程序升温毛细管气相色谱法测定食品中甜蜜素含量方法研究

０引言

甜蜜素化学名称为环己基氨基磺酸钠，于1937年发现，1950年开始生产应用。它是由环己胺和氯磺酸或氨基磺酸或三氧化硫反应后用NaOH处理，再重结晶制得的一种白色结晶粉末。在高1甜度甜味剂中，甜度是最低的，为蔗糖的30～80倍。风味较自然，后苦不明显，热稳定性高，是不被人体吸收的低热能甜味剂。1969年，曾因其致畸性的报道而被世界各国禁用。后来由于大量试验表明它并无致畸、致癌等作用，许多国家重又许可使用。我国于1987年开始应用甜蜜素，它是目前我国食品行业中应用最多的一种甜味剂[1]。因其安全性和口感优于糖精，目前被广泛用做饮料、蜜饯、炒货的甜味剂。近年来，甜蜜素的使用量大大增加，一些企业（特别是小企业）对自身的要求不严，导致甜蜜素超标的现象特别严重（GB2760-2007食品添加剂使用卫生标准规定，甜蜜素在饮料中最高使用量为0.65g/kg），所以有必要加强对食品中甜蜜素的检测。

甜蜜素含量检测目前有气相色谱检测方法和液相色谱检测方法等。甜蜜素的测定多采用气相色谱法，最经典的方法是GB/T5009.97-2003《食品中环己基氨基磺酸钠的测定》。样品进行酯化反应后，在

程序升温毛细管气相色谱法测定食品中甜蜜素含量方法研究

ＤｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆＳｏｄｉｕｍＣｙｃｌａｍａｔｅｉｎＦｏｏｄｂｙＣａｐｉｌｌａｒｙＧａｓＣｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ

肖聪伟１，３王磊１，３陈建芳２，３钟剑３，４吴佩４万茵２，３

Xiao Congwei Wang Lei Chen Jianfang Zhong Jian Wu Pei Wan Yin

（1.江西省产品质量监督检测院，江西南昌330046；2.南昌大学食品科学与技术国家重点实验室，江西南昌330047；3.南昌大学生命科学与食品工程学院，江西南昌330031；4.江西省鸽鸽食品有限公司，

江西鹰潭335000）

（1.Product Quality Supervision and Testing Institute of Jiangxi Province，Jiangxi Nanchang330046；2.State Key Laboratory of Food Science and Technology，Nanchang University，Jiangxi Nanchang330047；

3.College of Life Science and Food Engineering，Nanchang University，Jiangxi Nanchang330031；

4.Jiangxi Gege

Food Co.，Ltd.，Jiangxi Yingtan335000）

摘要：目的：优化食品中甜蜜素的分析方法。方法：采用程序升温毛细管气相色谱法测定食品中甜蜜素的分析方法。结果：方法灵敏度降低，定量准确。结论：采用程序升温毛细管气相色谱法测定食品中的甜蜜素更为有效、准确。

关键词：甜蜜素；程序升温毛细管气相色谱法

中图分类号：O657.7+1；TS207.3文献标识码：A文章编号：1671-4792（2012）12-0145-03

Ａｂｓｔｒａｃｔ：This paper aims at the optimum analytical method of determining sodium cyclamate in food by gas chromatography.The method：A capillary gas chromatography with programmed column temperature was em-ployed for the determination of sodium cyclamate in food.Result：The method is of low sensitivity and high accu-racy.Conclusion:The method of determining the sodium cyclamate in food by a capillary gas chromatography with programmed column temperature is more effective and accurate.

Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：Sodium Cyclamate；Capillary Gas Chromatography With Programmed Column Temperature 程序升温毛细管气相色谱法测定食品中甜蜜素含量方法研究

１４５

科技广场２０１２．

１２

冰浴中用正己烷提起其低沸点的酯化物，然后分离正己烷层注入色谱仪进行分析[2]。其原理为：在硫酸介质中环己基氨基磺酸钠与亚硝酸反应，生成环己醇亚硝酸酯。

目前，甜蜜素含量检测的国标方法是对样品溶液衍生后用填充柱进行测定，而用填充柱测定所得的色谱图脱尾严重、响应低、定量困难。本文的目的是建立运用程序升温毛细管气相色谱仪法测定食品中甜蜜素含量的分析方法，以降低方法的检出限，提高分辨率及灵敏度，使检验准确可靠。

１材料与方法

1.1试剂与仪器

甜蜜素，正己烷，色谱纯；氯化钠、亚硝酸钠、浓硫酸为分析纯。

安捷伦6890型气相色谱仪（配FID 检测器）；

XH-C 旋涡混合器，金坛市岸头良友实验仪器厂；H-1650台式高速离心机，湖南湘仪实验室仪器开发

有限公司；10μl 安捷伦微量注射器；DXF-600粉碎机。

1.2实验方法1.

2.1样品处理

（1）液体试样：摇匀后直接称取5—10g 样品置于100ml 具塞大试管中备用。

（2）固体试样：糕点、饼干、面包类制成粉状样品；果脯、蜜饯、酱菜类用粉碎机打成粉状或匀浆状；称取2—5g 样品于100ml 具塞大试管中，加入20ml 蒸馏水，摇匀，浸泡1h ，定容至100ml ，过滤取滤液20ml 备用。

1.2.2试样衍生及提取[3]

将装有试样溶液的100ml 具塞大试管置冰浴中，加入5ml 50g/L 亚硝酸钠溶液和5ml

100g/L 硫酸溶液，摇匀，在冰浴中放置30min ，

并经常摇动，然后准确加入10ml 正己烷、5g 氯化钠，摇匀后置旋涡混合器上1min (或振摇100次)，待静止分层后移部分液体于10ml 带塞离心管中进行离心分离。

1.2.3标准系列的配制

取高含量的甜蜜素固体(通常含98%)，用水溶解配成10mg/ml 的标准溶液。取3支，100ml 大试管，加入20ml 蒸馏水，分别加入适量体积的标准液，使标准物质的质量分别达到0.1、1.0、10mg 标准物质，按试样衍生方法衍生，测定。

1.2.4色谱条件

色谱柱：DB -17毛细管柱（30m ×0.250mm

×0.25μm)；色谱条件：进样口温度为200℃，检测

器温度为220℃，色谱柱程序升温至70℃稳定3

min ，以30℃/min 升至170℃，平衡2min ；载气：N 2；

柱内载气流速：1ml/min ；H 2流速：33ml/min ；空气流速：300ml/min ；N 2补偿流速：30ml/min ；分流比：

10∶1；进样量：1μl 。

1.2.5标准曲线的绘制与样品含量的测定

将标准提取液进样1μl 于气相色谱仪中，根据高、中、低浓度三个点的峰面积绘制标准曲线。将试样提取液同样进样1μl ，测得响应值，从标准曲线中查出相应浓度C(mg/ml)。计算公式为：试样中甜蜜素的含量X =C*10/m ，X 单位为g/kg 。

２结果与讨论

2.1谱图

2.2色谱条件的优化

2.2.1毛细管色谱柱初始温度的选择

将高、中、低三个不同浓度标准溶液分别在50、

60、70、80℃四个不同的起初始度进行测定，结果表

图一标准溶液色谱图

１４６