第五章 巴比妥类药物的分析

2、提取分离后紫外分光光度法 根据巴比妥盐和巴比妥的游离体在水和有机溶
液中的溶解差异，经过提取分离后再用紫外分光 光度法进行含量测定。美国药典（24）采用本方 法测定苯巴比妥钠的含量。
（五）高效液相色谱法
思考题
试述巴比妥类药物的结构与理化性质的关系。 巴比妥类药物的鉴别反应主要有哪些？其原理
（三） 酸碱滴定法
1、水-醇中滴定 本法的优点：防止生成的弱酸 盐水解，操作简单。缺点：终点判断比较困难，可采 用电位法指示终点。
2、在胶束水溶液中的滴定方法 本法是在有机 表面活性剂的胶束水溶液中进行滴定，用指示剂或电 位法指示终点。因表面活性剂能改变巴比妥类药物的 离解平衡，使药物的Ka增大，即使巴比妥类药物酸 性增强，因此使滴定终点变化明显。常用的有机
第五章、 巴比妥类药物的分析
一、基本结构与主要性质
R1
C4O
C5 6
R2
CO
基本结构可分为两部分：
N3 H 1 2 CO NH
一部分为母核巴比妥酸的环状丙二酰脲结构
一部分为取代基部分
1、弱酸性
4
3
5
2
6
1
由于生成的盐为强碱弱酸盐，水溶液在空气中被CO2作用析出。
2、水解反应
本类药物的钠盐在吸潮情况或溶液呈碱性时可发生水 解，水解产物随5，5‘取代基不同而有较大差异，要产生 NH3，必须与与碱液共沸的条件下反应。
三、特殊杂质检查
（一）苯巴比妥的特殊杂质检查
苯巴比妥的工艺含有水解、酯化、缩合、酸 化、乙酰化、环合、酸析等步骤，可产生中间体、 副产物以及水解产物等，利用主药和杂质的酸碱 度差异，溶解度差异可进行检查。
1、酸度 检查苯丙基二酰脲，甲基橙变色范 围pH 3.1-4.4 红-橙
2、溶液的澄清度 检查巴比妥酸等乙醇中的 不溶物
（4）计算
P%

(VNa0
VNax
)

