月季的花药培养2

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安全在于心细，事故出在麻痹。20.12.2020.12.2007:38:2307:38:23December 20, 2020
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踏实肯干，努力奋斗。2020年12月20日上午7时38分 20.12.2020.12.20
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追求至善凭技术开拓市场，凭管理增 创效益 ，凭服 务树立 形象。2020年12月20日星期 日上午7时38分 23秒07:38:2320.12.20
③注意：如果花药开裂释放出胚 状体，则一个花药内就会产生大 量幼小植株，必须在花药开裂后 尽快将幼小植株分开，分别移植 到新的培养基上，否则这些植株 将很难分开。
4、鉴定和筛选
在花药培养中，特别是通过愈伤组织 形成的花粉植株，常常会出现染色体倍 性的变化（主要原因是营养核和生殖核 融合造成的）
5、植物组织培养技术与花药培养技术的异同点：
③染色操作
花药应该在卡诺氏固定液中固定 20min，然后取出放在载玻片上，加 焙花青—铬钒溶液染色，盖上盖玻片 后在显微镜下检查。
（二）材料的消毒
1、酒精处理
①花蕾用体积分数为70%的酒精浸泡 30秒，立即取出。 ②无菌水清洗 ③无菌吸水纸吸干花蕾表面的水分
2、消毒液处理
① 放入质量分数为0.1%的氯化汞溶液 中2~4分钟（也可质量分数为1%的次 氯酸钙溶液或饱和漂白粉溶液）
谢谢大家！
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踏实，奋斗，坚持，专业，努力成就 未来。20.12.2020.12.20Sunday, December 20, 2020
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弄虚作假要不得，踏实肯干第一名。07:38:2307:38:2307:3812/20/2020 7:38:23 AM
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安全象只弓，不拉它就松，要想保安 全，常 把弓弦 绷。20.12.2007:38:2307:38Dec-2020-Dec-20
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追求卓越，让自己更好，向上而生。2020年12月20日星期 日上午7时38分 23秒07:38:2320.12.20
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严格把控质量关，让生产更加有保障 。2020年12月 上午7时 38分20.12.2007:38December 20, 2020
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重规矩，严要求，少危险。2020年12月20日 星期日7时38分 23秒07:38:2320 December 2020
③染色操作
将花药放在载玻片上，加一滴 质量分数1％的醋酸洋红，用镊柄 将花药捣碎，盖上盖玻片在显微镜 下检查。
3、焙花青—铬钒法
①卡诺氏固定液的配制方法
将无水酒精与冰醋酸按体积 比为3 ：1的比例混匀
②焙花青—铬钒溶液的配制方法
将5g铬明矾[K2SO4Cr2(SO4)·24H2O] 加入90ml蒸馏水中，溶解后加入0.1g焙 花青，混匀并加热至沸腾，煮沸5分钟后 冷却至室温，过滤，加蒸馏水定容至 100ml。
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专注今天，好好努力，剩下的交给时 间。20.12.2020.12.2007:3807:38:2307:38:23Dec-20
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牢记安全之责，善谋安全之策，力务 安全之 实。2020年12月20日 星期日7时38分 23秒Sunday, December 20, 2020
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相信相信得力量。20.12.202020年12月 20日星 期日7时38分23秒20.12.20
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严格把控质量关，让生产更加有保障 。2020年12月 上午7时 38分20.12.2007:38December 20, 2020
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作业标准记得牢，驾轻就熟除烦恼。2020年12月20日星期 日7时38分23秒 07:38:2320 December 2020
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好的事情马上就会到来，一切都是最 好的安 排。上 午7时38分23秒 上午7时38分07:38:2320.12.20
2、接种
立即将花药接种于培养基上， 通常每瓶接种花药7-10个。
3、培养
①培养条件：温度控制在25℃左右，不 需要光照。幼小植株形成后才需要光照。
②培养：一般经过20-30天培养后，会发 现花药开裂，长出愈伤组织或释放出胚状 体
长出愈伤组织则将愈伤组织及时转移 到分化培养基上，以便进一步分化出再生 植株
