第5章 内膜系统与蛋白质运输

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问题
What is endomembrane system?
第三节 内膜系统与蛋白质运输
第一 第二 第三 第四 第五
内质网 高尔基复合体
溶酶体 蛋白质的分选与运输
内膜系统与医学
第一节
内质网(Endoplasmic reticulum)
光面内质网
形态结构 与类型
粗面内质网 内质网 光面内质网的功能
糖链长度
5~25个糖残基
1~6个糖残基(ABO血型 抗原较长)
糖基化的主要作用
有利于蛋白质在成熟过程中折叠形成正确的构象,增加 蛋白质的稳定性; 对蛋白质具有保护作用,使其能够抵抗消化酶的作用; 有利于高尔基复合体对蛋白质进行分选和包装; 赋予蛋白质传导信号的功能。
蛋白质的水解加工
信号序列
二次跨膜蛋白的形成
进入内质网腔蛋白的命运
已转移到内质网腔内的多肽链经进一步折叠、组装和 修饰后,最终命运不同 既取决于多肽链中氨基酸序列中所包含的定位信息
也取决于多肽链的修饰状态。
1. 内质网驻留蛋白(ER resident protein)
其羧基末端常有一个由4个氨基酸组成的驻留信号序列: 动物中多为Lys-Asp-Glu-Leu (KDEL);
进入糙面内质网腔中的许多蛋白质,大都要进行修 饰加工,如分泌蛋白的糖基化等。 在内质网上合成的蛋白质,大部分为糖蛋白,而在 细胞质溶质中合成的可溶性蛋白质则不加接糖基。 糖基化作用对于指导大分子运送到细胞内的其它部 位也有重要意义。
3. 分泌蛋白的合成与运输
分泌蛋白的Protein_Secretion(CHS).rm合成与运输
膜结合核糖体合成分泌蛋白、膜蛋白、内质 网中可溶性驻留蛋白,溶酶体中的酶类。
游离核糖体合成胞质溶质蛋白、核定位蛋白、 半自主性细胞器组成蛋白,过氧化物酶体中 的酶类。
核 糖 体 的 蛋 白 质 合 成 与 去 向
特 定 序 列
protein_sorting
游离核糖体合成蛋白质的去向
翻译后转运-----游离核糖体,前导肽
通道关闭。
信号学说
mRNA
AP
A
信号识别颗粒 (SRP)
核糖体 信号肽
tRNA
SRP受体 细胞质
核糖体结合蛋白 内质网腔
Signal hypothesis
信号学说 (signal theory)要点
1、信号肽(由信号密码子编码) 2、信号识别颗粒 / 信号识别颗粒受体 3、核糖体受体(核糖体亲和蛋白) 4、蛋白质转运通道 / 信号肽引导新生肽链穿过通道 5、信号肽酶(合成结束后切除信号肽)
酵母中则为His-Asp-Glu-Leu (HDEL);
植物中序列不固定。
内质网膜上存在有驻留信号序列(KDEL)的受体,可特 异性识别KDEL,将其浓缩后出芽,以胞内膜泡形式沿微管 运往Golgi复合体进行加工修饰,尔后再反运回rER。
KDEL信号及其受体 维持ER蛋白的稳定
2. 新生肽链在糙面内质网腔中的修饰加工
以核为中心向四周铺展。
内质网与核膜的关系
与核膜连通一气
类型
粗面内质网(rER) 多呈大的扁平囊状; 主要功能是合成分泌蛋白、多种 膜蛋白和酶蛋白。 光面内质网(sER)
粗面内质网
多为小管状或小的圆形囊泡 ;
参与脂类、类固醇激素的合成、 肝细胞的解毒作用、糖原的代谢
光面内质网
和肌肉收缩的调节等。
◆合成始于游离核糖体; ◆N端信号序列靠自由碰撞与内质网膜接触, 然后插入内质网的膜; ◆蛋白质以袢环形式穿过内质网的膜; ◆蛋白的存在方式:
●若信号序列被信号肽酶切除:完全进入腔 ●若是停止转移信号: 膜蛋白
信号肽的特性
◆指导分泌性蛋白在粗面内质网上合成 ◆序列特征
15-35个氨基酸残基,其中含有4-12个疏水残基
二、 高尔基体的功能
蛋白质的糖基化
N-连接与O-连接糖蛋白的主要区别
特 征 N-连接糖蛋白 O-连接糖蛋白
糖基化发生部位
糖基化合成方式 连接基团
粗面内质网
合成好的寡糖链一次 性连接 -NH2
高尔基复合体
单个糖残基逐个添加 -OH 丝氨酸、苏氨酸、羟赖 氨酸或羟脯氨酸 半乳糖 N-乙酰半乳糖
与糖链结合的氨基 天冬酰胺 酸残基 形成的第一个糖基 N-乙酰葡萄糖胺
参与类固醇激素的合成
解毒作用: 与药物脱毒相关的氧化酶
Ca2+的调节作用
医学应用
许多成瘾药物和嗜好品如巴比妥类、吸毒、 肝细胞 sER 嗜酒等,可导致肝细胞光面内质网的增生, 长期服用口服避孕药、安眠药、抗糖尿病药 等也能导致同样后果。
