MTT方法检测细胞毒性实验案例介绍
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MTT方法检测细胞毒性实验案例介绍
原理：MTT分析法以代谢还原噻唑蓝3-(45-dimethylthiazol-2-yl)-25-diphenyl tetrazolium bromide (MTT)为基础。活细胞的线粒体中存在与NADP相关的脱氢酶，
可将黄色的MTT还原为不溶性的蓝紫色的甲月赞（Formazan），死细胞此酶消失，MTT不被还原。用DMSO溶解Formazan后可用酶标仪在570nm(450nm)波长处检测
光密度。
操作步骤：在96孔板加入细胞100μL/孔（约1×104），置37℃ 5%CO2细胞培养箱
培养24小时；加入适当浓度的受试化合物；将96孔板在37℃，含5% CO2空气及100%湿度的细胞培养箱中孵育适当时间；将5×MTT用 Dilution Buffer稀释成1×MTT；每孔加50μL 1× MTT，在37℃孵育4小时，使MTT还原为甲月赞；吸出上清液，每孔加150μL DMSO使甲月赞溶解，用平板摇床摇匀；酶标仪在570nm波长处
检测每孔的光密度。
结果分析：细胞存活率% =（加药细胞OD-本地OD/对照细胞OD-本地OD）×100％。注：本底OD值（完全培养基加MTT，无细胞）
0h 570nm波长各孔OD值：