细胞生物学实验报告

细胞生物学实验报告

一、细胞形态观察及其大小测量

1.实验结果及分析

（1）细胞形态观察

图1.1 10X40倍镜下肝细胞图1.2 10X40倍镜下血细胞

图1.3 棉花叶横切（栅栏组织细胞）

（2）细胞大小测量

2.思考题

（1）血细胞分为哪几大类？分别描述你看到的不同血细胞的形态，并阐述其功能。绘图。

血细胞分为红细胞、白细胞和血小板。红细胞：主要的功能是运送氧。白细胞：主要扮演了免疫的角色。当病菌侵入人体时，白细胞能穿过毛细血管壁，集中到病菌入侵部位，将病菌包围，吞噬。血小板：止血过程中起着重要作用。血细胞约占血液容积的45%，包括红细胞、白细胞和血小板。在正常生理情况下，血细胞和血小板有一定的形态结构，并有相对稳定的数量。

红细胞呈双凹圆盘状，中央较薄（1.0μm），周缘较厚（2.0μm），故在血涂片标本中呈中央染色较浅、周缘较深。在扫描电镜下，可清楚地显示红细胞这种形态特点。红细胞的这种形态使它具有较大的表面积（约140μm2），从而能最大限度地适应其功能――携O2和CO2。

白细胞为无色有核的球形细胞，体积比红细胞大，能作变形运动，具有防御和免疫功能。

在血涂片中，血小板常呈多角形，聚集成群。血小板中央部分有着蓝紫色的颗粒，称颗粒区；周边部呈均质浅蓝色，称透明区（hyalomere）。电镜下，血小板的膜表面有糖衣，细胞内无核，但有小管系、线粒体、微丝和微管等细胞器，以及血小板颗粒和糖原颗粒等。

（2）任意选择你所看到的动物细胞和植物细胞各一个，绘图并进行适当标注，测量其大小，并比较动植物细胞大小的差异。

就植物叶片的栅栏组织细胞和红细胞而言，栅栏细胞为长方体形，体积较大，紧密排列成栅栏状；红细胞圆饼状，体积较小，具体数值如实验数值所示

（3）在不同的放大倍数下，所测得的细胞大小一致吗？你认为在哪个放大倍数下测定得比较准确？为什么？

测定结果不相同。

由于镜台测微尺与细胞标本是处于同一位置，都要经过物镜和目镜的两次放大成象进入视野，即镜台测微尺随着显微镜总放大倍数的放大而放大，因此从镜台测微尺上得到的读数就是细胞的真实大小，所以用镜台测微尺的已知长度在一定放大倍数下校正目镜测微尺，即可求出目镜测微尺每格所代表的长度，然后移去镜台测微尺，换上待测标本片，用校正好的目镜测微尺在同样放大倍数下测量微生物大小。

但是由于不同显微镜及附件的放大倍数不同，因此校正目镜测微尺必须针对特定的显微镜和附件（特定的物镜、目镜、镜筒长度）进行，而且只能在特定的情况下重复使用，故当更换不同放大倍数的目镜或物镜时，必须重新校正目镜测微尺每一格所代表的长度。

在40倍物镜下看更准确，因为观察的台尺更清晰，可以更精确的读数。

二、PAS反应显示糖原和其他多糖物质

1.实验结果及分析

图2.1.1土豆切片PAS染色（紫红色颗粒）图2.2.1小鼠肝细胞PAS染色（紫色颗粒）

2.思考题

1、为所观察到的土豆切片和鼠肝切片绘图，标注其多糖的位置，并描述这两种细胞的多糖分布特点。

肝脏切片中，多糖位置表示在靠近核的区域，而土豆细胞中多糖在细胞质液泡中。

2、影响PAS反应染色效果的关键步骤是什么？

1.Camey固定液固定；

2.Schiff染色液染色；

3.对分色的控制。

3、如何制作徒手切片？应注意什么才能得到薄而均匀的切片？

需要快速连续地地切下多片薄片，从中选出较好的切片。

三、叶绿体的分离与荧光观察

1.实验结果及分析

图3.1.1叶绿体自发荧光（图中红色小圆点） 图3.1.2叶肉表皮细胞叶绿体自发荧光（图中红色小圆点）

从图中可以看出，叶绿体主要集中于液泡的周围，呈现红色。

2.思考题

（1）描述你所观察到的实验现象，自发荧光和次生荧光的区别？

有些生物体内的物质受激发光照射后，可直接发出荧光（称为自发荧光），如叶绿素的火红色荧光。有的生物材料本身不发荧光，但它吸收荧光染料后同样也能发出荧光（称为间接荧光），如叶绿体吸附吖啶橙后可发橘红色荧光。

（2）叶绿体分离的原理是什么？操作过程中应注意什么？

通过研磨植物叶片使细胞破损，叶绿体释放到提取液中，再通过等渗介质中差速离心去除杂志，再次离心分离出叶绿体沉淀；注意在低温下迅速提取，注意等渗液溶度，离心速度和时间的把握，避免叶绿体破裂。

四、吖啶橙染色观察口腔上皮荧光

1.实验结果及分析

从图3.1.1中可以看出，菠菜叶片表皮细胞中的叶绿体数目比较少，而在气孔细胞中的叶绿体数目比较多。从图3.1.2中可以看到，口腔上皮细胞的细胞质发出红色荧光，而细胞核发出的荧光是绿

图4.1.1菠菜叶片表皮细胞叶绿体吖啶橙染色（图中红色小圆点为叶绿体，亮黄色纺锤体状的为气孔）

图4.1.2口腔上皮细胞荧光染色（绿

色为细胞核）

色的。

五、植物细胞骨架的光学显微镜观察

1.实验结果及分析

图 5.1.1洋葱内表皮细胞骨架考马斯亮蓝

R250染色（蓝色的丝状结构为细胞骨架）

这个标本中的骨架分布得比较全面，几乎充斥着整个细胞内部。

2.思考题

（1）绘出洋葱细胞的骨架网络分布。

（2）根据M-缓冲液的成分，分析其作用。

咪唑：稳定PH值，缓冲作用；KCL：提供离子，对骨架起聚合作用；MgCl2:提供离子，对骨架起聚合作用。EGTA：螯合Ca离子Ca离子对聚合不利；EDTA：螯合Ca离子Ca离子对聚合不利；巯基乙醇：起还原作用，稳定骨架结构。

（3）通过实验过程，推测你所观察到的细胞骨架属于胞质骨架中的哪种类型，为什么？

推测洋葱的细胞骨架属于中间纤维。

六、PEG法诱导细胞融合

1.实验结果及分析