实验十三 硫代巴比妥酸比色法测定山梨酸

班级：分析09310 姓名：陈涛学号：14

实验十三硫代巴比妥酸比色法测定山梨

酸及山梨酸钾

1．原理

利用自样品中提取出来的山梨酸及其盐类，在硫酸及重铬酸钾的氧化作用下产生丙二醛，丙二醛与硫代巴比妥酸作用产生红色化合物，其红色深浅与丙二醛浓度成正比，并于波长530nm处有最大吸收，符合比尔定律，故可用比色法测定，反应如下：（略）

2．试剂。

（1）硫代巴比妥酸溶液：准确称取0.5g 硫代巴比妥酸于100mL容量瓶中，加20mL蒸馏水，然后再加入10mL氢氧化钠溶液（1mol/L），充分摇匀。使之完全溶解后再加入11mL盐酸（1mol/L），用水稀释至刻度。此溶液要在使用时新配制，最好在配制后不超过6h 内使用。

（2）重铬酸钾-硫酸混合液：以0.1mol/L 重铬酸钾和0.15mol/L硫酸以1：1的比例混合

均匀配制备用。

（3）山梨酸钾标准溶液：准确称取250mg 山梨酸钾于250mL容量瓶中，用蒸馏水溶解并稀释至刻度，使之成为1mg/mL的山梨酸钾标准溶液。

（4）山梨酸钾标准使用溶液：准确移取山梨酸钾标准溶液25mL于250mL容量瓶中，稀释至刻度，充分摇匀，使之成为0.1mg/mL的山梨酸钾标准使用溶液。

3．仪器。

(1)721型分光光度计。

(2)组织捣碎机。

（3）10mL比色管。

4．分析步骤。

（1）样品的处理：称取100g样品，加蒸馏水200mL，于组织捣碎机中捣成匀浆。称取此匀浆100g，加蒸馏水200mL继续捣碎1min，称取10g于250mL容量并中定容摇匀，过滤备用。

（2）山梨酸钾标准曲线的绘制：分别吸取0.0、2.0、4.0、6.0、8.0、10.0mL山梨酸钾标准使用溶液于200mL容量瓶中，以蒸馏水定容

（分别相当于0.0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0μg/mL 的山梨酸钾）。再分别吸取 2.0mL于相应的10mL比色管中，加2.0mL重铬酸钾-硫酸溶液，于100℃水浴中加热7min，立即加入2.0mL硫代巴比妥酸溶液，继续加热10min，立即取出迅速用冷水冷却，在分光光度计上以530nm测定吸光度，并绘制标准曲线。

（3）样品的测定：吸取样品处理液2mL 于10mL比色管中，按标准曲线绘制的操作程序，自“加2.0mL重铬酸钾-硫酸溶液”开始依次操作，在分光光计530nm处测定吸光度，从标准曲线中查出相应浓度。

5.实验数据：

试样 吸光度为1.285

浓度C=410*09.5-g/ml

5．结果计算。

22501

⨯⨯=m A X 34.11

2X X =

式中：X 1—样品中山梨酸钾的含量，g/kg ；

X 2--样品中山梨酸的含量，g/kg ； A--试样液中含山梨酸钾的浓度，

mg/mL ；

m —称取匀浆相当于试样的质量，

g ；

2—用于比色时试样溶液的体积，

mL ；

250—样品处理液总体积，mL 。

0047.034.100637.000637.02

1025010*09.5241===⨯⨯=∴-X X

6.结论

样品中山梨酸钾的含量为0.00637g/kg 样品中山梨酸的含量为0.0047g/kg