2018年艾滋病检测点培训课件

七、胶体金快速试剂实物
HIV检测中的保密的认识
HIV检测前后咨询中获得的隐私 HIV检测结果 与专业人员的讨论 在各种场合中对受检者的讨论（包括会议）
档案记录与保存
受检者，家属，朋友和单位
传报医院
匿名检测系统能确保保密，但不利于医学管理
初筛结果处理
--- 初筛（-） 出具“HIV抗体阴性”报告 初筛（+） 可出具“HIV抗体待复检” 的报告，但不能出具阳性报告。 --- 送复检
采集标本

取无菌注射器，按牢针头，使针头斜面与 针筒刻度平行，并查看有无阻塞和漏气。 采用一次性注射器还应注意包装是否密封， 有无过期，否则不得使用。
采集标本

嘱病人紧握拳头，使静脉显露。左手拇指 固定穿刺部位下端，右手持注射器，使针 筒刻度向上，先以约30º 角度沿静脉正面进 针，快速穿过皮肤刺入静脉中央。见回血 后，右手固定注射器，用左手缓缓抽出注 射器针栓，至所需血量后，解除压脉带， 放松拳头，以消毒棉签压住穿刺孔，拔出 针头。
重复检测
--- 职责 HIV筛查实验室 或 HIV确认实验室
[筛查实验室拟作复检，加强自我质量控制]
--- 试剂
• 选择：两种不同原理或厂家 • 品种：
酶联免疫试剂 快速检测试剂
重复检测结果处理
---复检（-）出具“HIV抗体阴性”报告
复检（+） 可出具“HIV抗体待复查”的 报告，但不能出具阳性报告。 ---送确认
4．当样品中抗体含量极高时，质控窗条 带有所减弱，但此结果仍视为有效结果 (若需进一步确认，可用HIV抗体阴性血适 量稀释后再作测试)。 5．本品检测阳性结果须进行确证试验确 证。 6．测试过程中所接触血液样品，一律视 为HIV阳性操作。 7．3 0分钟后观察的结果无效。
---流行 最早在美国发现 欧洲 非洲 20世纪 80年代中后期传播到亚洲 ---感染的自然发展过程 • 窗口期 受到HIV感染到可以检测出艾滋病抗 体的这一段时间 特点：轻微的一过性感冒症状 在窗口期内检测不出抗体 感染（HIV-1）2-3周可检出P24抗原 感染者的血液、精液、阴道分泌物等 体液中，含有大量HIV
2003.
全国艾滋病检测工作管理办法
----- “办法” 2004.12全国艾滋病检测技术规范（正式） 2009 全国艾滋病检测技术规范（修订版）
HIV感染的实验诊断
检测方法
HIV培养，核酸测定，P24抗原检测，血清抗体测定
金标准
血清抗体测定，HIV感染后平均25天检出，待12周时
四、结果判断
阳性结果：在试纸条／板的检测窗 和质控窗位置上各出现一条紫红色条 带。 阴性结果：仅在试纸条／板的质控 窗位置上出现一条紫红色条带。 无效结果：在试纸条／板的检测窗 和质控窗位置上均未出现紫红色条带 为试验无效。

