高中生物 观察类实验 实验报告集

七、 其他
其他材料：口腔上皮细胞 主要步骤 1.取材 ① 滴： 在洁净的载玻片上滴一滴质量分数为 0.9%的 NaCl 溶液； ② 刮： 用消毒牙签在口腔内侧壁上轻轻地刮几下； ③ 涂： 将牙签上的碎屑涂抹在载玻片的生理盐水中； ④ 烘： 将涂有口腔上皮细胞的载玻片在酒精灯的火焰上烘干。 2.水解 ① 解：将烘干的载玻片放入装有 30ml 质量分数为 8%的盐酸的小烧杯中，进行材料的水解； ② 保： 将小烧杯放入装有 30℃温水的大烧杯中保温 5 分钟。 3.冲洗涂片 ① 冲： 用缓缓的蒸馏水冲洗载玻片 10 秒钟； ② 吸： 用吸水纸吸去载玻片上的水分。 4.染色 ① 染：用 2 滴吡罗红甲基绿混合染色剂滴在载玻片上，染色 5 分钟； ② 吸： 吸去多余染色剂； ③ 盖： 盖上盖玻片。 5.观察 ① 低： 在低倍物镜下，寻找染色均匀，色泽浅的区域，移至视野中央，将物像调节清晰； ② 高： 转到高倍物镜，调节细准焦螺旋，观察细胞核和细胞质的染色情况。
台微尺的格数 ───────×10=目微尺每一小格的长度（μ m） 目微尺的格数
二、 实验目的：
1. 加深对显微镜各部分及其功能的识别，熟练掌握显微镜的操作方法。
2. 学会使用显微目微尺测定细胞的大小。
三、 实验材料及器材： 1. 材料：蚕豆叶下表皮永久装片
2. 器材：显微镜、擦镜纸、纱布、显微镜目镜测微尺、物镜测微尺。
水绵：大量分布于池塘、沟渠、河流等地方。 颤藻：水沟、湿地、树皮、墙壁以及温泉中 皆可发现。生
长不受季节变化的影响，一年四季都可以采到。 革兰氏碘液：碘与碘化钾，蒸馏水。用于贮存蛋白质的鉴定。
四、 实验操作步骤及要点
A.肉眼观察培养皿内的颤藻和水绵：主要观察其形态和行为特征。
B. 制作临时装片：取一滴清水于载玻片上，用 吸管吸取颤藻（用解剖针挑取少量水绵）于载玻 片上，盖上盖玻片，并吸去多余水分。 C. 显微镜观察比较:比较二者的细胞大小、形态、 色素颜色。
三、 材料器具
材料：蟾蜍 试剂：95%乙醇，0.2mol/l 醋酸缓 液（ph4.8），甲基绿-派洛宁染色液。 器具：注射器、载玻片、盖玻片、显 微镜、染色缸。
材料：可用鸡血、人的口腔上皮细胞，洋葱表皮细胞， 根尖细胞，蛙的血细胞，果肉细胞。 试剂：吡罗红也称派洛宁
试剂配制： 1. 0.2mol/l 醋酸缓液。A 液：2ml 冰醋酸加蒸馏水至 100ml；B 液：3 水醋酸钠 2.72g 溶于
核酸的重要化学性质之一是呈酸性，故可与碱性染料发生亲和反应而显色，使其在 细胞中原位显示出来，由于 DNA 和 RNA 分子聚合程度不同，分别与不同的碱性染料具 有亲和力，从而显示出两种核酸分子在细胞中的分布。
非哺乳类脊椎动物血红细胞具有细胞核，适于本实验的观察要求。
二、 实验目的
a.知识目标：巩固对细胞结构的认识，了解 DNA 和 RNA 在细胞中的分布； b.能力目标：学会血涂片的制作及观察细胞的技术； c.情感目标：能认识到细胞结构的精妙，体会生命的精致；
显微镜测微尺常识
台微尺：台微尺是长 1 毫米，分成 100 小格，每小格为 10 微米，标尺的外围有一黑色的小 环，以便在显微镜下寻找标尺位置，标尺的圆环上复有一圆形盖玻片以作保护。
目微尺：分为线性目微尺和网状目微尺。线性目微尺是一块比目镜筒内径稍小的有标尺的圆 形玻璃片，标尺长 10 毫米、分为 100 格（10：100）。
被染成红色。
五、 注意事项及建议
1. 在用乙醇分色和固定的两过程中，每一个小组可将玻片统一放在倒有酒精的烧杯中进行 操作。
2. 配制溶液时用醋酸钠或者碳酸氢钠，其最后的染色效果都不错，均可看到明显的现象。 3. 染色时间把握好。95%酒精分色时间不宜过长。
六、 思考
1、 本实验的染色机制 2、 可否分别用甲基绿和派洛宁进行染色观察？ 3、 95%酒精分色的原理是什么？
例如：将野外采集的水绵置于室温中培养 1-2 天， 将水绵取出置于敞口容器中，加入适量水将其淹没，放 入冰箱中使其凝结成冰块。数日后取出，室温中自然融 化，在室温下光照处培养。
