药物血浆半衰期的测定

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图表标题 200
磺胺药浓度(ug/ml)
y = 582x - 53 150 100 50 0 -50 0 0.1 0.2 吸光度 0.3 0.4 3%磺胺药标准曲线 线性 (3%磺胺药标 准曲线)
根据吸光度,线性方程 y=582x-53, 计算浓度,求对数值. (Excel – 常用函数 – log10 – 计算对数值. ) 将给药时间t 与已求得的磺胺药血浆浓度对数值做直线回归, 根据一级消除动力学公式: lgCt=lgCo+ (-K/2.303)t 回归方程的斜率(-K/2.303), Excel – 常用函数 – slope斜率 – 计算得(-K/2.303)= -19.6, 计算K, t1/2=0.693/K, Vd=D/Co, Cl=K*Vd; 已知 t , lgCt, 计算Co, 从而计算Vd, Cl
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三、方法与步骤 1.取试管5只，依次用A1、A2、A3……A5标记，各加入7.5%三氯醋酸2ml 备用。 2.取试管5只，依次用B1，B2，B3……B5标记，各加入草酸钾结晶几粒 (抗凝)。 3.取家兔，称重， 取血方法1： 以乌拉坦(4ml/kg)耳缘静脉注射麻醉，麻醉后将兔背位固定于 手术台上，正中切开颈部皮肤，分离一侧颈总动脉，结扎其远心 端，并在近心端夹上动脉夹，以阻断血流，再将放血导管向心脏 方向插入颈总动脉内，用线打活结固定。 取血方法2：耳缘静脉近心端开始向远心端方向抽血0.5～1ml 4. 耳缘静脉注入3%磺胺嘧啶钠4ml/kg，记录注完时间（准确到分 钟）。 5.给药前、给药后5min、10min、20min、30min，松开动脉夹，放血 约1ml，分别置于B1 、 B2、B3、B4、B5管，迅速摇匀抗凝，记录取 血标本的准确时间。 注意在取血前先要放掉动脉插管内的残血。
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【注意事项】
1. 麻醉药静脉推注速度不宜过快， 2. 颈总动脉分离及插管
3. 给药时间及各取血点均要准确记录，加 样精确，减少误差。
4. 在取血样前，要将残留在动脉套管中的 血液放掉，以免影响实验结果。 5. 离心所得上清液加入亚硝酸钠充分摇匀 后方可加入麝香草酚。
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2.计算机的操作步骤（以Excel2002为例）
将数据输入Excel中，调用其自带的函数，根据 对话框要求操作即可完成运算。 INTERCEPT（known-y’s，known-x’s）求线性回归 拟合线方程的截距。 CORREL（arrayl，array2）返回两组数值的相关 系数。 SLOPE（Known-y’s known- x’s）返回经过给定数 据点的线性回归拟合线方程的斜率。 FORECAST（X，Known-y’s known- x’s）通过一线 性回归拟合线返回一个预测值。
给药后不同时间点的磺胺钠钠浓度
管号
给药时间 光密度值 磺胺钠浓度
磺胺钠对数浓度
1
2
3
4
5
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7.计算
根据一级动力学消除公式 k Ct C0 ekt lg C lg C t 2.303 将给药时间t与已求得的磺胺血浆浓度对数 值lg Ct作直线回归，即可得回归方程的斜率 （- K /2.303）和截距（lgCo） ( X X )(Y Y ) l XY a Y bX b 2 ( X X ) lXX
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橙红色
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【材料器材与药品：试管24只，移液吸管10ml，1只； 1ml，2只；2ml 7只；移液器1支，吸头若干，试管夹， 试管架，离心机，722型分光光度计，手术剪，眼科剪， 止血钳，动脉夹，眼科镊，缝线，药棉，纱布，捆扎 绳，注射器10ml 1支，5ml 1支。5%磺胺嘧啶钠溶液， 7.5%三氯醋酸溶液，0.5%亚硝酸钠溶液，0.5% 麝香草 酚溶液（溶于20％氢氧化钠内），草酸钾结晶，25% 氨基甲酸乙酯溶液，肝素注射液。
t 0
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应用公式t1/2=0.693/K， Vd=D/Co，CL=K· Vd，便可求 得t1/2、Vd和CL。
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1.计算器（Casio fx－180或fx－3600p） 的操作步骤
⑴MODE 2 屏幕显示LR，进入线性回归计算状态； ⑵INV AC消除储存器内的全部数据； ⑶XoDo自变量输入； DATA因变量数据输入； ⑷INV A（截距），INV B（斜率） INV r（相关系 数）； ⑸INV X得期望值。
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动脉取 血约1ml
1.加0.5％亚 硝酸钠0.5ml
2.加0.5%麝香草 酚1ml
准确移 液 100μl
混匀
1500转/分 离心5min
准确移 上清液 1.5ml
525nm测光密度
7.5%三氯醋 酸2ml
C
B
A
偶氮反应
橙红色
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6.然后准确吸取100μl加入相应的各A管, 各 管以1500转/分离心5min，分别取离心后 的上清液1.5ml，加0.5%亚硝酸钠溶液0.5 ml，摇匀，再加0.5%麝香草酚1ml，可见 橙红色反应。以给药前血样作空白对照， 用722型分光光度计于525nm波长下进行 比色，测定各时间点的光密度，在标准曲 线上查得磺胺钠浓度。 C=582D-53
药物血浆浓度及半衰期测定
药理学教研室
【实验目的】
1.以磺胺嘧啶钠为例学习测定药物 半衰期（t1/2）等药动学参数的 基本方法。 2.理解常用药动学参数的临床意义
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【实验原理】
磺胺类药物为对氨基苯磺酰胺类化合物，在酸性溶液中，可与亚硝酸钠 起重氮反应，产生重氮盐。在碱性溶液中，重氮盐可与酚类化合物（麝 香草酚）起偶氮反应，形成橙红色的偶氮化合物。可在525nm波长下进 行比色测定。根据Beer-Lamber定律，浓度与光密度成正比关系。其化学 反应式如下：
分光光度计使用
模式－透射比－开盖调零－关盖100 ％透射率－模式－吸光度－检测 比色杯光面透光