评估机体免疫水平主要有哪些免疫学指标
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评估机体免疫水平主要有哪些免疫学指标?
这里要分两大类:一是"临床应用学的免疫指标",二是"理论研究型的免疫学指标",而"临床学应用指标"的范围较小,其指标也包括在理论研究型的指标中,即理论研究型不但包括日常医疗应用的指标(临床应用),也包括了理论研究与教学的指标
一,临床应用学的免疫指标:
1-免疫细胞学指标:白细胞,中性粒细胞,淋巴细胞,T淋巴细胞,NK细胞,
2-血液学指标:Ig-G,Ig-M,Ig-E,或"免疫球蛋白"等
3-抗原学指标:
(1)血液免疫学指标:常见有:乙肝两对半中的第一,第三项,
(2)人体各种分泌物中的病原体检查(如淋病双球菌,大便中的寄生虫,大便中的伤寒弧菌的检查,痰中的结核杆菌检查,等等)
二,理论研究学的免疫学指标(以上各类其实也是,但理论研究学中,还有更深入的指标,以下只列以上所说之外的):
1-抗原;即各种微生物的分离,检查,定型;
2-免疫球蛋白:Ig-A,Ig-D,再加上以上临床学免疫指标的各项;
3-补体系统;
4-细胞免疫学指标:
(1)T细胞;
(2)B细胞;
(3)NK细胞;
(4)CD白细胞(以上各种,还有:CD30以上的系列,
5-体液免疫学指标:
(1)以上免疫球蛋白各种;
(2)特异性抗体的滴度;
(3)补体系统的滴度
临床常用免疫学检测:
➢免疫球蛋白检测
➢血清补体检测
➢感染性疾病的免疫学指标
➢肿瘤标志物检测
➢自身免疫性疾病的免疫学指标
➢其他体液免疫指标
➢细胞免疫相关检测
➢免疫球蛋白检测
P440-442
缺乏特异性诊断价值,主要用于机体体液免疫功能状态的评估。
临床检验现状:
➢血清补体检测
P442-443
缺乏特异性诊断意义,主要用于机体体液免疫功能状态的评估。
➢肿瘤标志物检测
P458-462
肿瘤标志物(tumor marker):P458
在肿瘤发生、发展过程中,由肿瘤细胞合成、释放的物质或由机体对肿瘤发生反应而产生的一类物质;与正常组织相比,这些物质在机体内的含量显著增高;检测这些物质可以反映肿瘤的恶变阶段和肿瘤的基因型。
➢自身免疫性疾病的免疫学指标
⇩类风湿因子
(rheumatoid factor, RF)
⇩抗核抗体
(antinuclear antibody, ANA)
⇩组织和细胞抗体
⇩其他体液免疫指标
抗核抗体
⇧抗组蛋白抗体
⇧抗脱氧核糖核蛋白(DNP)抗体
⇧抗双链DNA抗体
⇧抗RNA抗体
⇧抗可提取核抗原(ENA)抗体
⇧抗Sm抗体
⇧抗RNP抗体
⇧抗SS-A(Ro)抗体
⇧抗SS-B(La)抗体
⇧抗Scl-70抗体
⇧抗着丝点抗体
⇧抗PM-1抗体
⇧抗JO-1抗体
⇧抗核仁抗体
组织和细胞抗体
⇧抗线粒体抗体
⇧抗甲状腺球蛋白抗体
⇧抗甲状腺微粒体抗体
⇧抗乙酰胆碱能受体抗体
⇧抗平滑肌抗体
其他体液免疫指标
⇧循环免疫复合物(IC)
⇧冷丙种球蛋白(CG)
⇧C反应蛋白(CRP)
细胞免疫相关检测
⇧T细胞免疫检测
⇧B细胞免疫检测
⇧自然杀伤细胞(NK)免疫检测
⇧细胞因子检测
T细胞免疫检测
⇧T细胞花环形成试验
(ERFT)
⇧T细胞分化抗原测定
⇧T细胞转化试验
B细胞免疫检测
⇧B细胞表面免疫球蛋白测定
⇧红细胞-抗体-补体花环试验
Fc——EA-RFC
补体受体——EAC-RFC
小鼠红细胞受体——M-RFC ⇧B细胞分化抗原测定
NK细胞免疫检测
⇧活性测定
⇧ADCC测定
ELISA包被蛋白质的原理是什么?
