Hepcidin检测研究进展

铁的浓度 ， 因此它的浓度高低在一定程度上 反映 了体 内铁代
谢 的 基本 状 况 。血 清 铁 主 要 来 自小 肠 的 重 吸 收 和 巨 噬 细 胞 中铁 的 释 放 ， ｈｐｉｉ 这 两 个 过 程 都 具 有 抑 制 作 用 ， 而 ｅｃｄｎ对
因此过量的 ｈｐｉｉ ｅｃｄ ｎ可导致血清铁浓度的降低 。 ｈ ｐｉｉ 表 达 还 受 多 种 因 素 的 影 响 ， 血 清 铁 浓 度 、 ｅｃ ｎ的 ｄ 如 贫 血 、 氧 、 症 等 ｊ 缺 炎 。炎 症 和肿 瘤 都 可 提 升 ｈｐｉｉ 浓 ｅｃｄ ｎ的
的表达 ， 致血清铁 浓度升 高 ， 现酒 精性肝病 引发 的铁沉 导 出 积 疾病 Ｊ 已有 研 究 表 明 ， 症 反 应 调 节 ｈｐ ｉｎ的 表 达 是 。 炎 ｅｅｄ ｉ 通 过 细胞 因 子 Ｉ一 Ｌ１和 Ｉ－ 导 ， 而 基 本 确 立 了 炎 症 一 Ｌ６介 从
ｈ ｐｉｉ ｅｃ ｎ作为新 发现 的多肽 ， 与炎症反 应和体 内铁 代 ｄ 其
床应用 ， 如可通过 注射 ｈ ｐｉｉ（ ｅｃ ｎ 治疗酒精性肝病引发的铁 沉 ｄ
积 ） 其 抑 制 剂 （ 疗 炎 症 性 贫 血 ） 方 法 实 现 对 特 定 疾 病 或 治 的
的治疗 。相信 随着 ｈｐ ｉｉ ｅｃ ｎ临床检验技术 的进一步完善 ， ｄ
将能为临床疾病的诊治提供更有价值的信息。
２３ 免疫化学法 ．
免 疫 化 学 法 有 斑 点 法 和 Ｅ ＩＡ法 。斑 点 ＬＳ
法 是 先 对 尿 液 中 的 ｈｐｉｉ 取 富 集 （ 尿 液 中 的 肌 肝 对 尿 ｅｅ ｎ提 ｄ 用 量进 行 校 正 ） 然 后 点 在 Ｉ ｏｉ ｎＰ膜 上 ， ， ｍｍ ｂｌ — ｏ 再用 兔抗 ｈｐｉｉ ｅｃｄ ｎ
［］ ２ 郭晓强 ． 帕西 啶与铁代谢 ［ ］ 基 础医学 与临床 ， ０ ，５ ９ ： 海 Ｊ． ２ ５２ （ ） ０
７ ４ ７ ７ ９ －９ ．
［ Ｐｒ Ｖ ｌ ｅＥ Ｖ， ｒ ｇＡ Ｊｅ ａ． ｅ ｅ ｉ， ｒ ａ ｎｉｉ ３］ ａｋＣ Ｈ， ａ ｒ Ｗａｉ ，ｔ １Ｈ ｐｉ ｎ ａｕｉ ｒ ａ ｔ ・ ｏ ｎ ｄ ｎｙ ｍ
Ｉ 一海帕西 啶一 血 清铁 含 量 减少一贫 血 的 发生 顺 序 。 Ｌ 从 这个 过程 可以看 出 ｈｐｉｉ ｅｃ ｎ是其 中一个非 常重要 的 中介 。 ｄ
因 此 ｈｐｉｉ 以作 为 慢 性 病 贫 血 诊 断 的 一 项 重要 指标 ， ｅｃｄ ｎ可 对 于 疾 病 的治 疗 具 有 十分 重 要 的意 义 。 ２ ｈｐｉｉ ｅｃｄ ｎ的检 测 方 法 ｈ ｐｉｉ 血 液 中 含 量 很 低 ， 常 浓 度 约 为 １６ ２ ｅｃ ｎ在 ｄ 正 ０ ． ｎ ／ ｌ 当前 常 用 于 检 测 ｈｐ ｉ ｎ的 方法 有 以下 几 种 。 Ｓｍ 。 ｅｃｄ ｉ ２ １ 定 量 逆转 录一 ． 聚合 酶链 反应 （ Ｔ Ｐ Ｒ） 用 Ｒ Ａ 提取 试 Ｒ —Ｃ Ｎ
