生物课本实验大全
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实验步骤
研磨成分 绿色叶片 丙酮(或酒精) 二氧化硅 碳酸钙 用量 5g 5ml 少许 少许 作用 提供色素 溶解色素 为了研磨充分 中和有机酸,防止色素受到破坏
实验结果
色素在滤纸条上的顺序,从上到下依 次为: 胡萝卜素、叶黄素、叶绿素a、叶绿素b
橙黄色、 黄色、 蓝绿色、 黄绿色
色素提取液浅的原因:
实验六:叶绿体中的色素的提取和分离
实验原理
提取:叶绿体中的色素能够溶解在有机溶剂丙酮(或 酒精)中,所以,可以用丙酮(或酒精)提取叶绿体 中的色素。(萃取法)
分离:叶绿体中的色素在层析液中的溶解度不同,溶 解度高的随层析液在滤纸上扩散的很快,溶解度低的 随层析液在滤纸上扩散的很慢,从而色素在扩散的过 程中分离开来。(纸层析法)
实验三:观察植物细胞的有丝分裂(装片制作)
步骤 试剂 解离 质量分数为15%的盐酸 和体积分数为95%的酒 精混合(1:1) 漂洗 清水 染色 0.01g/ml或0.02g/ml的龙 胆紫溶液(或醋酸洋红 液) 时间 作用
3~5min 使组织中的细胞相互分离 开来,并且能杀死固定细 胞,便于观察。 10min 洗去盐酸,便于碱性染料 染色。 3~5min 对细胞中的染色体(质) 进行染色,便于观察。
制片 根尖放在载玻片上→滴清水→镊子弄碎根尖→盖片→拇指轻 压盖玻片,可使细胞进一步分散开来(呈薄雾状),便于显 微观察。
2、两次DNA沉淀。都是由于溶解度降低所致,第一次,由NaCl 溶液浓度改变( 2mol/L-0.14mol/L)(提取) 第二次,由于95%的冷酒精的加入。 (纯化) 3、三次溶解DNA。对应三大步骤, 提取: 2mol/L氯化钠溶液; 提纯: 2mol/L氯化钠溶液; 鉴定:0.015mol/L氯化钠溶液。
淀粉 还原性糖 脂肪 蛋白质 DNA 染色质(体)
试剂
碘液 斐林试剂 班氏试剂 苏丹III染液
颜色
蓝色 砖红色沉淀 砖红色沉淀 橘黄色
备注
沸水浴1-2分钟 制作临时装片,用显微 镜观察 变性蛋白质也可以鉴定 (鉴定肽键) 沸水浴1-2分钟 被染色细胞可以观察细 胞核的形态和数量(不 分裂细胞);有丝分裂 中期(分裂细胞) 大肠杆菌的代谢产物有 机酸与伊红-美蓝反应
叶绿体中色素提取 和分离 高倍镜观察叶绿体
观察细胞质流动
观察植物细胞有丝 分裂
新鲜的黑藻
分裂活跃期的洋葱根 尖(分生区),分裂 期相对较长。(动物: 受精卵) 新鲜肝脏研磨液
操作:含叶绿体的大液泡细胞, 质流动快,易于观察。
原理:根尖分生区细胞正在有 丝分裂。分裂期相对较长的材 料位于分裂期的细胞较多。便 于取材。 原理:保证过氧化氢酶的活性。
鉴定:DNA遇二苯胺(沸水浴)会染成蓝色,可 以鉴定DNA(设置了对照实验)
酒精用途
50%的酒精 95%的酒精 脂肪鉴定时洗去浮色 解离根尖
95%的冷酒精 75%的酒精
沉淀DNA 表面消毒
Fra Baidu bibliotek
实验步骤:理解整体,把握重点
