液相色谱基础知识培训教材
合集下载
相关主题
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
液相色谱基础知识培训教材
Inject Inject
用“5s”法计算柱效
Inject
Good Column
Bad Column
液相色谱基础知本身
. 减小填料的颗粒度 . 找到最佳的流速(根据不同内径) . 合适的温度 . 降低溶剂的粘度 . 增加柱长
液相色谱基础知识培训教材
其他影响柱效的因素
` 柱外效应
. 连接管路 . 进样器、检测器
` 进样体积 ` 进样量
液相色谱基础知识培训教材
容量因子 k'
与峰高的关系
与R的关系
改变k'值的方法∶
调节流动相的极性、pH、离子强度等 梯度淋洗
液相色谱基础知识培训教材
选择性系数 a
` 定义∶
. a =1 时两组分分不开，
` 改变a的途径
程度。是化学因素。 . N 是理论塔板数，描述色谱峰的谱带展宽程
度。
液相色谱基础知识培训教材
色谱柱的柱效 N
理论塔板数计算公式：
W
s
方法
Wtan
16 切线法
Wh
5.54 半峰高
W3s
9
3s
W4s
16
4s
W5s
25
5s
液相色谱基础知识培训教材
用“切线”法计算柱效
不好的色 谱柱的柱效反 而比好色谱柱 的要高，因为 其拖尾部分测 不出来
2020/11/26
液相色谱基础知识培训教材
` “分析型液相色谱” ` 定性及定量分析
. 灵敏度的要求 . 样品的复杂性 . 样品量的要求 . 精度及准确度的要求 . 容易使用
液相色谱基础知识培训教材
液相色谱的应用（二）
` “制备型液相色谱” ` 分离及纯化
. 化合物的稳定性 . 样品的复杂性 . 制备量的要求 . 纯度的要求，及纯度的鉴定 . 方法的安全性
. 改变固定相 . 改变流动相 . 改变温度 . 改变样品的本身性质
液相色谱基础知识培训教材
a ，k'，N∶如何控制分辨率?
液相色谱基础知识培训教材
液相色谱的检测模式
灵敏度、选择性、及适应能力
液相色谱基础知识培训教材
色谱条件的优化
液相色谱基础知识培训教材
3rew
演讲完毕，谢谢听讲!
再见，see you again
液相色谱基础知识培训 教材
2020/11/26
液相色谱基础知识培训教材
常见的分离方式
` 蒸馏 ` 离心 ` 电泳 ` 过滤 ` 超滤
. 色谱
液相色谱基础知识培训教材
色谱法的分类
液相色谱基础知识培训教材
HPLC分离的机理
液相色谱基础知识培训教材
典型的仪器配置
液相色谱基础知识培训教材
液相色谱的应用（一）
液相色谱基础知识培训教材
开发液相色谱方法
问题∶什么样的分离结果是好的?分辨率?
液相色谱基础知识培训教材
什么是色谱的分辨率？
分辨率的公式：
液相色谱基础知识培训教材
影响分辨率的因素：K’，a，N
` 分辨率的方程∶
. k' 是容量因子，表达了样品与柱填料的作用 强弱。
. a 是选择性系数，描述两化合物分离的好坏
Inject Inject
用“5s”法计算柱效
Inject
Good Column
Bad Column
液相色谱基础知本身
. 减小填料的颗粒度 . 找到最佳的流速(根据不同内径) . 合适的温度 . 降低溶剂的粘度 . 增加柱长
液相色谱基础知识培训教材
其他影响柱效的因素
` 柱外效应
. 连接管路 . 进样器、检测器
` 进样体积 ` 进样量
液相色谱基础知识培训教材
容量因子 k'
与峰高的关系
与R的关系
改变k'值的方法∶
调节流动相的极性、pH、离子强度等 梯度淋洗
液相色谱基础知识培训教材
选择性系数 a
` 定义∶
. a =1 时两组分分不开，
` 改变a的途径
程度。是化学因素。 . N 是理论塔板数，描述色谱峰的谱带展宽程
度。
液相色谱基础知识培训教材
色谱柱的柱效 N
理论塔板数计算公式：
W
s
方法
Wtan
16 切线法
Wh
5.54 半峰高
W3s
9
3s
W4s
16
4s
W5s
25
5s
液相色谱基础知识培训教材
用“切线”法计算柱效
不好的色 谱柱的柱效反 而比好色谱柱 的要高，因为 其拖尾部分测 不出来
2020/11/26
液相色谱基础知识培训教材
` “分析型液相色谱” ` 定性及定量分析
. 灵敏度的要求 . 样品的复杂性 . 样品量的要求 . 精度及准确度的要求 . 容易使用
液相色谱基础知识培训教材
液相色谱的应用（二）
` “制备型液相色谱” ` 分离及纯化
. 化合物的稳定性 . 样品的复杂性 . 制备量的要求 . 纯度的要求，及纯度的鉴定 . 方法的安全性
. 改变固定相 . 改变流动相 . 改变温度 . 改变样品的本身性质
液相色谱基础知识培训教材
a ，k'，N∶如何控制分辨率?
液相色谱基础知识培训教材
液相色谱的检测模式
灵敏度、选择性、及适应能力
液相色谱基础知识培训教材
色谱条件的优化
液相色谱基础知识培训教材
3rew
演讲完毕，谢谢听讲!
再见，see you again
液相色谱基础知识培训 教材
2020/11/26
液相色谱基础知识培训教材
常见的分离方式
` 蒸馏 ` 离心 ` 电泳 ` 过滤 ` 超滤
. 色谱
液相色谱基础知识培训教材
色谱法的分类
液相色谱基础知识培训教材
HPLC分离的机理
液相色谱基础知识培训教材
典型的仪器配置
液相色谱基础知识培训教材
液相色谱的应用（一）
液相色谱基础知识培训教材
开发液相色谱方法
问题∶什么样的分离结果是好的?分辨率?
液相色谱基础知识培训教材
什么是色谱的分辨率？
分辨率的公式：
液相色谱基础知识培训教材
影响分辨率的因素：K’，a，N
` 分辨率的方程∶
. k' 是容量因子，表达了样品与柱填料的作用 强弱。
. a 是选择性系数，描述两化合物分离的好坏