实训四微生物细胞数的计数

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2020/11/14
一、实验目的
使用血球计数板计数单细胞微生 物的数量。
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二、实验原理
因此,在计算上可按下列两种公式进行: 1. 16×25计数板的计算:
细胞数/mL= (100小格内的细胞数/100)×400 ×10000 ×稀释倍数
2. 25X16计数板的计算: 细胞数/mL=
(80小格内的细胞数/80)×400 ×10000 × 稀释倍数
式中,400为计数板的小格总数; 10000为由计数室0.1mm3换算成lmL体积的
系数 2020/11/14
来自百度文库
三、实验材料和用具
1.材料 酵母菌悬液
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2.用具 显微镜、血球计数板
四、实验方法
1.取清洁干燥的血球计数板,在计数室 上面加盖玻片。在显微镜下找到计数室。
2.取酵母菌液,摇匀,用滴管由盖玻片 边缘滴一小滴(不宜过多)。菌液可自行渗 入计数室。计数室不得有气泡,然后置高 倍镜下计数。
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四、实验方法
3.样品浓度要求每小格内有5~10个菌体为宜。
4.计数时,用16×25的计数板要按对角线方位 ,取左上、左下、右上,右下四个中方格(即 100小格)计数酵母菌液,用25×16的计数板, 除计数上述对角线的四个方格外,还需数中央 一个方格的酵母菌数(即80小格)。
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四、实验方法
5.每个样品重复计数2~3次,取其平均值, 按上述公式计算每毫升菌液所含的酵母细 胞数。
6.计数完毕,将计数板在水龙头上冲洗,切 勿用硬物洗刷,自行晾干或吹风机吹干, 或用擦镜头纸轻轻擦拭。
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五、实验内容
使用血球计数板对样品酵母菌液进行计 数,并计算菌液浓度。
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六、实验报告
将微生物计数的结果填入下列空白 1.第一次计数的酵母细胞数目= 个。 2.第二次计数的酵母细胞数目= 个。 3.从两次的计数结果中求出酵母细胞的平均数目 4.稀释倍数= 倍。 5.求出每毫升酵母菌液中的细胞数= 个。
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七、思考题
1.为什么两种不同规格的血球计数板测 定同一样品时,其结果是一样的? 2.使用细胞计数板应注意什么问题?
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