②某些植物的花粉细胞核不易着色， 需采用焙花青-铬矾法，这种方法能 将花粉细胞核染成蓝黑色。
2、醋酸洋红法
①醋酸洋红法染色机理
醋酸洋红为碱性染色剂，而花粉细 胞内有染色体，染色体主要成分是DNA 和蛋白质,易被碱性染料着色染成红色 。
②醋酸洋红的配置
将体积分数45％的醋酸 100ml煮沸，缓缓加入1g洋 红，在加热回流8h，冷却至 50℃，过滤即可。
花丝 雄蕊：
花药：囊状结构，内有很多花粉粒
药隔：由薄壁细胞构成，内有维管束
花药
花粉粒
花粉囊（4或2） 囊壁
药隔
花
粉
药隔
囊
囊壁
花粉是小孢子母细胞经过减数分裂而形成 的，因此，花粉是单倍体的生殖细胞
①经历时期：
四分体时期、单核期、双核期
②花粉粒的形成
花粉母细胞 （小孢子母细胞）
减数分裂 四分体时期(小孢子)
项目
相同点
不同点
植物来自百度文库织 离体的植物组 外植体为体细胞，染色
培养技术 织经脱分化形 体数无需加倍。
成愈伤组织，
花药培养 再分化成丛芽，取材为花药，培养的为 技术 诱导出根，然 单倍体幼苗，植株弱小， 后进行移栽。 高度不育，必须用秋水
仙素处理，使染色体加
倍，恢复正常植株的染
色体数，而且为纯种。
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树立质量法制观念、提高全员质量意 识。20.12.2020.12.20Sunday, December 20, 2020
被子植物
种子有 果皮包 被着， （胚珠 有子房 壁包被 着）
裸子植物
种子无 果皮包 被着， （胚珠 无子房 壁包被 着）
种子
花的结构
被子植物的有性生殖是在花 里进行的，雌蕊和雄蕊是进
行有性生殖的主要部分。
雌 蕊
雄 蕊
雌蕊的结构
花粉粒
花粉管
精子
(2个)
极核 卵细胞
一、基础知识
（一）、被子植物的花粉发育
－－提高诱导成功率的重要因素
只有某一个时期对离体刺激敏感。
最适合花药培养的小孢 子发育时期为单核靠边期
措施？？
2、培养基的组成
花药培养所采用的培养基因 植物的不同而有所变化
3、其他因素 亲本植株的生长条件、材料的
低温预处理以及接种的密度等对诱 导成功都有一定的影响
六、实验操作
（一）材料的选取
1、方法 ①最常用的方法有醋酸洋红法
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重于泰山，轻于鸿毛。07:38:2307:38:2307:38Sunday, December 20, 2020
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不可麻痹大意，要防微杜渐。20.12.2020.12.2007:38:2307:38:23December 20, 2020
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加强自身建设，增强个人的休养。2020年12月20日 上午7时 38分20.12.2020.12.20
单核居中期(小孢子) 有丝
单核靠边期(小孢子) 分裂
营养细胞
花粉管细胞核 双核期
生殖细胞核
生殖细胞 有丝 分裂
精子 精子
两个精子和一个营养细胞的基因型相同
1个 花粉 母细 胞
减分
4个 小孢 子
有分
4个花粉管细胞核
4个生殖细胞核 有分
8个精子
(二)、产生花粉植株的两条途径
（三）、影响花药培养的因素 1、材料的选择 ①时期－－－初花期 ②选择合适的花粉发育时期是
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好的事情马上就会到来，一切都是最 好的安 排。上 午7时38分23秒 上午7时38分07:38:2320.12.20
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每天都是美好的一天，新的一天开启 。20.12.2020.12.2007:3807:38:2307:38:23Dec-20
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务实，奋斗，成就，成功。2020年12月20日 星期日7时38分 23秒Sunday, December 20, 2020
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人生得意须尽欢，莫使金樽空对月。07:38:2307:38:2307:3812/20/2020 7:38:23 AM
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安全象只弓，不拉它就松，要想保安 全，常 把弓弦 绷。20.12.2007:38:2307:38Dec-2020-Dec-20
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加强交通建设管理，确保工程建设质 量。07:38:2307:38:2307:38Sunday, December 20, 2020
② 无菌水冲洗3~5次
用于培养花药，实际上多数未熟，由 于它的外面有花萼、花瓣或颖片保护， 通常处于无菌状态，所以只要将整个花 蕾或幼穗消毒即可。
（三）接种和培养
1、剥取花药
在无菌条件下除去萼片和花瓣用镊子取出 花药
注意：
①勿损伤花药，以免诱导出 非花粉愈伤组织 ②要彻底去除花丝，因为与花丝相连的 花药不利于愈伤组织或胚状体的形成
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抓住每一次机会不能轻易流失，这样 我们才 能真正 强大。20.12.202020年 12月20日星期 日7时38分23秒20.12.20
谢谢大家！