动物生物技术复习资料
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动物生物技术(Animal Biotechnology):是以动物为主要研究对象,采用基因工程、细胞工程、酶工程、蛋白质工程、发酵(微生物)工程等现代生物技术对动物品质和性状进行改造的生物技术,包括:新型生物制品或饲料添加剂,培育高产、优质、抗逆的畜禽品种,是生物技术的重要组成部分。
AB,is the use of science and engineering to modify living organisms. The goal is to make products, to improve animals and to develop microorganisms for specific agricultural uses
基因工程(Genetic Engineering):应用人工方法把不同生物的遗传物质从细胞中分离出来,在体外进行切割和拼接,并将重组后的DNA导入某种宿主或个体,从而改变它们的遗传特征,育成新的品种或使新的遗传信息在新的宿主细胞或个体中大量表达,以获得基因产物(多肽或蛋白质)
酶工程:指利用酶的催化功能将一些原料加工成有用物质,或者获得一些催化活性的酶类(蛋白质或多肽)。
蛋白质工程(Protein engineering):指在基因工程的基础上,结合蛋白质晶体学、计算机辅助设计和蛋白质化学等多学科知识,通过基因的人工定向改造等手段,从而达到对蛋白质进行修饰、改造、拼接以产生能满足人类需要的新型蛋白质的一种技术。强调通过基因水平的修饰获得突变型蛋白
细胞工程(cell engineering)
指以细胞为基本单位,在体外条件下进行培育、繁殖,或人为地使细胞某些生物学特征按照人们的意愿改良和创造新品种,加速繁殖动物个体(胚胎移植),获得某种有用的物质(抗体、药物蛋白如红细胞生成素、抗血友病因子)的技术。
基因与基因组定义
基因(Gene):指位于染色体或基因组上的、能编码一个特定功能产物(如蛋白质或RNA分子等)的一段DNA或RNA序列,是遗传信息的基本单位。
基因组(Genome): The complete set of sequences in the genetic material of an organism. It includes the sequence of each chromosome plus any DNA in organelles.
病毒基因组特点:1基因组组成和类型多种多样。2基因组小,不同病毒基因组大小差别很大(从几kb-几百kb不等)。3多数病毒基因组是连续的(如噬菌体),但也有的分为几段(如流感病毒和一些侵染真核生物的病毒)。4功能密切相关的几个基因通常组成一个转录单元即一起转录为多个mRNA(多顺反子)。5病毒基因组大部分用来编码蛋白质,非编
码蛋白质部分比例很小通常为调控序列。6具有基因重叠现象
细菌(原核生物)基因组特点:原核生物在一些方面与病毒类似如顺反子结构、重叠基因,此外:1基因序列是连续的,无内含子,因此转录后不需要剪切。2无核膜,染色体DNA高度折叠,盘绕在一起形成一个致密的区域即拟核。3与真核生物相比无核小体。4编码区在基因组中所占的比例远远大于真核基因组,但又远远小于病毒基因组;非编码区
主要是一些调控序列。5在DNA分子中具有多种功能的识别区域,如复制起始区、复制终止区、转录启动区和终止区等。6具有操纵子、转座子和插入序列结构
真核生物基因组特点:1真核基因组远远大于原核生物的基因组。2真核基因具有许多复制起点,每个复制子大小不一。3真核生物基因为断裂基因。4真核生物基因组中含有大量重复序列。5真核生物基因组功能相关的基因构成各种基因家族,它们可串联在一起,亦可相距很远,但即使串联在一起成族的基因也是分别转录的。
DNA复制:以亲代的DNA链为模板,按照碱基配对的原则,在一系列酶和蛋白因子的作用下(DNA聚合酶等)将DNA链单体逐个加在3‘-OH 末端合成两条新链,并分配到子代的细胞中去。
DNA复制与细胞周期
DNA的复制起始指导细胞(原核/真核)分化
1、细胞分化产生的子代细胞数目由DNA是否复制决定;
2、DNA复制受控于复制起始;
3、DNA复制一旦开始,在整个基因组得以彻底复制之前,复制不会终止;
如果DNA复制没有终止,那么细胞分化就不会发生
DNA复制的结束“可能是”细胞分化的’触发器’(trigger)
DNA复制的基本特征::1DNA复制有一定的复制原点;2需要引物。以一段具有3‘-OH的RNA作为引物;3双向复制;DNA链的延伸方向:
5‘→3’;4半保留复制;5半不连续复制;6需多种酶和蛋白因子协同作用:解链、起始、延伸、终止、保证高度忠实性、引物合成。
复制原点(ori)复制子、复制叉
1、ori是DNA复制的起始位置
2、原核生物:1个;真核:多个
3、主要特征:双螺旋呼吸作用强烈、富含A﹕T、经常开放的区段、产生瞬时单链泡状结构。
ori 数目决定复制子数目
复制子:从每个复制起始点到复制终点的区域,能独立进行复制的单位。
复制叉:DNA链上复制正在发生的位点,从ori单/双向移动
半保留复制:以亲代DNA的每一条链为模板,合成完全相同的两个双链子代DNA,每个子代DNA中都含有一条亲代DNA链。
延伸:复制复合体与另一些蛋白质构成复
合体,在复制叉沿DNA移动,母链解开,子链合成。
DNA损伤与修复:1光复活 2切除修复 3重组修复 4SOS修复
转录:生物体以DNA的一条链为模板,以NTP为原料合成RNA的过程。
转录的模板:
1转录以在DNA的一条链为模板,另一条链为编码链,这样模板链不总在同一条链上,这种转录方式称为不对称转录。
2、DNA双链中按碱基配对规律能指引转录生成RNA的一股单链,称为模板链,也称作反义链。相对的另一股单链是编码链,也称为有义链;有义链与转录生成的RNA序列相同(T对应U)
RNA 种类:
原核生物的转录dingyi
(一)转录起始
1.RNA聚合酶全酶与模板结合-35区,之后移向-10区,跨入转录起始点
2.DNA双链解开通常是(17±1)RNA聚合酶全酶在转录起始区的结合
3.在RNA聚合酶作用下发生第一次聚合反应,形成转录起始复合物
4. 亚基脱落,进入延长阶段
(二)转录延长
5.亚基脱落,RNA–pol聚合酶核心酶变构,与模板结合松弛,沿着DNA 模板前移
6.在核心酶作用下,NTP不断聚合,RNA链不断延长
(三)转录终止:指RNA聚合酶在DNA模板上停顿下来不再前进,转录产物RNA链从转录复合物上脱落下来。
终止子:给予RNA聚合酶转录终止信号的DNA序列
转录单位:启动子与终止子之间的DNA序列1、非依赖Rho (ρ)因子的转录终止2、依赖Rho因子的转录终止
真核生物的转录
一)转录起始
主要特征:真核生物的转录起始上游区段比原核生物多样化,转录起始时,RNA-pol不直接结合模板,依赖众多转录因子,其起始过程比原核生物复杂。
1. 转录起始前的上游区段
顺式作用元件;反式作用因子;转录因子;