灵芝多糖类(Polysaccharides)成分

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灵芝多糖类(Polysaccharides)成分

作者:灵芝发布于:2014-8-7 10:46 分类:简介

多糖类(Polysaccharides)成分

多糖类是灵芝属的重要生物活性物质之一。药理研究表明:从不同灵芝种类中分离出的多糖均具有抗肿瘤作用、免疫调节作用、降血糖作用、降血脂作用、抗氧化作用及抗衰老作用等,是当前一个很热门的研究课题。

全世界灵芝属种类很多,就其多糖类研究主要以灵芝(赤芝、紫芝)研究居多,树舌、松杉灵芝(松杉树芝)虽有研究,相对较少,以日本、中国(台湾)、印度尼西亚、韩国、新加坡等研究较多,发展不平衡。总的来说,多糖研究的广度、深度不如三萜类化合物。

灵芝多糖的药理活性与单糖连接方式、位置有关,通常单糖以1→3、1→6糖苷键连接的多糖具有药理活性,而纯1→4糖苷键连接的则不显示活性。多糖的药理活性,还与其组成的立体构型有关,若螺旋状结构破坏,其药理活性则明显降低。单糖之间的苷键,大多为1→3、1→4、1→6数种,多数为β-构型结构,少数为α-构型结构。在多数β-构型多糖分子中有分支部分,灵芝多糖含有15%-30%的肽,多糖链分枝密度高或含有一定量肽成分,其生理活性也较强。因此,多糖的构型与药理活性关系十分密切。利用研究多糖,首先应采用不同提取方法提纯,加以深入研究,才能比较透彻地了解多糖生物活性的本质。

组成灵芝多糖的单糖类型以葡萄糖、半乳糖、甘露糖、木糖为主,还有少量岩藻糖、鼠李糖、葡萄糖醛酸、半乳糖醛酸、海藻糖等,少数多糖由单一葡萄糖组成。由于多糖的结构复杂,不同种类的灵芝菌,不能简单地用某种方法就可确定,必须采用多种方法、多种手段配合使用,将全部有关信息进行综合分析,才能较准确测定获得它的初级结构(一级结构),而它们的高级结构的研究就相对困难,就目前分离技术和研究手段的限制,对多糖类的研究,还不像三萜酸一样研究得透彻,这也说明为什么多糖研究深度和广度不够的原因。

一、灵芝中的多糖

1971年Sasaki T等[58]从树舌子实体中分离出抗S-180肉瘤的活性多糖G-D、G-F、G-Z。经化学研究表明,该多糖中G-Z为β-(1→3)(1→4)连接的葡聚糖,并有微量木糖存在。1981年东京药学院Miyazaki T等[60]从灵芝子实体(fruit body of Ganoderma lucidum)分离出水溶性多糖

GL-1,分子量为40000,GL-1由葡萄糖、木糖及阿拉伯糖组成,其分子比为18.8∶1.5∶1.4,主要成分为阿拉伯葡聚糖(arabinoyloglucan)侧链含α及β(1→4)D-吡喃葡萄糖基,β(1→6)及β(1→3)连接,阿拉伯糖为非还原性末端残基,木糖可能作为侧链的部分存在。GL-1对S- 180肉瘤有强烈的抑制作用(当ip注射20mg·kg-1·10d),其抑制率为95.6%-98.5%,温和酸水解及α-淀粉酶处理,GL-1对抗肿瘤则没有效果。结果表明:GL-1抗肿瘤的重要结构为侧链葡聚糖核心含有β-(1→3)及β-(1→4)及β-(1→6)连接。

1982年Miyazaki T等[59]以稀碱液(0.1M NaOH)从灵芝中提取分离出抗S-180肉瘤活性的水溶性多糖,分子量38000,经酸水解鉴定,该多糖含有L-岩藻糖、D-木糖和D-甘露糖,其分子比为1∶1∶1,经过碘酸氧化、Smith降解、部分酸水解、甲基化反应及气质(GC-MS)联用,证明其结构为:

→4)-D-甘露糖(1→4)→D-甘露糖(1→4)-D-甘露糖(1→

3 3 3

↑ ↑ ↑

1 1 1

D-木糖 D-木糖D-木糖

4 4 4

↑ ↑ ↑

L-岩藻糖L-岩藻糖L-岩藻糖

1983年Ukai S等[77]从日本产紫芝(Ganoderma japonicum)中分离出甘露多糖(Mannan)及水溶性葡聚糖(glucans)对S-180肉瘤显示抗肿瘤活性。