1、两次加蒸馏水。(提取) 第一次,利用红细胞渗透吸水破裂,释放DNA; 第二次, 稀释NaCl溶液浓度至0.14mol/L,降低DNA溶解度, 沉淀DNA。
范围
低倍镜 高倍镜 大 小
细胞数
多 少
细胞大小
小 大
物距
大 小
明暗度
亮 暗
观察细胞质流动
1、加快细胞质流动的措施
适当升高温度(20 ℃ -25 ℃ );
光下培养一段时间; 切伤部分叶片; 用适宜浓度的生长素溶液处理。 2、选择参照物 观察叶绿体流动的速度和方向 3、选择最佳观察部位 靠近叶脉部分(因为叶脉处水分供应充足,易观察)
实验二:用高倍显微镜观察叶绿体和细胞质流动 显微镜使用:对光→低倍镜观察→移动载玻片→转动转换器→高 倍镜观察
对光:反光镜(平面镜和凹面镜)和遮光器(光圈)
成像:倒立、放大、虚像。 镜头:目镜(倍数大,镜筒短),物镜(倍数大,镜筒长) 放大倍数=物镜倍数×目镜倍数 污点:位置判断(载玻片、物镜、目镜) 调焦(调物距):粗准焦螺旋和细准焦螺旋 视野:
1、研磨不充分;
2、没有加碳酸钙; 3、丙酮量太多;
4、放置时间太长。
层析时注意事项:
1、滤液细线不能浸入层析液中;
2、盖上培养皿盖; 3、滤纸条不能贴壁;
4、滤纸条剪去两角。
实验九:DNA粗提取与鉴定
实验原理:
提取:DNA在0.14mol/L的NaCl溶液中溶解度最 低,可以使溶解在氯化钠中的DNA析出 纯化:DNA不溶于酒精溶液,但是细胞中的其 他 物质可以溶于酒精溶液,可以提取含杂质较少的 DNA
苏丹IV染液
双缩脲试剂 二苯胺 龙胆紫溶液 醋酸洋红液
红色
紫色 蓝色 紫色 红色
大肠杆菌
伊红-美蓝
深紫色,金属光 泽
实验材料选择原则(一是符合原理;二是便于操作或观察)
实验 还原糖鉴定实验 材料 含还原糖量较高、颜 色为白色或近于白色 的植物组织 新鲜的绿色叶片(如 菠菜) 藓类的叶(菠菜叶) 原理或操作 操作:富含还原糖;选择与砖 红色沉淀反差较大的白色,便 于观察。 含有叶绿素,便于研磨。 含叶绿体大,数目少,叶片薄
比较过氧化氢酶和 Fe3+的催化效率
观察植物细胞质壁 分离与复原
紫色的洋葱鳞片叶 (外表皮)
含有紫色大液泡,便于观察
含有细胞核
DNA粗提取与鉴定 鸡血细胞液
斐林试剂与双缩脲试剂比较
1、试剂浓度不同: 斐林试剂:质量浓度为0.1g/ml的NaOH溶液和质量浓度为 0.05g/ml的CuSO4溶液配制而成。 双缩脲试剂:质量浓度为0.1g/ml的NaOH溶液和质量浓度为 0.01g/ml的CuSO4溶液组成。 2、使用顺序不同: 斐林试剂:两种溶液是现配现用。 双缩脲试剂:是先加入2mlNaOH溶液后滴加CuSO4溶液3- 4滴。 3、反应温度不同: 斐林试剂:反应温度为100℃沸水浴。 双缩脲试剂:反应温度为室温。
实验专题复习
课本学生实验 1、鉴定类 2、观察类 3、调查类
实验一:生物组织中还原糖、脂肪、 蛋白质的鉴定
实验原理:
某些化学试剂能够使生物组织中的有关有机化合物, 产生特定的颜色反应。 还原糖+斐林试剂→砖红色(沸水浴) 脂肪+苏丹Ⅲ染液→橘黄色 蛋白质+双缩脲试剂→紫色
物质鉴定的颜色反应
物质