思考：冰冻水绵的目的？ 猜想：制造逆境？
实验四：DNA 和 RND 的观察
一、 实验分析
本实验集血涂片制作和组织化学染色为一体的实验。以观察 DNA、RNA 在细胞核 和细胞质中的分布为载体，使学生回顾细胞的结构，学习新的细胞观察技术。
校正的方法是将目微尺放入目镜内, （注意有刻度的面朝下（避免标尺数字读起来是反的）） 插入境筒,必要时转动目镜上透镜,至能清楚地看到标尺为止,再将台微尺放在镜台上,用低倍镜找 到台微尺的刻度并适当调焦到能同时看清目微尺和台微尺的刻度.转动目镜使两种标尺相互平行. 再移动台微尺,使位于目微尺的稍下方,并使两种标尺的一端刻线互相对齐并重叠,然后观察并记 录台微尺的另一端与目微尺另一端那一根刻度对其并重叠,数一数两者对其后各自的个数并计算。
移至视野中央，换高倍物镜，用目镜测微尺精确地测量该细胞的长度
和宽度。再乘以每个目微尺每一小格的长度。
五、 实验结果
1. 保卫细胞和气孔图如下所示
2. 保卫细胞的大小 六、 实验分析与讨论
注意事项 a.正确放置目镜测微尺，取下目镜时防止镜片脱落掉下 b.放置目镜测微尺和物镜测微尺时注意正面朝上 c.应在相同的放大倍数下利用相同的每小格长度进行测量计算 d.测量长度和宽度时应转动目镜调整方向 e.观察时应先降下物镜，在慢慢提高，防止镜头与玻片或者试剂碰撞
二、 实验目的 知识目标：能认识颤藻和水绵的形态学特征；比较原核和真核细胞的异同.； 能力目标：学会制作临时装片；掌握引流法染色；熟悉显微镜的操作； 情感目标：养成善于思考，善于发现的习惯；
三、 材料器具 材料：颤藻、水绵 试剂：碘液、蒸馏水 器具：显微镜、载玻片、 盖玻片、吸水纸、 烧杯、镊子、 解剖针、培养皿
染色前 大小
色素分布
有无核
染色后
可明显显示的结构及特征
五、 注意事项 a.取水绵和颤藻时要用镊子取尽量少量的样品。 b.在制作水封片时要控制水量，如盖玻片浮起则需用吸水纸吸去多余水分。 c.使用吸水纸吸水或引流时尽量靠在离样品较远的一侧吸水。 d. 染色时不要把染液滴到盖玻片上，也不宜过多，一至二滴即可。 e.引流时不要让吸水纸压到盖玻片，引流时间不宜过长，防止吸干水分。 f.染色完成后吸走多余染液，防止盖玻片浮起。
四、 实验过程： 1. 蚕豆叶下表皮细胞形态结构观察 （1） 低倍镜观察 将蚕豆叶下表皮永久装片置于载玻台上，转换转换器，使用低倍镜对准透 光孔，调节粗调节器，使物像达到最清晰，观察不规则形的蚕豆叶表皮细 胞、肾形的保卫细胞及成对保卫细胞围成的气孔。 （2） 高倍镜观察 在低倍镜视野中，将需要进一步放大观察的物像部位移至视野正中心，然 后转动转换器，使高倍镜到位（注意：转动时，两眼须从显微镜侧面注视， 若发现镜头有可能与玻片相碰、应检查其原因井排除之）。注视目镜观察视 野并微微上下转动细调节器，直到物像清晰。注意观察蚕豆叶表皮细胞、 保卫细胞的形态结构特点 2. 保卫细胞大小的测量 （1） 显微测微尺的使用 a) 将目镜自镜筒中取出，旋下接目透镜； b) 将目微尺有刻度的一面向下放在目镜中的视场光阑上； c) 旋上接目透镜，将目镜放回镜筒上，即可在目镜中看清目微尺； d) .将台微尺置于载物台上，使刻度面朝上。将台微尺移至视野正中 按照正确使用低、高倍物镜的方法，调焦至能看清台微尺上的刻度； e) .转动目镜和移动台微尺，使二尺平行，再使二尺左边的一刻线重合，然 后自左向右找出二尺另一次重合的刻线； f) 分别记录下二条重合刻线间台微尺和目微尺的格数，按下列公式计算目 微尺每一小格的长度 台微尺的格数 目微尺每一小格的长度（μ m）= ───────×10 目微尺的格数 g) 取下台微尺，换上需要测量的（玻片）标本，即可用目微尺进行标本测 量。通过移动标本或转动目镜，测出细胞或细胞器所占目微尺的格数， 将此结果乘以每小格所代表 的长度，即可求出单个细胞的大小。 （2） 保卫细胞大小的测量 蚕豆叶下表皮装片放置于载物台上，在低倍镜下将欲测量的一个保卫细胞
