➢ 意义 • 鉴别有无致病性的重要指标
➢ 致病机理： • 抵抗吞噬细胞吞噬或胞内消化 • 保护病菌不受血清中杀菌物质的破坏 • ※使感染易于局限化和形成血栓
肠毒素（enterotoxin）
➢耐热100℃30min，抗 胃肠液中蛋白酶
➢引起食物中毒，1-6小 时起病，1-2天恢复
➢作用机制：刺激呕吐中 枢导致以呕吐为主要症 状的食物中毒。
球菌，葡萄串状排列，疑为葡萄球菌”的初步报告。
3. 增菌培养 血液标本增菌培养，24h培养后每日 观察增菌液变化。如无变化，需培养7d，其中盲目 传代2次，如无细菌培养可报“血液标本经7d培养无 菌生长”。如发生混浊、内有胶胨样凝块等现象可 进行进一步分离培养和革兰染色
专家提示
☞正常情况下无菌状态的 体液标本如脑脊液，浆膜腔积 液和关节腔抽出液等，直接涂
第八章 病原性球菌检验
本章内容
1 概述 2 第一节 葡萄球菌属 3 第二节 链球菌属 4 第三节 肠球菌属 5 第四节 奈瑟菌属
学习目标：
1.掌握：葡萄球菌属、链球菌属、肠球菌属和奈瑟 菌属的主要生物学特性和微生物学检验，尤其是 它们的鉴定依据和鉴别要点
2.熟悉葡萄球菌属、链球菌属、肠球菌属和奈瑟菌 属的临床意义
Petrifilm RSA检测片,培养上耐热DNA酶反应为呈粉红色 环带包围着一个红色或蓝色的菌落，从而达到鉴别耐热核 酸酶的目的。
5.生化反应 （4）乳胶凝集试验
第一节 葡萄球菌属
阳性反应
阴性反应
Slidex Staph Plus可快速鉴定金黄色葡萄球菌
此试验不仅可检测金黄色葡萄球菌凝固酶，还可检测葡萄球菌A蛋白（SPA）
生 分离培养
生长现象
色素、溶血
物 检
鉴定
验
形态染色：革兰阳性球菌 生化反应：血浆凝固酶、甘露醇、耐热核酸酶
程 毒素测定 序
幼猫试验
药物敏感试验
报告
三、微生物学检验 1.标本：主要有血液、尿液、痰液、脑脊液、穿刺 液和浓液等。
2. 直接涂片：标本或增菌液直接涂片，革兰染色镜检见
革兰阳性呈葡萄串状排列球菌，即可做出 “查见革兰阳性
A群链球菌
B群链球菌 肺炎链球菌
链球菌幼龄时可 见荚膜，继续培养荚 膜消失
肺炎链球菌常常 呈双排列，故又称为 肺炎双球菌。在动物 体内它可形成较厚的 荚膜
链球菌属无鞭毛 、无芽胞
肺炎链球菌荚膜
2.培养特性 营养要求高，5%～10%CO2环境生长更好 （1）液体培养基（血清肉汤）：沉淀生长（上
清液澄清/微混）
链（溶血性）分成A、B、C、D等20个群。 蛋白抗原
*型特异性抗原：位于菌体表面，有M、T、R和S蛋白。
链球菌Ag群中，对人类致病者90%属A群，B、C、D 、F、G群也常感染致化脓性疾患。
（3）综合溶血性、抵抗力、生化反应性状分类
3.生化反应 生化活性较活跃：触酶阴性，葡萄 糖+，菊糖－
（1）A群链球菌：杆菌肽 S
表皮剥脱毒素（exfoliative toxin）
• 烫伤样皮肤综合征（ staphylococcal scalded skin syndrome，SSSS）
毒性休克综合征毒素-1（TSST-1）
➢诱导单核细胞产生IL-1、TNF等细胞因子引 起机体发热。
➢可引起多个器官系统的功能紊乱或毒性休 克综合征（TSS）
片检查具有重要价值，其他体
液标本伴有炎症细胞也有参考 价值
4.分离培养 （1）血平板：35℃18～24h （2）高盐甘露醇平板或高盐 卵黄平板
(*进行葡萄球菌菌落特征复习)
5.生化反应： （1）触酶试验：阳性。 （2）凝固酶试验：玻片法和试管法。
5.生化反应 （3）耐热DNA试验
金黄色葡萄球菌 耐热DNA试验 (+) 性 表皮葡萄球菌 耐热DNA试验 (-)性
• 高热，低血压，休克 • 出疹 • 呕吐，腹泻 • 麻痹
（二）所致疾病：
化脓性 局部化脓性感染（脏器脓肿、皮肤
全身化脓性感染（败血症）
毒素性
食物中毒
毒性休克综合症 （高热、低血压、休克）
烫伤样皮肤综合症 （红斑、起皱、大疱、脱落
）
标本 脓汁，血液，剩余食物，呕吐物等
直接涂片镜检 革兰阳性球菌
微
肺炎链球菌Optochin S 胆汁溶菌（平板法） 胆汁溶菌（试管法）
二、临床意义
免疫电泳方法检测金黄色葡萄球菌磷 壁酸抗体
2）分子生物学方法：用商品化 Accu 探 针 对 培 养 物 进 行 鉴 定 ， 用 脉 冲 场 凝 胶 电 泳 法 （ PFGE） 对 葡 萄 球 菌 的 质粒和染色体进行限制性核酸内切酶 分析等
6.药敏试验
（1）药敏鉴别试验-新生霉素敏感试验
金黄色葡萄球菌 S
一、生物学特性 1.形态与染色 ➢革兰染色阳性 （G+） ，球形或椭圆形，葡萄串状排列 ➢无芽胞，无鞭毛，体外培养一般不形成荚膜
金黄色葡萄球菌（脓汁）镜下形态 金黄色葡萄球菌纯培养镜下形态
2. 培养特性 营养要求不高，在普通
营养琼脂（普皿）上生长良好。在 20%CO2中有利于毒素形成
（1）在液体培养基：呈均匀混浊生 长