五、实验结果判断示意图
六、注意事项
1．被检样品、试剂应在室温2 O℃左右平衡30分钟 后检测。被检品应为新鲜样品。如发现试纸条／板 密封袋破损则需废弃。 2．高血脂和高胆红素样品对检测结果无显著性影 响，但溶血样品，尤其是大量溶血样品对检测结果 有显著影响。 3．当质控窗与检测窗上均不出现紫红色条带时，应 重新测试，如果问题仍然存在，应立即停止使用此 批号产品并与当地供货商联系。
• •
填写复查送样单，两人签字 原样或新样连同送样单送确认实验室
确认实验
--- 职责 确认实验室
---检测方法 • 免疫印迹实验（WB） • 线性免疫实验（LIA） • 免疫荧光实验 （IFA）
确认结果解释
1.确认阴性（-）进行阴性咨询 2.确认阳性（+）进行阳性咨询 3.不确定结果按照“全国艾滋病检测技 术规范”的规定进行随访
快速检测
明胶颗粒凝聚实验 斑点ELISA 斑点免疫胶体金 艾滋病唾液检测卡
Baidu Nhomakorabea集标本
血液标本
一般采集肘正中静脉血液3-5ml 婴幼儿可选择颈外静脉
采集标本
以肘静脉取血为例。选择适宜静脉，在上臂
扎上压脉带。先用25g/L碘酊棉签于欲穿刺处 皮肤从内向外做环形消毒，待干后再用 0.75L/L乙醇棉签以同样方式擦去碘迹。
--- 严格遵守实验室标准操作程序（SOP），按
照试剂盒说明书操作，注意防止样品间交叉污
染
检测程序
--- 筛查试验
--- 重复检测
--- 确认试验
HIV抗体筛查
---职责
经省卫生行政部门指定验收专家组，验收合格的HIV筛
查实验室
---方法、试剂
酶联免疫实验：第三代双抗原夹心法试剂（ELISA）
采集标本
取下针头，将血液沿管（瓶）壁缓慢注入 容器内，待血液自行凝固。血块收缩后， 即可分离出血清。如需全血或血浆，则将 血液注入事先准备的抗凝管（瓶）中，轻 轻混匀，防止凝固，即为抗凝血。经适当 离心可分离出血浆。血清和血浆的主要差 别是，血清中无纤维蛋白原。 采样完毕后应同时填写采样登记表
HIV实验室检测培训
2018.7.10
艾滋病基础知识
---定义 艾滋病（AIDS）：由人类免疫缺陷病毒 （HIV）所引 起的一种以辅助性T淋巴细胞 （CD4+T淋巴细胞）数量减少导致免疫功能 减退为主要特征的严重传染性疾病。 ---来源 20世纪40-50年代的非洲，HIV病毒可能由猴 子体内的猿免疫缺陷病毒演变而来
• 填写复检检测单，两人签字 • 重新采集受检者的血样 • 原样和新样连同送样单 • 筛查实验室复检 • 做好检测前后咨询
HIV筛查实验室 确认实验室
样
品 筛查试剂
筛查检测
阳性反应 原有试剂＋另一 种筛查试剂 阴性反应
重复检测
均阳性反应 一阴一阳 均阴性反应 阴性报告
送初筛实验室 进行复检
检测点筛查试验流程图
二、试剂盒组成
1. HIV(1／2)抗体胶体金试纸条／板50人
份／盒， ( 5条)／lO袋。
2. 说明书1份。
3. 稀释液l份， 4ml／瓶。
三、操作步骤
根据试剂盒说明书进行操作！ 一般操作步骤： 1．将密封袋打开，取出所需试纸条／ 板。 2．样本检测：取4 O ul待检样本加在试 纸条／板的加样区，再在近加样区上方加1 滴稀释液。 3． 3 0分钟内观察并记录试验结果。

标本处理
将采集好的血液标本放入离心机3000转/分离
心5分钟 取出标本，用移液器（或一次性滴管）将血 清移入血清储存管中（1.5ml） 检测完毕后将血清储存管盖紧，放入冰箱冷 冻室保存至少2个月
胶体金快速检测技术
一、原理

本品采用胶体金免疫层析技术，在玻璃纤维膜上预 包被金标记HIVgp 160和gp3 6抗原，在硝酸纤维膜检 测线和质控线上分别包被HIVgp41、gp3 6混合抗原和 抗HIVgp41抗体，当检测进行时，样品中HIV抗体可与 金标记的HIV抗原结合形成复合物，由于层析作用,使 复合物沿试纸条向前移动。若样品中含有可被检测的 HIV抗体，则与检测线预包被的HIV抗原结合形成“金 标记HIV抗原-HIV抗体一HIV包被抗原"复合物凝聚显 色；若样品中没有HIV抗体或HIV抗体的含量低于检测 限时，则不形成复合物而不显色。
• 无症状潜伏期
8-10年 特点：HIV抗体+ • 临床症状出现 平均10年的潜伏期后出现 • 艾滋病病人 临床症状出现后1年发展为病 人 • 死亡 无抗病毒治疗情况下，半年到2年的 时间，病人死于艾滋病
HIV抗体（-） 4-8周 HIV抗体（+），无症状
有症状
HIV抗体+
艾滋病
8—10年
1年
0.5—2年左右
几乎全检出
HIV抗体检测
两个阶段（筛查和确认） 三个程序（初筛－复检－确认） 2＋3标本（血清，全血，唾液，尿液，滤纸干血）
HIV筛查试剂要求和种类
--- 要求
SFDA 中检所 CDC 使用 采供血机构 注册批准 批批检合格 临床评估质量优良 有效期内 必须使用HIV-1/2
--- 种类
• 酶联免疫试剂（EIA）
• 颗粒凝集试剂（PA） • 其它快速试剂（RT）
检测注意事项
--- HIV抗体检测工作应该按照《全国艾滋病
检测技术规范》，在合格的艾滋病检测实验室
进行 --- 为了减少检测的错误和误差，应采取严格的 质量保证、质量控制和质量评价措施 --- 注意实验室生物安全防护和职业暴露预防
达到保证措施的必要条件
贯彻有关HIV检测的法规（实验室网络、人
员、仪器设备、房屋等条件）
有效的检测方法和检测试剂
常规质量控制和质量保证
艾滋病检测工作管理文献
1990. 全国HIV检测管理规范（试行）
1997.9.
2004.8.
全国艾滋病检测工作规范
全国艾滋病检测技术规范（试行） ----- “规范”
个体感染艾滋病病毒后的自然发展过程
HIV检测是艾滋病防治的一项 重要保证措施
明确HIV感染者（诊断）
及早医学干预 合宜的治疗指标和效果评估 疫苗效果考评
发现HIV阴性者
做好减少危险（不安全性行为和药瘾者）的咨询
开展VCT的基础
流行病学监测和专题研究 公共卫生规划（政策形成、保险、控制等） 职业保护