2. 图片晾干：血涂片干燥后放入 70%乙醇溶液中固定 10min，取出晾干。 3. 染色：滴染色液于血膜上，染色 15min。 4. 蒸馏水冲洗。 5. 脱色：放入 95%乙醇溶液分色 0.5~2min，晾干，封片。 6. 显微镜观察：观察血细胞，细胞核因含 DNA 被染成绿色，细胞质及核仁因含 RNA
气孔常识
叶片的上表面会受到阳光直射，水分散失比较快，即使分布有气孔也容易处于关闭的状态。
一、 实验分析
实验三：颤藻和水绵细胞的比较观察
水绵属于绿藻，真核生物，具细胞核。由一系列圆柱状细胞构成的丝状体，细胞内 具一条或几条螺旋状盘绕的叶绿体，具球形细胞核，能被革兰氏碘液染成棕黄色。
颤藻属于蓝藻，原核生物。由一系列盘状细胞构成的细丝状结构，细胞中央透明， 周围呈蓝绿色（色素），加革兰氏碘液后，无染色较深、形状固定的结构。
1、肉眼比较结果： 颤藻：可左右颤动，逐渐移到水面并沿壁
滑行，可见培养皿壁上附着一层纯 净颤藻。 水绵：绿色丝团，具滑腻感，丝条较粗
D. 引流法染Байду номын сангаас：盖玻片一侧加碘液，对侧用吸
水纸引流，使碘液进入装片染色。
E.显微镜观察比较：主要观察其有无染色较深，形状固定的结构。
2.细胞形态比较
样品
颤藻 水绵
形态
六、 需解决的问题 1、 碘液也可以将蛋白质染成黄色，那么为什么我们观察时观察不到？ 2、 革兰氏碘液和甲基绿两种染液让学生自主探究哪种染液的效果更好，并分析其原因。 3、 具两条叶绿体的水绵的螺旋方向？ 4、 相连水绵细胞的叶绿体螺旋方向有什么关系？叶绿体与细胞上下壁是否相连？
附： 图片：
2、拓展实验 （1）水绵细胞内淀粉核的观察 经碘液染色后，叶绿体上有一系列相隔的被染上蓝紫色的小颗粒。 （2）水绵接合生殖的观察 接合生殖为其有性生殖方式。梯形接合（两条或多条藻丝间。常见）、侧面接合（同 条藻丝相邻细胞）等。自然情况下接合发生于春季及秋季。接合可通过诱导产生。
100ml 蒸馏水中。使用时按体积 A：B=2:3 混合。 2. 甲基绿-派洛宁染色液。A 液：2g 甲基绿加入 0.2mol/l 醋酸缓冲液至 100ml。B 液：1g
派洛宁加醋酸缓冲液至 100ml。使用时按体积比 A：B=5:2 混合。
四、 实验操作步骤及要点
1. 取材和涂片 毁髓法处死蟾蜍。暴露心脏，用少许肝素（抗凝血）湿润注射器，从心脏静脉窦或 主动脉取血，滴于干净的载玻片一端，用如下图法制成血涂片。
1、甲基绿和吡罗红两种染色剂对 DNA 和 RNA 的亲和力不同。 2、甲基绿—派洛宁为碱性染料，它分别能与细胞内的 DNA、RNA 结合呈现不同颜色。 当甲基绿与派洛宁作为混合染料时，甲基绿与染色质中 DNA 选择性结合显示绿色或蓝色； 派洛宁与核仁、细胞质中的 RNA 选择性结合显示红色。其原因可能是两种染料的混合染 液中有竞争作用，同时两种核酸分子都是多聚体，而其聚合程度有所不同。甲基绿易与 聚合程度高的 DNA 结合呈现绿色。而派洛宁则与聚合程度较低的 RNA 结合呈现红色（但 解聚的 DNA 也能和派洛宁结合呈现红色）。
实验一：见笔记 实验二 细胞的观察和测量
一、 实验分析： 根据光学显微镜的构造和原理，以及使用低倍镜的经验和技能，学习高倍镜的使用
方法和注意事项。由于物镜倍率的不同，在视野中观察到的标本物像大小迥异。通过物 镜可以更清楚地观察和研究生物体的结构特点并通过显微测微尺测量细胞的大小。
显微测微尺有目镜测微尺和物镜测微尺两种。目镜测微尺安装于目镜镜筒的光闲上 物镜测微尺置于载物台上，用以标定目镜测微尺每小格的长度。如已知目镜测微尺每小 格的长度，就不必再使用物镜测微尺了。如未知目镜测微尺每小格的长度，则需利用物 镜测微尺对每小格的长度进行测量。按照正确使用低、高倍物镜的方法，调焦至能看清 台微尺上的刻度；转动目镜和移动台微尺，使二尺平行，再使二尺左边的一刻线重合， 然后自左向右找出二尺另一次重合的刻线；分别记录下二条重合刻线间台微尺和目微尺 的格数，按下列公式计算目微尺每一小格的长度：