CB 0.1
13.01
100%
Wx 1000
如果按干燥品计算，则Wx(1－干燥失重%） （5）由于溴易挥发，不宜直接配成标准溶液，而 是用溴酸钾与溴化钾组成的混合液，亦称溴液。
滴定时常采用剩余滴定方式。
BrO3+5Br-+6H+—— Br2+3H2O
3、中性或碱性物质 检查在氢氧化钠溶液中 不溶而在乙醚中溶解的杂质。
（二）司可巴比妥钠的特殊杂质检查
四、含量测定
本类药物常用的含量测定的方法有银量法、 溴量法、紫外分光光度法、酸碱滴定法以及高效液 相色谱法等。
（一）银量法 基于巴比妥类药物在合适的碱性溶液中，可与
银离子定量成盐。因此，可采用银量法测定本类 药物的含量。
图5-2所示的硫喷妥的紫外吸收光谱：
在酸性或碱性溶液中均有较明显的紫 外吸收。
0.1mol／L HCl中，287nm，238nm；
0.1mol／LNaOH中，304nm,255nm; pH13的强碱性溶液中，硫代巴比妥类 药物在255nm处的吸收峰消失，只存 在304nm处的吸收峰。
255
巴比妥类药物在不同pH值溶液中
4、与香草醛（Vanillin）的反应 巴比妥+香草醛―浓―硫酸→棕红色
5、紫外吸收光谱特征 UV随着其电离级数不同，而发生显著
的变 化，如图5-1所示。
酸性：不电离，无UV pH10：一级电离，λmax240nm pH13：5，5-取代，二级电离，
红移至255nm 1,5,5-取代，无二级电离 λmax240nm
是什么？ 银量法测定巴比妥类药物的原理是什么？ 哪些巴比妥类药物可采用溴量法测定含量？测
定方法的原理是什么？ 紫外分光光度法测定巴比妥类药物的介质酸碱
性有什么要求？为什么？
在滴定过程中，巴比妥类药物首先形成可溶 性的一银盐，当被测定的巴比妥类药物完全形成 一银盐后，稍过量的银离子就与巴比妥类药物形 成难溶性的二银盐沉淀，使溶液变浑浊，以此指 示滴定终点。
例： 异戊巴比妥及其钠盐的测定：取本品约 0.2g，精密称定，加甲醇40ml使溶解，再加新鲜 配制的3％无水碳酸钠溶液15ml，照电位法，用 硝酸银滴定液(0.1mol／L)滴定，即得。每1ml硝
3、方法注意事项
（1）即1mol的Br2，与1mol的司可巴比妥反应, Br2与I2反应比为： 1：1 ，I2与Na2S2O3的反应比为 1：2，因此1ml 0.05mol Br2≈1×0.05×260.27mg=13.01mg司可巴比妥， 1ml 0.05mol Br2≈ 1ml 0.05mol I2≈ 1ml 0.1mol Na2S2O3≈ 13.01mg司可巴比妥。
化钠溶液定量稀释制成每lml中约含5μg的溶液；另 取硫喷妥对照品，加0.4％氢氧化钠溶液溶解并定量 稀释制成每1m1中约含5μg 的溶液。照分光光度法， 在304nm波长处测定吸收度，根据每支的平均装量 计算。每1mg硫喷妥相当于1.091mg的 C11H17N2NaO2S。
硫喷妥钠（mg)=(Ax/AS)×CS ×10-3 ×D ×1.091
指示终点的方法变化
药物
比浊法含量%
巴比妥
90.6
苯巴比妥
101.0
电位法含量% 89.2 99.9
（二）溴量法 1、原理
2、方法
司可巴比妥钠的测定方法：取本品约0.1g， 精密称定，置250ml碘量瓶中，加水10ml，振摇 使溶解，精密加溴滴定液(0.05mol／L)25ml，再 加盐酸5ml，立即密塞并振摇lmin，在暗处静置 15min后。注意微开瓶塞，加碘化钾试液10ml， 立即密塞，摇匀后用硫代硫酸钠滴定(0.1mol/L) 滴定，至近终点时，加淀粉指示液，继续滴定至 蓝色消失，并将滴定的结果用空白试验校正。每 lml溴滴定液(0.05mol／L)相当于13.01mg的 (C11H17N2NaO3)。
酸银滴定液(0.1mol／L)相当于22.63mg C11H18N2O3(或24.83mg的C12 H17 N2 Na03)。
本法的优点：操作简单，应用广泛，因巴比妥 类药物分解产物或其他共存物不与AgNO3反应，该 法具有一定的专属性。可作为一般巴比妥类药物及 其制剂的测定方法。
本法的缺点：近终点时反应较慢，观察终点浑 浊难以掌握以及温度影响大。
3、与重金属离子的反应 （1）银盐反应
白色
（2）铜盐反应
巴比妥类药物 + 铜吡啶试液――→吡紫啶堇色or紫色↓
硫喷妥钠妥类药物 + 铜吡啶试液――→吡绿啶色↓
反应过程：巴比妥类先在水-吡啶中烯醇化，部分解离为负离子， 再与吡啶硫酸铜作用生成紫堇色络合物，该反应药典附录登载， 作为丙二酰脲类的鉴别试验。
此反应也可作试纸反应，取供试品少许，加1%硝 酸钴无水乙醇液1滴，干后持于NH3.H2O瓶口熏 （或滴加1滴0.5%KOH无水乙醇液）呈兰紫色，并 用试剂同样操作作为空白对照。
（4）与汞盐的反应 巴比妥类药物+硝酸汞试液→白色↓ （溶于氨试液）
本法因汞的毒性不被药典采用，但毒物分析的系 统鉴别中常用此法。
此反应还可以通过生成物在氯仿中溶解度不同区别巴比妥类 药物。亲脂性越强的药物生成的紫色沉淀越易溶解于氯仿。
(3)与钴盐的反应（parri试验）
碱性
巴比妥类药物+钴盐――→紫堇色 反应条件：无水，所有试剂均不含水分；碱性： 异丙胺 操作：取供试品约50mg，加甲醇溶解，加1% 硝酸钴甲醇液以及异丙胺甲醇液，呈兰紫色。
(2)、由于溴反应比一般反应慢，因此采用剩余滴 定方式，过量的溴与司可巴比妥定量反应完成后，剩 余溴与碘化钾反应，使I-被氧化为 I2 ， I2 再用Na2S2O3 滴定液滴定。在整个操作中应注意溴和碘的损失。
（3）空白试验，为消除因反应多，过程长而产生 的系统误差，也是为了不标定Br2滴定液的浓度。
红色 （2）甲醛-硫酸反应
苯巴比妥与甲醛硫酸反应界面呈玫瑰红色。 2、不饱和烃基取代反应 （1）与 Br2、 I2 试液的反应（加成） →退色 （2）与 KMnO4试液的反应（氧化）
3、硫元素的反应
（四）测定熔点 熔点常用于药物的鉴别；也能反映药物的纯杂
程度。 巴比妥类药物： 1）本身可直接用药典方法测定熔点，
表面活性剂有：溴化十六烷基三甲基苄铵和氯化四癸基 二甲基苄铵。
3、非水滴定法
（四）紫外分光光度法 1、直接紫外分光光度法
注射用硫喷妥钠的含量测定 ChP(2005) 测定方法：取装量差异项下的内容物，混合均匀，
精密称取适量(约相当于硫喷妥钠0.25g)，置500ml量瓶 中，加水稀释至刻度，摇匀，量取此溶液用0.4 ％氢氧
2）其钠盐水溶液酸化后析出相应的游离巴比妥， 将沉淀过滤干燥后，测定熔点
3）制备成衍生物后，再测定衍生物的熔点。 可鉴别苯巴比妥及其钠盐、异戊巴比妥及其钠盐、
司可巴比妥钠及注射剂。
（五）红外分光光度法
例： ChP(2010)注射用硫喷妥钠的鉴别
(鉴别) (1)取本品约0.5g，加水l0ml溶解后，加过量 的稀盐酸，即生成白色沉淀；滤过，沉淀用水洗净，在 105℃干燥后，依法测定(附录ⅥC)，熔点为157～161℃。 (2)取本品约0.1g，加吡啶溶液(1 → 10)l0ml溶解后，加 铜吡啶试液lml，振摇，放置1分钟，即生成绿色沉淀。 (3)取本品约0.2g，加氢氧化钠试液5ml与醋酸铅试液 2ml，生成白色沉淀；加热后，沉淀变为黑色。 (4)取本品，炽灼后，显钠盐的火焰反应(附录Ⅲ)。
的紫外吸收光谱发生的特征性变化，
可用于本类药物的鉴别、检查和含量
测定。
二、鉴别试验
（一）丙二酰脲的鉴别试验（一般鉴别试验） Baidu Nhomakorabea、银盐反应 2、铜盐反应
（二）钠盐的鉴别反应 1、焰色反应：Na显鲜黄色；
2、供试品+焦锑酸钾→↓
（三）利用取代基或元素的鉴别反应（专属鉴别）
1、芳环取代基的反应
（1）亚硝化反应：H2SO4+NaNO2→橙黄色→橙