果汁中vc含量的测定

果汁中VC含量的测定（HPLC法）
1.原理：
果汁中的VC在ODS柱上可以得到分离，并且在206NM波长下，VC 有吸收，本方法对于测定果汁中添加VC的样品有较好的结果。

2.试剂
2.1 溶剂：水，过滤后的二次蒸馏水
2.2 流动相：0.01M HCI溶液
2.3 维生素C 标准品：纯度95%
2.4 维生素C标准溶液：称取VC标准品0.25g，精确至0.0001g，用流动相溶解，转移，并定容标准品于50ml容量瓶中，混匀，作为贮备液。

2.5 VC标准工作液：准确吸取5.0ml贮备液于50ml容量瓶中，用流动相定容，即可得到10倍的稀释液，其浓度为0.5mg/ml。

2.6 VC标准液的保存期不应超过半个月。

3. 仪器
3.1 高效液相色谱仪：单元泵，可变波长紫外检测器，数据分析系统。

3.2 色谱柱：150mm*
4.6mm ,5ul颗粒的键合ODS柱。

3.3 进样器：25ul微量进样针
3.4 色谱条件：
流动相：0.01M HCI溶液
流量：1.0ml/min
柱温：40℃
检测波长：206nm
保留时间：3.2min
以上操作条件是典型条件，可根据仪器情况和分离情况加以适当的调整，以期获得最佳定量效果。

4. 测定步骤
4.1 样品的制备：称取浓缩汁样品4.0g(清汁10ml或浓缩浊汁6ml左右),精确至0.01g，用流动相溶解于50ml容量瓶中，并定容至刻度，摇匀，用带有0.45um水系滤膜的过滤器过滤样品至样品瓶中，作为试样溶液。

4.2 在上述操作条件下，等待仪器运行稳定后，按照标准溶液、试样溶液的顺序交叉进样进行测定。

4.3 定量计算
以现配置的VC标准工作液做标准曲线，同时注射5针，从而确定响应系数，对于样品的面积积分结果采用外标法即可得到样品中VC的量。

4.4 Vc（mg/100g）按下式计算：
AiXCsXVX100
Vc（mg/100g）=----------------
AsXm
式中，Ai、As-----分别为样品与标样中Vc的峰面积；
Cs-----标样中Vc和浓度，mg/ml；
V------标样定容体积，ml；
m------称取的试样量，g。

5. 允许差
两次平行测定结果之差，相对偏差≤10%。