粗面内质网的功能
◆ 蛋白质合成
◆ 蛋白质的修饰和加工
动物细胞中的过氧化物酶体
返回目录
一、过氧化物酶体的结构以及所含酶类 结构:与初级溶酶体类似
所含酶类:主要有三种,其中过氧化氢酶是标志酶
RNA分子
信号肽 结合位点
SRP
GTPase 和 SRP 受 体结合位点
信号识别颗粒(SRP)的组成
20世纪90年代初,Blobel又证明在rER膜 上存在允许多肽链穿过的蛋白质通道
当带有新生多肽链的核糖体结合到 内质网膜时,膜上的蛋白质通道开放, 信号肽引导新生肽链穿过这一通道;蛋 白质转移完成,核糖体从膜上移走之后,
Transport of a growing protein across the membrane of the endoplasmic reticulum
在粗面内质网上进行的蛋白质N-连接糖基化
跨膜驻留蛋白的插入与转移
终止转移信号与单次跨膜蛋白的形成
内 在 信 号 序 列 与 单 次 跨 膜 蛋 白 的 形 成
顺面高尔 基网络
顺面
运输 小泡
蛋白质的糖基化、合成糖脂 和多糖
顺面膜囊 中间膜囊 反面膜囊 反面高尔 基网络
体积较大的分泌泡, 进行蛋白质的分选功能
分泌泡
反面
化学组成
蛋白质 : 60% 含量低于内质网膜,高于细胞膜 含有多种酶类 标志性酶——糖基转移酶 脂 类 :40% 卵磷脂介于内质网膜与细胞膜之间
参与脂类的合成与转运
除线粒体特有的两种磷脂外,内质网能合成细胞所需的 几乎全部脂类。
ER 膜
在内质网上合成的磷脂可向其他膜转运,以维持内质 网膜的平衡。
内质网膜
出芽 膜泡
(A) A:通过出芽和小泡运输将内质网上合
成的脂转运到其他内膜系统的膜上包
括细胞核膜;
内质网膜
线粒体膜等
B:通过磷脂转运蛋白将内质网上合成 (B)
指导蛋白质定位运转的信号序列
前导肽与信号肽
◆前导肽(leading peptide):游离核糖体
◆信号肽(signal peptide):膜结合核糖体
或统一:Signal sequence
粗面内质网的功能
◆ 信号肽与蛋白质合成
早期信号假说(signal hypothesis)
1971,Blobel等正式提出信号假说,要点是:
膜或其它细胞器的膜成分。(膜蛋白)
可溶性蛋白:释放到内质网腔,除一小部分存留于内质
网腔中外,大部分都要通过膜腔外运,进入其它细胞器
腔或排到细胞外。如血浆蛋白和一些蛋白酶原等(分泌 蛋白和驻留蛋白)。
跨膜蛋白的定向:跨膜信号
◆单次跨膜蛋白
内部信号序列与膜蛋白定位
二次与多次跨膜蛋白
二次跨膜:两个跨膜的疏水区,含有一个内含信号序列 和一个停止转移信号。 多次跨膜:多个起始跨膜信号与多个停止转移信号。
功 能
粗面内质网的功能
一、内质网的形态结构与化学组成
形态结构
内质网是由一层单位膜所形 成的扁囊状(ER lamina)、 泡状(ER vesicle)和管状 (ER tubule)结构,并形成 一个连续的网膜系统。 内质网膜与细胞核的外核膜
烟草细胞中的内质网
哺乳动物细胞中内质网
相连,内质网腔与核膜腔相通。
按形成过程、功能状态划分 内体性:由高尔基体芽生的运输小泡和内体合并而成。 吞噬性:内体性溶酶体+将被水解的各种吞噬底物融合形成
三、溶酶体的功能
对吞入物质的消化作用——吞噬作用
清除细胞内衰老的生物大分子和细胞器——自噬作用
自溶作用
顶体
溶酶体酶
四、溶酶体的发生
第四节 过氧化物酶体
过氧化物酶体,又称微体(microbody),是由单层膜 围绕的、内含一种或几种氧化酶类的细胞器
◆位置: ●N-端突出的一段肽 ●内含信号肽。
20世纪80年代初,发现了信号识别颗粒及其受体。 ◆指导分泌蛋白在粗面内质网上合成,需要其它因子的
协助:
●信号识别颗粒(signal recognition particle,SRP)
●信号识别颗粒的受体(又称停泊蛋白,
docking protein,DP)—— 位于ER膜上 ◆过程: 信号肽→信号识别颗粒→信号识别颗粒的受 体→合成多肽链
质膜、高尔基复合体的膜和内质网膜脂类及其含量对比 膜的类型 脂类及其含量(%)
总脂 磷脂酰 磷脂酰 磷脂酰 神经鞘 胆固 含量 胆碱 乙醇胺 丝氨酸 磷脂 醇 40 32.0 34.4 4.6 19.2 0.51 质膜 31.4 36.5 4.7 14.2 0.47 高尔基复合体 45 61 47.8 36.8 5.6 3.4 0.12 内质网
