尿液干化学和沉渣
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③葡萄糖 是在过氧化物酶的作用
下生产葡萄糖酸和过氧化氢,过氧 化氢在过氧化物酶作用下释放新生 态氧[O] , [O] 氧化 KI 发生颜色改变。
④酮体 尿酮体包括乙酰乙酸、丙酮、 β-羟丁酸三种。尿中乙酰乙酸在碱性 条件下与亚硝基铁氰化钠反应,不与 丙酮或β-羟丁酸反应。
⑤白细胞 白细胞试块主要与粒细 胞中的酯酶反应,而单核细胞、淋 巴细胞中无酯酶,故需结合显微镜 检查。
(二)全自动尿有形成分分析仪
• 其设计思路与显微镜检测原理不同,应用了流 式细胞术和电阻抗分析原理。下面以 Sysmex UF系列 为例作简要介绍:
1.仪器组成:
主要包括光学检测系统、液压系统、 电阻抗检测系统等
2.尿液有形成分染色:
其染料成分主要有 9-氮杂菲 : 主要染色白细胞的核酸成分,在480nm光 激发时产生610nm橙黄色光波,用于区别有核与 无核细胞(白、红细胞,病理管型与透明管型 等). 羧花氰 : 其穿透能力强,主要与细胞膜(红细胞膜、 核膜线粒体等)的脂质成分发生非特异性结合, 用于区别WBC体积大小(如上皮细胞与白细胞的 区别)。
(一)影像式尿有形成分分析仪:其原理与人工 显微镜镜检原理基本相似,都是直观地观察有 形成分的形态,在相差显微镜下数码摄影系统 对每个层流经过的标本摄像,计算机进行图像 分析,提取有形成分的大小、对比度、质地、 形状特征,运用形态识别软件自动识别和分类 尿液有形成分。 与普通显微镜法相比,具有 无污染、定量、简便等优点。但对杂质多的标 本可导致图像模糊难以准确辨认,假阳性率高; 有些结晶和真菌易被误认为红细胞,往往需要 依靠传统显微镜检查。
尿液干化学与沉渣
一、尿液检验目的
尿液检验是临床上最常用的重要检 测项目之一,主要用于泌尿生殖系统疾 病、肝胆疾病、代谢性疾病(如糖尿病 等)及其他系统疾病的诊断和鉴别诊断、 治疗监测及健康普查。
• 二、尿干化学分析仪
化学分析仪又称尿液分析仪(urine analyzer),是用干化学方法检测尿中某些 成分,有半自动和全自动两大类。
3.尿液有形成分检测:
定量稀释的尿标本经稀释、加温、染色后 进入鞘液流动池,单个纵列的有形成分经氩激 光光束照射,产生不同程度的荧光强度(荧光 强度与有形成分和染料的结合程度成正比), 结合前向散射光和侧向散射光的信号分析尿中 有形成分。综合分析做出红细胞、白细胞、细 菌、管型等的散点图及定量报告,最后得到每 份尿标本的直方图和散点图。
尿液分析仪工作原理
• 分析仪采用专用的试纸带,通过测定 试带颜色变化,求得尿液中各种成份 的浓度。
尿液分析仪一般采用双波长法测定试剂块的颜色 变化。 • 测定波长:它是被测试剂块的敏感特征波长; • 参比波长:是被测试剂块不敏感的波长,用于消 除背景光和其它杂散光的影响。 • 各种试剂块都有相应的测定波长,其NIT、KET、 BIL、URO原的测定波长为550nm,pH、GLU、 PRO、VitC、BLD的测定波长为620nm。各试剂 块所选用的参考波长为720nm。
1. 尿液分析仪的试剂带
试剂带采用多层膜结构,第一层尼龙膜起保 护作用,防止大分子物质对反应的污染;第二 层绒制层,包括碘酸盐层和试剂层,碘酸盐层 可破坏维生素C等干扰物质,试剂层主要与尿 液中所测定物质发生化学反应,产生颜色变化; 第三层是吸水层,可使尿液均匀快速地浸入, 并能抑制尿液流到相邻反应区;最后一层选取 尿液不浸润的塑料片作为支持体。
主要不足: ①不能替代病理性尿标本检查, 对白细胞、管型、结晶的检测属 于间接检测。 不利判断红细胞的形态特征。
②蛋白质 在PH3.2条件下,四溴酚蓝 产生的阴离子与带阳离子的蛋白质结合 使颜色发生改变,这种现象称指示剂蛋 白误差法。 测尿蛋白以清蛋白为主,对球蛋白、血 红蛋白、本周蛋白和黏蛋白不够灵敏, 故“阴性”不能排除这些蛋白的存在。 对于高缓冲的碱性尿可能得到假阳性结 果。如果尿液被季铵盐类化合物及某些 防腐剂或清洗剂污染也会导致假阳性。
4.方法学评价:
全自动尿有形成分分析仪较显微镜检 查有明显优势:①不需离心,可自动进样。 ②标本用量少,快速、高效。 ③方法程序 统一,易于标准化和质量控制。
Sysmex UF系列 尿沉渣分析仪
目前在中国的仪器保有数量大约有800台左右,并且 随着尿常规定量检查的不断的普及,数量仍呈一个上升的 趋势。UF项目具有检测速度快、结果准确、重复性好、 自动进样、自动混均、自动化程度高等优点,但是该项目 的检测成本较高,原装试剂的每人份的检测成本大约平均 在8元钱,仪器的平均购置成本大约在50万左右。按照五 年的使用周期,一年的折旧费是十万元,若以一年4万个 标本计算折旧成本为每一个标本2.5元。该项目收费全国 平均水平为15元—20元,所以从经济利益角度考虑,都 认为该项目经济效益并不理想。国产试剂的市场供货价格 要比原装试剂低30%左右,从成本的角度值得考虑。
⑥ Vit C
该项目并非用于人体内 Vit C 的定量,而是用于判断试带法 其它检测项目的结果是否可靠,高 浓度的Vit C对葡萄糖、胆红素、血、 亚硝酸盐会产生严重的负干扰。
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
三、尿液有形成分分析仪检查
传统的尿有形成分检查是在显微镜下检查离心 沉淀后的尿有形成分,费时费力、误差大、重复性 差、不能定量、受人为因素影响、无统一质控物、 难以进行室内质控。1988年,美国国际遥控影响系 统有限公司研制生产了世界上第一台高速摄影机式 尿有形成分自动分析仪。随着现代科技的进步,目 前,有形成分分析仪主要有2大类:①尿有形成分直 接镜检影像分析仪②流式细胞术和电阻抗检测相结 合的全自动尿有形成分分析仪。
2. 仪器结构与组成
• 尿液分析仪一般由机械系统、光学 系统、电路系统三部分组成。
(二)检测参数:
• 目前常用的检测参数包括酸碱度、蛋白 质、葡萄糖、酮体、胆红素、尿胆原、 红细胞或血红蛋白(或隐血)、亚硝酸 盐、白细胞、比重、维生素C等(下图)
方法学评价
• 主要优点:标本用料少;速度快、项 目多;重复性好、准确性高;适于大 批量标本筛检。