酶工程：固定化酶实例
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固定化酶实例
一、重氮Leabharlann Baidu固定化糖化酶 活力和稳定性
糖化酶
• 淀粉----葡萄糖 • 固定化方法：重氮法 • 载体：ASPS（磺酸基苯氨基聚苯乙烯） • 糖化酶（EC3.2.1.3, Glucoamylase ) 最
适作用温度为50一60℃最适pH为4-5。
糖 化 酶 性 质
1、载体制备
催化剂
聚苯乙烯+H2SO4----磺酸基聚苯乙烯
2、 酶的固定化
• 活化载体：含苯氨基的不溶性载体与亚 硝酸反应，生成重氮盐衍生物。
• 偶联酶：酶+活化载体--固定化酶
重氮法
R NH2 NaNO2,HCl[R N N]Cl - [E] R N N [E]
R-NH2含芳香族氨基的水不溶性载体,酶蛋白中的游离 氨基、组氨酸的咪唑基、酪氨酸中的酚基等参与此反 应。
操作方式
用于生产糊精
• α-淀粉酶分子量5w左右 • 超滤器截留分子量选择1w3 • 糊精分子量1w~2w
反应流程图
中空纤维 超滤器 产物
重氮化
•1
+HNO2-
N+≡N +H2O
固定化
+ N+≡N
N=N
3 条件选择
N+≡N
固定化时间影响
固定化酶的稳定性
底物影响
二、单宁酶的固定化及性质研究
• 单宁酶价格昂贵,使用寿命较短。
• 壳聚糖、人造沸石和活性炭等易得原料 固定化
固定化方法
热稳定性
pH稳定性
操作半衰期
三、形式固定化
一、重氮Leabharlann Baidu固定化糖化酶 活力和稳定性
糖化酶
• 淀粉----葡萄糖 • 固定化方法：重氮法 • 载体：ASPS（磺酸基苯氨基聚苯乙烯） • 糖化酶（EC3.2.1.3, Glucoamylase ) 最
适作用温度为50一60℃最适pH为4-5。
糖 化 酶 性 质
1、载体制备
催化剂
聚苯乙烯+H2SO4----磺酸基聚苯乙烯
2、 酶的固定化
• 活化载体：含苯氨基的不溶性载体与亚 硝酸反应，生成重氮盐衍生物。
• 偶联酶：酶+活化载体--固定化酶
重氮法
R NH2 NaNO2,HCl[R N N]Cl - [E] R N N [E]
R-NH2含芳香族氨基的水不溶性载体,酶蛋白中的游离 氨基、组氨酸的咪唑基、酪氨酸中的酚基等参与此反 应。
操作方式
用于生产糊精
• α-淀粉酶分子量5w左右 • 超滤器截留分子量选择1w3 • 糊精分子量1w~2w
反应流程图
中空纤维 超滤器 产物
重氮化
•1
+HNO2-
N+≡N +H2O
固定化
+ N+≡N
N=N
3 条件选择
N+≡N
固定化时间影响
固定化酶的稳定性
底物影响
二、单宁酶的固定化及性质研究
• 单宁酶价格昂贵,使用寿命较短。
• 壳聚糖、人造沸石和活性炭等易得原料 固定化
固定化方法
热稳定性
pH稳定性
操作半衰期
三、形式固定化