G. Blobel因此项创见而荣获1999年诺贝尔奖!
信号假说 (signal hypothesis)
信号学说 (signal theory)
rER合成蛋白的定位
在 rER膜上核糖体合成的蛋白质有两种类型:即跨膜 蛋白(transmembrane protein)和可溶性蛋白。
跨膜蛋白:插入膜中成为膜蛋白,多数随膜流转变成质
二、溶酶体类型
primary lysosome 仅含有水解酶类,但无作用底物; 酶处于非活性状态。
secondary lysosome
含有水解酶和相应的底物; 根据所消化的物质来源不同,可分为 自噬性溶酶体和异噬性溶酶体。
底物是内源性的, 即细胞内蜕变、破 损的某些细胞器或 局部细胞质.
底物是外源性的,即 细胞摄入的胞外物质. 如细菌、红细胞和糖 原颗粒等.
的脂转运到线粒体、叶绿体和过氧化
物酶体的膜中。
糖原分解与游离葡萄糖释放
无法通过膜
控制糖向血液 中释放
解毒作用:
使外源性有害物质(如药物)失活的作用。
服用大量药物→与解毒有关的酶活性大量增加→sER增生
sER中含有一些酶:与外源性物质结合 → 使其氧化 → 失活 ! 细胞色素P-450:→药物羟基化→失活→尿液
三、 粗面内质网的功能
粗面内质网上合成蛋白质的种类
分泌性蛋白: 酶、多肽类激素等
粗面内质网上
合成的蛋白质
驻留蛋白:溶酶体中的酸性蛋白 内质网 高尔基体 固有的蛋白 胞内体 膜蛋白:细胞膜、内质网膜、 高尔基体膜、 溶酶体膜
蛋白质在粗面内质网合成过程

核糖体由信号肽引导结合于内质网膜上 核糖体合成的多肽链经膜穿入内质网腔 分子伴侣在内质网腔内对蛋白质进行折叠 新合成的蛋白质在内质网腔内进行糖基化(N-连接) 内质网合成的蛋白质经高尔基体分泌出细胞
细胞核
溶酶体
核周腔
高尔基 复合体
核糖体 sER sER rER rER 细胞质
化学组成
内质网膜由脂类和蛋白质组成,其比例大约为1:2。 内质网膜所含的脂类中,磷脂含量最为丰富。
内质网膜上富含参与糖代谢、脂代谢、蛋白质加工、
药物及其他有毒物质解毒相关的酶类。
标志酶是葡萄糖-6-磷酸酶。
二、 光面内质网的功能
内部信号序列与膜蛋白定位
Bip与未折叠的 疏水片段结合
分子伴侣是内质网腔内
Bip 在 ER 腔 中 的 作 用
Bip
的驻留蛋白,它们能够
Bip
识别正在合成的或已经 部分折叠的多肽,并与 之结合,协助它们进行 正确的折叠组装和转运,
ATP水解释放Bip 与第二个 亚基结合
但其本身并不参与最终 产物的形成,只起到陪
伴的作用,故得名“分
子伴侣”(molecular chaperone)。
折叠的寡 聚体蛋白
第二节
高尔基复合体 (Golgi complex)
一、 高尔基体的形态结构与化学组成 形态结构
具有极性的膜性
细胞器
由扁平囊泡、小
泡、大泡构成
可分为3个区室
由粗面内质网芽生的运输小 泡;筛选由内质网合成的蛋 白和脂类,并将大部分转入 扁囊去,少部分返回内质网。
前胰岛素原
胰岛素分子
Fra Baidu bibliotek
胰岛素原
的加工成熟 和运输
胰岛素
蛋白质的分选
第三节
溶酶体(lysosome)
一、溶酶体的形态结构与化学组成
形态结构
球形、颗粒状的膜性细胞
器,形态、大小不一。
化学组成 含有多种酸性水解酶 标志酶:酸性磷酸酶 膜蛋白高度糖基化 内部酸性环境靠质子 泵维持
核酸酶 蛋白酶 糖苷酶 脂酶 磷酸酶 硫酸酯酶 磷脂酶
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