要 的是 该 方 法 还 可 以 确 定 尿 液 中 ３种 ｈ ｐｉｉ（０、２和 ２ ｅｃ ｎ ２ ２ ｄ ５ 氨基 酸残 基 ） 相 对 比例 ， 而 更 有 利 于 理 解 ｈｐｉｉ 作 的 从 ｅｅ ｎ的 ｄ 用 机 制 。Ｓ Ｌ Ｉ Ｏ — Ｓ法 快 速 、 单 、 通 量 ， 合 大 规 模 Ｅ Ｄ． ＦＭ Ｔ 简 高 适 的 临 床研 究 （ 别 是 炎 症 性 贫 血 ） ｏ ｓｇ 等 用 该 法 检 特 。Ｔ ｍｏｕｉ 测 了血 清 中 ｈ ｐｉｉ 含 量 ， 现 其 浓 度 与血 清 中 Ｉ－ 浓 ｅｃ ｎ的 ｄ 发 Ｌ６的 度 成 正相 关 ， 为 重 要 的 是 还 实 现 了 半 定 量 ， 此 有 利 于 对 更 因 血 清 中 ｈｐｉｉ 度 进 行 初 步 的 判 断 。 该 法 的 不 足 之 处 在 ｅｃ ｎ浓 ｄ
度 Ｊ最 终 使 小 肠 对 铁 的 吸 收 和 巨噬 细 胞 对 铁 的 释 放 均 减 ， 少 ， 低 了血 清 铁 的含 量 而 造 成 贫 血 的发 生 ， 种 情 况 被 称 降 这
于对设备要求较高 ， 难在基层 医院应用 。 很
３ 研 究 展 望
为慢性病贫血或炎症性贫血 。相反乙醇则抑制 了 ｈｐ ｉ ｎ Ｊ ｅｃ ｉ ｄ
Ｌｔ，００，８ （ －） ４ ・ ０ ｅｔ２０ ４ ０ ２３ ：１７１ ． ５
剂盒进行 肝 脏 全 Ｒ Ａ 提 取并 定 量 ； 计特 异 性 引 物扩 增 Ｎ 设 ｈ ｐｉｉ ｍ Ｎ 常 选 择 １ＳＲ Ａ １ 或 Ｂａｔ ｌ 作 为 内 ｅｅ ｎ的 Ｒ Ａ， ｄ ８ Ｎ ］ ３ — ｉｌ ｃｎ
文 编 ：０７ Ｘ ０ ｝－７０ 章 号 １１６ （０ ００４２ ０ － ２７ ６４ － ４ Ｈ ｐ ｉｉ 测 研 究 进 展 ｅ ｃ ｎ检 ｄ
中 分 号Ｒ ６ 图 类 ：４ １ ４．
文 标 码Ａ 献识 ：
・ 述 与进 展 ・ 综
郭 晓 强 王利青 黄 凯 解放军白求恩军医学院 ａ生化教研室，． ， ， （ ． ｂ检验教研室， 石家庄 ００８） ５０１
参 考 文献 ：
［ ］ ｒｕｅＡ， ｅｔ Ｓ Ｍ ｇｒ Ｈ Ｊｅ ａ． Ｅ Ｐ１ ｏｅ ｈｇｌ ｄｓｌ １ Ｋａｓ Ｎ ｉ ， ａｅｔ ，ｔ １Ｌ Ａ 一，ａｎｖｌ ｉ ｙ ｉ ・ ｚ ｈ ｕ ｉ ・ｏｄｄｈ ｍ ｎｐｐｉ ， ｘｉｉ ｎｉ ｒｂａ ａｔ ｉ Ｊ ． Ｅ Ｓ ｆ ｅｂｎ ｅ ｕ ａ ｅｔ ｅ ｅｈｂｔ ａｔ ｃｏｉ ｃｖｔ［ ］ Ｆ Ｂ ｄ ｄ ｓ ｍｉ ｌ ｉｙ
ｕ ａｏ ｙ ｐ ｐ ｉ ｅ ｈ ｐ ｉ ｉ ｓ ｒ ｇ ｌｔ ｄ ｂ ｎ ｍｉ ，ｈ ｐ ｘ ａ ａ ｄ ｉ ｆ ｍ— ｌｔ ｒ ｅ ｔ ｅ ｃｄ ｎ ｉ ｅ ｕ ａｅ ｙ ａ ｅ ａ ｙ ｏ ｉ ， ｎ ｎ ａ ｄ ｌ