包被板上的成分有很强的阴离子吸附功能,包被液的PH为9.6,可以使被包被的蛋白质为碱性,因此可以牢固吸附在包被孔中
酶联免疫吸附ELISA(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA IA)。基础:抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记,加入酶反应的底物后,底物被酶催化成为有色产物,产物的量与标本中受检物质的量直接相关,由此进行定性或定量分析。
酶联免疫吸附剂测定基本原理是:①使抗原或抗体结合到某种固相载体表面,并保持其免疫活性。②使抗原或抗体与某种酶连接成酶标抗原或抗体,这种酶标抗原或抗体既保留其免疫活性,又保留酶的活性。在测定时,把受检标本(测定其中的抗体或抗原)和酶标抗原或抗体按不同的步骤与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与其他物质分开,最后结合在固相载体上的酶量与标本中受检物质的量成一定的比例。加入酶反应的底物后,底物被酶催化变为有色产物,产物的量与标本中受检物质的量直接相关,故可根据颜色反应的深浅刊物定性或定量分析。
将抗原或抗体固定在过程称为包被(coating)。
蛋白质与聚苯乙烯固相载体是通过物理吸附结合的,靠的是蛋白质分子结构上的疏水基团与固相载体表面的疏水基团间的作用。这种物理吸附是非特异性的,受蛋白质的分子量、等电点、浓度等的影响。大分子蛋白质较小分子蛋白质通常含有更多的疏水基团,故更易吸附到固相载体表面。
不易吸附的非蛋白质抗原可用间接包被的抗原经固相抗体的亲和层析作用,包被在固相上的抗原纯度大大提高,因此含杂质较多的抗原也可采用捕获包被法。
亲和素生物素即用亲和素先包被载体,加入生物素化的DNA,这种包被方法均匀、牢固,已扩大应用于各种抗原物质的定量测定。
脂类物质无法与固相载体结合,可将其在有机溶剂(例如乙醇)中溶解后加入ELISA板孔中,开盖置冰箱过夜或冷风吹干,待酒精挥发后,让脂质自然干固在固相表面。
优点:试验的特异性、敏感性均由此得以改善,重复性亦佳。抗原用量少,仅为直接包被的1/10乃至于/100。
包被用抗原:
天然抗原、重组抗原和合成多肽抗原三大类。
合成多肽抗原是抗原决定簇的氨基酸序列人工合成的多肽片段。一般只含有一个抗原决定簇,纯度高,特异性也高,但由于分子量太小,往往难于直接吸附于固相上。借助于偶联物与固相载体的吸附,间接地结合到固相载体表面。
包被用抗体
IgG对聚苯乙烯有强吸附力,其联结发生在Fc段上,抗体结合点暴露于外。
取材于抗血清或含单克隆抗体的培养液.须除去杂抗体后才能用于ELISA,以保证试验的特异性。
包被的条件
pH9.6碳酸盐缓冲液
pH7.2的磷酸盐缓冲液
pH7-8的Tris-HCL缓冲液。
加入包被液后,在4-8℃冰箱中放置过夜,37℃中保温2小时。包被浓度随载体和包被物的性质可有很大的变化,每批材料需通过实验与酶结合物的浓度协调选定。一般蛋白质的包被浓度为10ng/ml-20ug/ml。
半抗原H连接到载体OV A之后免疫机体,机体能否产生针对OV A的抗体,为什么?
答,能够产生针对OVA的Ab。能与对应抗体结合出现抗原-抗体反应、又不能单独激发人或动物体产生抗体的抗原。它只有反应原性,不具免疫原性,又称不完全抗原。大多数多糖和所有的类脂都属于半抗原。如果用化学方法把半抗原与某种纯蛋白的分子(载体)结合,纯蛋白会获得新的免疫原性,并能刺激动物产生相应的抗体。半抗原一旦与纯蛋白结合,就构成该蛋白质的一个抗原簇。一些比一般半抗原分子量小,但有特异结构的化学活性基团物质(如青霉素、磺胺剂等),称为简单半抗原。当简单半抗原进入过敏体质的机体时,能与体内组织蛋白结合,成为完全抗原,这种完全抗原可引起超敏反应。免疫学家们常将二硝基苯、三硝基苯、磷酰胆碱等连接到蛋白质分子上,进行免疫应答机制的研究。半抗原的定义是能够被TCR或BCR识别,但不能独立诱导免疫应答的物质称半抗原。只有免疫原性而不具有反应原性的半抗原不能称之为半抗原。
半抗原-载体效应:
半抗原H本身没有诱导免疫应答的能力。若用OVA免疫小鼠,得到针对OVA的Ab1, 该抗体不能识别H。但是用与OVA偶联的H免疫小鼠,所得到的抗体(Ab2)能够在体外与半抗原特异地结合。在这种情况下H成为B细胞表位的一个部分,所以H具有了你说的反应原性。又因为,结构决定功能。
半抗原是单价的,也就是说,半抗原与对应的抗体分子结合的抗原表位数只有一个。上述例子中,半抗原只被B细胞识别,而B细胞表位具有构象依赖性。半抗原的单价性也就决定了其抗原表位与抗体分子的抗原结合部位在形状上的互补也只有一种形式。所以说不可能有只有免疫原性而不具反应原性这样的半抗原。
哺乳动物(包括人类在内)的免疫系统是否很完善,为什么?
答:人类包括动植物的生存法则是适者生存,漫长的岁月进化造就了生物适应当前环境的要求,哺乳动物的免疫系统是它生存的重要因素,当然该免疫系统较为“完善”,能抵抗大多数病菌侵入和自我生长修复。以人为例做一说明,人体的免疫系统像一支精密的军队,24小时昼夜不停地保护着我们的健康。它是一个了不起的杰作!在任何一秒内,免疫系统都能协调调派不计其数、不同职能的免疫“部队”从事复杂的任务。它不仅时刻保护我们免受外来入侵物的危害,同时也能预防体内细胞突变引发癌症的威胁。如果没有免疫系统的保护,即使是一粒灰尘就足以让人致命。根据医学研究显示,人体百分之九十以上的疾病与免疫系统失调有关。而人体免疫系