大肠杆菌的培养和分离ppt课件

② 方法:
a. 煮沸消毒法
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（2）灭
菌
① 概念：使用强烈的理化因素杀死物
体内外所有的微生物，包括芽孢和
孢子。 ② a方.灼法烧：灭a菌 灼烧灭菌 b注干意热适灭用菌范围c
高压蒸汽灭菌
微生物的接种工具 (接 种环、接种针)或其 他金属用具直接在火 焰的充分燃烧层灼烧
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b. 干热灭菌 160－170℃ ；1－2h
(3)接种扩大培养：靠近酒精灯火焰将大 肠杆菌接种到三角烧瓶的液体培养基中， 三角烧瓶在37℃摇pp床t课件振. 荡培养12h。 13
单菌落 ppt课件.
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实验讨论
实验完成后，接触过细菌的器皿应如
何处理？
实验完成后，所有接触过细菌的器皿都必须 先高压灭菌后再洗涤，特别是培养基，有可
能被有害菌体污染，在培养繁殖后，大量有
实验材料：
(1)50mlLB液体培养基：蛋白胨0.5g、酵母
提取物0.25g、NaCl 0.5g、加水50ml。
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实验步骤
(1) 灭菌：将配制好的50mlLB液体培养 基和50mlLB液体培养基分别装入两个 250ml
的三角瓶中，加上封口膜，用高压锅进 行灭菌。
(2) 制平板：在酒精灯火焰旁将固体培养 基分别倒在4个培养皿中，使培养基铺平 皿底部，待凝，使之形成平面。
如:培养厌氧微生物时需要提供无氧的条件
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(三)无菌
技1、术获得纯净培养物的防止关外键来:杂菌的入侵
2、无菌技术 的四个方面(参看教材20
页)
3、消毒与灭菌
(1)消毒： (不包括芽孢和孢子) ① 概念：使用较为温和的物理或化学方
法仅杀死物体表面或内部一部分对人
体有害的微生物。包括芽孢和孢子吗？
1、斜面保藏 （临时保存）
2、甘油保藏 （长期保存）
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实验1：大肠杆菌的培养和分离
设备及用品：
灭菌锅或高压锅、250ml的三角瓶、封口 膜和橡皮圈、直径90mm的培养皿、接种 环和玻璃三角刮刀、恒温培养箱、摇床、
酒精灯和超净台、一次性塑料手套、装
有酒精棉球的广口瓶、镊子、有棉塞的 试管（15mm×120mm）5支
分微小.通常要用光学显微镜或电子显
微镜才能看到，有病 的毒甚至没有细胞结 构.且体内一般不细含有菌 叶绿素.不能进 2.微行生光物合包作括用五类. 放线菌
真菌
ppt课原件.生动物
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(二)培养基
1.分类(按物理形态分)
(1)液体培养基
(2)固体培养基
①常用的固体培养基: 琼脂固体培养基.
②微生物在固体培养基 表面生长,可以形成 肉眼可见的菌落.
能耐高温的需要保持干 燥的物品( 玻璃器皿)
c.高压蒸汽灭菌 100kPa 121℃ 15-30min
通常用于培养基的灭菌
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二、实验操作
（一）制备牛肉膏蛋白胨固体 培养基
计算－称量－溶化－灭菌－倒 平板
（二）纯化大肠杆菌
接种方法有：
平板划线法和稀ppt课释件. 涂布平板法 10
三、课题延伸：菌种 的保藏
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2.培养基内所含的基本物质 (1)水 (2)碳源 (3)氮源 (4)无机盐
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3.培养基内所需的其他 (1)pH值条件
如:培养霉菌需酸性、培养细菌需中性或微碱 性
(2)特殊营养物质---- ? 生长因子
如：培养乳酸杆菌需要在培养基中添加维生 素
(3)氧气的含量
实验1 大肠杆菌的培养和 分离
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实验目的：
1.进行大肠杆菌的扩增，利用液体培养基进 行细菌培养的操作。
2.进行大肠杆菌的分离，用固体平面培养基 本进行细菌的划线培养。
3.说明大肠杆菌培养的条件和实验原理。
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一、基础知识
(一)微生物:
1.特点：结构都相当简单,个体多数十
害菌体影响人畜健康，也污染环境，因此必
须高压灭菌。使用后的废弃物也要高压灭菌
后再抛弃。对于取样器的取样头，通常是灭 菌后在超声波清洗器中加洗衣粉洗涤纶30 min ,再用清水洗净，仍可再用。封口膜也可 再用。
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