［４］ ｅ ｅｈＥ， ｉ ｒ ， ａ ａａ ｅ ａ．Ｌ６ｍ ｄａ ｓ ｙｏｅ ｅ ｉ ｏ １ Ｎ ｍ ｔBaidu Nhomakorabea Ｒｖ ａＳ Ｇ ｙ Ｖ，ｔ １Ｉ－ ｅ ｉｅ ｐｆｒ ｍａ ｆ ｅ ｂ ｎ ｔ ｈ
ｉ ｆａ ｎ ｍｍａ ｉｎ ｂ ｎ ｕ ｉｇ ｔ ｅ ｓ ｎ ｈ ｓｓ ｏ ｅ ｉ ｎ ｒ ｇ ｌ ｔｒ ｏｍｏ ｅ ｌ ｔ ｙ ｉ ｄ ｃｎ ｈ ｙ ｔ ｅ ｉ ｆｔ ｒ ｕ ａｏ ｈ ｒ ｎ ｏ ｈ ｏ ｅ ｙ
多抗 进行 检测 ” 。Ｋ ｌ ｓ １ ｕａ ｉ ｋ ｚ等 将病 人血清 用 Ｅ ＩＡ法 ＬＳ 检测 ， 择 的抗体 是兔 抗 ｈｐ ｉｉ 选 ｅｃ ｎ多抗 ， 人 工合 成 的纯 ｄ 用
ｈｐｉｉ 作 标 准 曲 线 。 这 两 种 方 法 的不 足 之 处 在 于 海 帕 西 ｅｅ ｎ制 ｄ 啶分 子量 较 小 ， 备 的 多 抗 特 异 性 差 ， 当 前 还 缺 乏 特 异 性 制 而
ｅｏ ｉ ｅｔ ｅｓｎｈｓ ｅ ｎｔｅｌｅ ［ ］ ＪＢｏ Ｃ ｅ ２ ０ ，７ ｒｂａ ｐｐｉ ｙｔｅｉ ｄ ｉ ｈ ｉ ｒ Ｊ ． ｉ ｈ ｍ，０ １ ２６ ｌ ｄ ｚ ｖ ｌ
（ １ ：８ ６７ １ ． １ ） ７ ０ －８ ０
泳和转膜 ， 使用同位素标记的 ｈｐｉｉ ｃ Ｎ ｅｃｄ Ｄ Ａ探针进行 检测 ， ｎ 评 价肝脏 ｈ ｐｉｉ ｅｃ ｎ的表达情 况 。此 法 的缺 陷与定 量 Ｒ — ｄ Ｔ
参。该方法 的准确性相对较高 ， 动物实验研究 中最常用 的 是
方法 ， 最大弊端是无法 检测血 液 和尿液 ， 而肝脏 组织 的获得
较 为 困难 ， 法 应用 于 常 规 临 床检 验 。 无 ２２ ｎｒ ｅｎ印 迹 ． ｏ ｈｒ ｔ 首 先 提 取 肝 脏全 Ｒ Ａ， 后 进 行 凝 胶 电 Ｎ 然
Ｐ Ｒ类 似 。 Ｃ
［ ］ ａｚ ． ｅｃｄｎｉ ｉ ｎｍｅ ｂｌｍ［ ］ Ｃ ｒ Ｏ ｉ ｅ ｔｌ２０ ４ Ｇ ｎ Ｈ ｐｉｉ ｒ ｔ ｏｉ Ｊ ． ｕｒ ｐｎ Ｈ ｍａ ，０ ４， Ｔ ｎ ｏ ａ ｓ ｏ
１ （ ： ５ ．５ ． ４） ２ １２ ４ １
： 基 金 项 目 ： 军 十 一 五 青 年 基 金 （６ Ｏ７） Ｉ ： 全 ｏＱ ９ 。
维普资讯 http://www.cqvip.com
４４ ７
临床检验杂志 ２０ ０ ７年第 ２ ５卷第 ６期
Ｃ ｉｅｅ ｏｒａ ｏ ｌ ｉ ｌ ａｏａ ｒ ｃ ｎｅ２０ ， ｏ ２ ，ｏ６ ｈｎｓ ｕｎｌ ｆ ｉ ｃ ｂ ｒｏｙＳｉ ｃ ，０ ７ Ｖ １ ５ Ｎ ． Ｊ Ｃ ｎａＬ ｔ ｅ ．
调节激素—— ｈｐ ｎ 海 帕西 啶） ｅｃ （ 就是重要 的一种 。
