化学发光免疫技术与时间分辨技术的异同点

化学发光免疫技术与时间分辨技术的异同点概念

优缺点

优点

化学发光免疫分析法（CLIA）

➢单个样本检测速度快，适合做急诊；

➢灵敏度较高；

➢自动化程度高；

时间分辨荧光免疫技术（TRFIA）

➢发射光和激发光有较大的STOKES位移——高特异性

➢长寿命荧光，降低其他物质的荧光干扰——高灵敏度

➢半衰期长达几十万年，试剂受干扰小——高稳定性

➢荧光寿命长，易于自动化

➢重复性好

➢标准曲线范围宽

➢结果可靠

与其它技术的相对优势：

（1）、是现有的免疫检测方法中灵敏度最高的

（2）、是现有的免疫检测方法中稳定性最好的

（3）、多标记检测是目前所有免疫检测技术中独一无二的缺点

化学发光免疫分析法（CLIA）

➢发光过程短

➢本底较高

➢仪器故障率较高

➢试剂稳定性差

➢检测精度不高

试剂价格高

时间分辨荧光免疫测定（TRFIA）

➢测量方式复杂

➢仪器成本及维护费用高

➢环境及样品中同元素可导致本底干扰等

类型原理及试剂发光类型

化学发光免疫分析（CLIA）用化学发光物质直接标

记抗原或抗体组成

吖啶酯

（acrydinum esters）

时间分辨免疫荧光分析（TRFIA）* 是用三价稀土离子及其

螯合剂作为示踪物

铕（ Eu3+ ）、铽（ Te3+ ）

及钐（ Sm3+ ）、镝

（ De3+ ）

化学发光与时间分辨荧光方法学比较

化学发光时间分辨荧光发光效率1% 95%

重复检测不可重复可无数次重复

本底噪声干扰大零本底

灵敏级数10 -15 10 -18

标记物大分子化合物原子

标记位点1个/抗体可达20个/抗体

标准曲线稳定2~4周稳定达一年以上

多标记无有，最多可达四个标记科研开发无有

化学发光免疫技术原理图

时间分辨免疫技术原理图

镧系元素的荧光光谱stokes位移示意图