ENA多肽抗体检测及其临床意义

ENA多肽抗体检测及其临床意义
1 临床资料1.1 材料与方法:本文按《美国风湿性疾病概要》对各种风湿病的诊断标准[1],诊断为风湿病117例,其中系统性红斑狼疮(SLE) 32例, 混合性结缔组织病(MCTD) 15例,干燥综合征(SS) 10例,进行性系统性硬化症(PSS) 8 例,多发性肌炎(PM)、皮肤炎(DM) 7例,类风湿性关节炎(RA)和强直性脊柱炎(AS) 45 例, 3例RA合并AS, 1例SLE与SS、RA相重叠。

设正常献血员30例作为对照。

受试对象均于晨起空腹采血2ml,采用免疫印迹方法, 应用深圳爱利国公司生产的试剂盒(一种制备好的醋酸纤维薄膜,上有已按分子量排列好的ENA多肽抗原),用受试对象10μl血清,通过与抗体反应的多肽抗原(显色带)的数量与分子量,不仅可识别抗原的表位,并可检测7种自身抗体(抗Sm、抗SSA、抗SSB、抗U1RNP、抗SCL-70、抗JO-1、抗核糖体抗体),以阳、阴性报告结果。

1.2 结果:见附表。

附表风湿病ENA多肽抗体检测阳性例数ENA多肽抗体谱SLE (n=32)(%) MCTD (n=15)(%) SS (n=10)(%) PSS (n=8)(%) PM/DM (n=7)(%) RA+AS (n=45)(%) 正常对照(n=30)(%) 抗Sm 8(25.0) 0(0) 0(0) 0(0) 0(0) 0(0) 0(0) 抗U1RNP 13(40.6) 15(100.0) 0(0) 3(37.5) 2(28.6) 0(0) 0(0) 抗SSA 8(25.0) 3(20.0) 7(70.0) 2(25.0) 1(14.3) 1(14.3) 0(0) 抗SSB 4(1
2.5) 1(6.7) 6(60.0) 1(12.5) 0(0) 1(2.2) 0(0) 抗SCL-70 0(0) 0(0) 0(0) 3(37.5) 0(0) 0(0) 0(0) 抗JO-1 0(0) 0(0) 0(0) 0(0) 1(14.3) 0(0) 0(0) 抗核糖体4(12.5) 0(0) 0(0) 0(0) 0(0) 0(0) 0(0)
2 讨论所谓ENA是指盐水中溶解的一部分核抗原, ENA多肽抗体是风湿病患者血清中产生的针对核内可提取性核抗原的相应的自身抗体。

本文应用免疫印迹技术通过抗原抗体反应可以检测到患者血清中的自身抗体,从而帮助风湿病的诊断和治疗。

本文结果抗Sm抗体仅见于SLE患者,虽然抗Sm抗体在SLE中阳性率不高(25.0%), 但其资料表明,抗Sm抗体阳性的患者中94% 皆为SLE或SLE重叠综合征,可见其特异性强,对临床诊断具有重要意义。

有些不典型、轻型或早期的SLE,按SLE一般诊断标准尚不足以确诊,但若抗Sm抗体阳性,则应引起高度重视。

因此,我国1982年风湿病学术会议上制订的SLE诊断标准中,已将此列为对不能确诊病例的一项补充检查。

另有人观察,一些病例抗核抗体,狼疮细胞及抗ds-DNA 抗体均阴性,但抗Sm抗体阳性,这些病例经全面分析及随访,是SLE无疑,说明抗Sm抗体测定有助于患者的回顾性诊断。

本文抗Sm抗·280·体阳性的8例SLE患者中,活动期3例,非活动期5例,说明经治疗后抗Sm抗体持续阳性,不能做为病情活动性的一个指征,抗Sm 抗体阳性与抗Sm抗体阴性的SLE相比较,前者雷诺现象发生率高,肾炎发生率低,肾活检示抗Sm抗体阳性患者即使发生肾炎,病理改变也轻,很少为弥漫性增殖性肾小球肾炎,这与Sm抗原试管内有抑制DNA—抗DNA反应的作用有关[3]。

与抗Sm抗体不同,抗U1RNP抗体见于包括SLE、SS、PSS等多种风湿病患者,阳性率约28.6%~40.6%,最主要的见于MCTD 患者,阳性率高达100%。

一般诊断MCTD主要依据临床表现及高滴度的抗U1RNP抗体。

有关抗U1RNP抗体的确切病理作用尚不清楚,但MCTD患者/血中免疫复合物的检出率高, SLE患者可见抗RNP抗体与肾小球病理沉着,从而提示抗RNP抗体可能以IC形式促进了免疫损伤。

本文观察的SLE患者中,抗U1RNP阳性的13例中4例发生手肿胀, 2例发生雷诺现象,而抗U1RNP抗体阴性的患者无1例发生此二种症状,其机理有待探讨。

抗SSA与抗SSB抗体在正常人均阴性, 在SLE、MCTD、SS等患者中均可检出,但抗SSA在SS中的阳性率为70.0%,明显高于在SLE及其它风湿病2.2%~25.0%的阳性率; 抗SSB抗体在SS中的阳性率为60.0%,在其它风湿病为2.2%~12.5%,前者亦明显高于后者,从而说明抗SSA、抗SSB对SS有较高的特异性,抗SSB抗体特异性高于抗SSA。

本文结果与董怡等[4]的结果
大致相同。

SS是一种以外分泌腺体为靶器官的自身免疫疾病,如不做特异性检测,则不少患者可被漏诊,因少部分患者无口眼干燥症状或不严重,未引起注意。

国外有人指出[5],抗SSA 和抗SSB抗体测定对诊断SS有很大帮助,患者常表现为不能分类的结缔组织病,检出抗SSA、抗SSB后通过追问口眼症状和进一步检查,才明确了SS 的诊断,本文7例中4例属此情况。

文献报道, 除SS外,抗SSA、抗SSB最常见于SLE。

Re- ichlin等报道66例抗核抗体阴性的SLE,其中41例抗SSA阳性,这类患者抗SSA的检测不仅对诊断有参考价值,且可能对探讨SLE 发病机制有一定意义。

在2例SLE中观察到随着病情恶化和肾炎出现,血清抗SSA减少, 而肾脏洗脱液中可检出SSA与SSA复合物。

除了以上/gaozhongjiaoxue/常见的几种风湿病及其相应的自身抗体外,抗SCl-70抗体只存在于PSS患者血清中,其阳性率为37.5% ,抗JO-1抗体见于PM/DM患者,阳性率为14.3%,且主要是DM、PM的阳性率极低;抗核糖体抗体只见于SLE患者,阳性率为12.5%,这些都是特异性极高的抗体,在其它风湿病及健康人血清中皆阴性,故它们可作为相应风湿病的标记抗体。

对诊断未明,但有下列症状,需排除或确诊何种风湿病时,应查ENA多肽抗体谱:①原因不明的发热伴关节或肌肉疼痛;②淋巴结肿大或白细胞减少、血小板减少或溶血性贫血;③皮疹或不典型面部红斑,光敏感;④Raynaud' s Phenomenon;⑤经常口干、眼干或反复腮腺炎;⑥易口腔溃疡或大量脱发;⑦吞咽困难、食管蠕动减弱;⑧关节肿痛;⑨青年女性偏头痛;10荧光抗核抗体阳性。