１ ｈｐ ｉ ｎ检 测 的 意 义 ｅｃ ｉ ｄ ｈｐｉｉ 由肝 脏 合 成 并 分 泌 的 一 种 分 子 量 （ ｅｅ ｎ是 ｄ ＭＷ ） 小 较 的 多 肽 （ 熟 形 式 Ｍ ＜３０ ０ ， 是 合 成 一 个 含 有 ８ 成 Ｗ ０ ） 先 ０多 个 氨 基 酸 的 ｐｏｈｐ ｉ ｎ 前 海 帕 西 啶 ） 该 多 肽 Ｎ 端 含 有 一 段 ｒ—ｅｃ ｉ（ ｄ ， 信 号 肽 ， 过 翻 译 后 加 工 最 终 生 成 含 有 ２ 、２或 ２ 经 ０２ ５个 氨 基 酸 残 基 的 成 熟 ｈｐ ｉ ｎ 以 ２ ｅｃｄ ， ｉ ５个 氨 基 酸 残 基 最 为 常 见 。 ｈｐｉｉ 一 种 主 要 的 铁 内 稳 态 调 节 激 素 ， 有 效 调 节 血 清 ｅｃｄ ｎ是 可
谢 状 况 存 在 着 密 切 的联 系 ， 在基 础 研 究 和 临 床 应 用 方 面具 有
十分重要 的价值 ， 当前 的检测方 法还存 在一些 不足 ， 但是 已 经开始 引起 注 意 ， 许多 实验 室都 在 进行 这方 面 的探索 。
因为 只有 准 确 掌 握 了 ｈｐ ｉ ｎ的 浓 度 ， 可 以 更 好 的进 行 临 ｅｃ ｉ ｄ 才
关 键 词 ： 帕 西啶 （ ｅｃ ｉ） 铁 代 谢 海 ｈｐ ｉ ｎ ； ｄ
铁是一种维持生 命健康 的重要 微量 元素 ， 细胞呼 吸、 在 氧 的运输 、 物质代谢 、 基因表达 、 Ｎ Ｄ Ａ复制和修 复等细胞过程 中均发挥着重要 的作 用。铁在 生物体 内受 到多种 因素 的调
节 以维 持 在 一 个 相 对 稳 定 的 范 围 内 ， 中 ２ ０ 其 ０ ０年 发 现 的铁
作者简介 ： 晓强 ，９７年生 ， ， 郭 １７ 男 硕士 ， 讲师 ， 主要从事生物化学教学和研究工作。
维普资讯 http://www.cqvip.com
临 床 检验 杂 志 ２ ０ 第 ２ ０７年 ５卷第 ６期
Ｃ ｉｅｅＪｕｎ ｌ ｆ ｌ ｉ ｌ ａ ｏ ｔｒ Ｓｉ ｃ ，０ ７ Ｖ １ ５，ｏ６ ｈ ｓ ｏｒａ ｏ Ｃｉ ｃ ｂｒ ｏ ｃ ｎｅ２ ０ ， ｏ ２ Ｎ ． ｎ ｎ ａＬ ａ ｙ ｅ ．
ｉ ｆｎｔ ｎ Ｊ ． ｌ ｄ ２０ １６ ２）７ ６７ ８ ｃ ｕ ｃｏ ［ ］ Ｂｏ ，０５，０ （ ：４ －４ ． ｉ ｏ
４５ ７
［ ］ ｉ ｌｓ Ｃ ａｖｔ Ｖａｔ Ｌ， １Ｔ ｅｇｎ ｎｏｉｇｔｅｉ ｎｒｇ ５ Ｎｃ ａ ｈｕ ｅ Ｃ， ｉ ｅ ｅ ａ． ｈ ｅｅｅ ｃｄｎ ｏ — ｏ Ｇ， ｔ ｔ ｈ ｒ ｅ
的单抗可以利用 ， 因此精确性 尚待提高。 ２ ４ 质谱法 ． Ｋ ｍｎ 等 使用 Ｓ Ｌ Ｉ Ｏ — Ｓ仪 检测尿液 ｅ ａ Ｅ Ｄ — ＦＭ Ｔ
中 的 ｈｐｉｉ 量 ， 果 与免 疫 化 学 的 斑 点 法 获 得 的结 果 非 ｅｃ ｎ含 ｄ 结
常一致。该方法 的优点在于克服 了利用抗 体的难题 ， 更为重