1985年Hikino H等[61]从日本Kanagawa产的灵芝(Ganoderma lucidum Karst)的生药中分离出葡聚糖肽(peptidoglycans),灵芝葡聚糖A及B。临床观察有降血糖的活性。

1986年Tomoda K等[63]从灵芝(Ganoderma lucidum (reishi) Kasten)子实体分离出降血糖成分,即灵芝葡聚糖B和C。研究表明葡聚糖肽(peptidoglycans),分子量分别为7400及5800。灵芝葡聚糖B的侧链含D-吡喃葡萄糖基β(1→3)(1→6)苷键连接。灵芝葡聚糖C(ganoderan C)含吡喃葡萄糖基β(1→3)(1→6)及D-吡喃半乳糖基α-(1→6)苷键。

1986年韩国汉城大学Shin H W等[62]从灵芝鹿角状孢子及菌盖(Ganoderma lucidum pileus)鹿角状(horn-shaped carpo spore)进行分析,从其子实体分离出蛋白质多糖,经热水提取,丙酮沉淀及透析纯化得到多糖部分(51%)及蛋白质部分(5%),当ip 50mg·kg-1小鼠上,可增强腹膜渗出物细胞(巨噬细胞)多形核蛋白细胞的积累,表明该糖蛋白具有免疫潜在活性。

1997年Hitoshi T等[64]从灵芝中提取4种多糖,腹腔注射对小鼠肉瘤S-180的抑制率达83.9%,半数动物肿瘤完全消退,该灵芝的抗肿瘤活性成分,似为含少量蛋白质的多糖。

1992年北京医科大学药学院何云庆等[65]研究了灵芝子实体免疫多糖。从中分离出4种成分,其中1种具有(1→6)及(1→3)连接的葡萄糖多聚体。另1种为β(1→6)(1→3)连接的阿拉伯糖及半乳糖的多聚体。

1993年Kim B等[66]从朝鲜产灵芝(Ganoderma lucidum)培养的菌丝体热水提取物中,发现与蛋白质结合的多糖Fr1-V,静脉注射ICR鼠,剂量为20mg·kg-1/d(V),对S-180肉瘤,抑制率为64.2%-75.8%,并对抗肿瘤化合物测定了免疫活性。它含有68.6%的多糖,系由甘露糖、葡萄糖、半乳糖、岩藻糖、木糖及51%蛋白质(17种氨基酸组成,分子量为5.8×104道尔顿,命名为灵芝多糖(lucidan)。

1993年林志彬和雷林生[67][29]发现,每日给小鼠腹腔注射灵芝多糖GL-B(25-100mg·kg-1)4天。可明显增强小鼠脾细胞对LPS刺激的增殖反应。当剂量为100mg·kg-1时,脾细胞增殖反应较对照组增加84.8%。结果表明,GL-B可增强B淋巴细胞对LPS刺激的敏感性。

1991年Ma等[29]报告灵芝多糖BN3A、BN3B和BN3C(0.05-1μg·ml-1)均可显著增加

C57 BI/6j 小鼠脾细胞在Con A存在条件下的IL-2产生,并可部分地拮抗环孢霉素A和氢化可的松对小鼠脾细胞产生IL-2的抑制作用。

1994年何云庆等[68]从人工栽培的灵芝(赤芝)(Ganoderma lucidum(Leyss. Fr)Karst)子实体热水提取物中分离出2种葡聚糖肽GLSP1、GLSP2,凝胶层析及高效液相证明其为单一的多糖均一体,测得分子量分别为12800及14100,完全水解、过碘酸氧化、Smith降解、光谱分析及甲基化分析表明:GLSP1为含有β(1→3)(1→6)及(1→4)苷键的葡聚糖肽,肽的含量占26.6%;GLSP2为含有β(1→6)及(1→4)苷键的葡聚糖肽,两类苷键糖基组成比例1∶1,并有分枝,肽的含量占12.3%,碱性β-消去反应证明,2种葡聚糖肽的糖基与肽键的丝氨酸与苏氨酸以O-糖苷键相连接。

1989年Hikino等[69]从灵芝子实体中分离出蛋白质的异多糖FA-1b, FIII-3a,共15种,其中,除FII-1无降血糖作用,FIII-1b降血糖作用较弱外,对正常小鼠均有明显降糖作用。

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