人核心蛋白聚糖基因靶向肺癌细胞特异性表达载体的构建及其表达
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下游 。Ｐ Ｒ产物通过测序 鉴定 核苷酸序列 。重组载体通过 限制性酶切进行鉴定 。结果 Ｃ Ｐ Ｒ扩增的人分 泌型 白细胞 Ｃ
蛋 白酶抑制剂的启动子 片段 长度为 １ ５ ｐ该启 动子经测序 获得 的核 苷酸序列 与 Ｇ ｎｂｎ 该基 因上 游 ５末端转 ０ｂ ； ２ ｅｅａｋ上 录调控 区的序列完全一致 ； 重组载体 的酶切 鉴定结 果显示 （ ） １ 该启 动子成 功插入 到 ｐＤ Ａ ．（ 载体 ， ｃ Ｎ ３ １ ＋） 并替换 Ｃ ＭＶ
ｂｓ ．ｃ Ｎ ３ １（ ， ｐ ｃ ｅｃｒｅ’ Ｃ ｒｍ ｔ ｎ ｎａｃｒ ｅｕｎｅ，ｈｃ ｅ ｏｓｕｔ ｙｔ ｅｒｔｙｌ ｋ— ａｉ ｐ Ｄ Ａ ． ＋）ｒ ｌ ｅ ｈ ａ ｉ Ｓ ＭＶｐｏ ｏ ｒ ｄｅｈｎｅ ｓｑｅｃｓｗ ｉ ｗ ｒ ｃｎｔ ｃ ｄｂ ｅｓｃ ｏ ｕｏ ｓ ｅａ ｔ ｒｒ ｅａ ｈ ｅ ｒ ｅ ｈ ｅｒ ｅ
因进行 肺癌靶 向治疗 的研究 奠定实验基础 。方法
人 分泌型 白细胞蛋 白酶抑制剂 的启 动子 ， 利用 基因重组技术 将该启 动子插入 真核细胞 表达 载体 ｐＤ Ａ ． （ ， ｃ Ｎ ３ １ ＋） 替换 该载体 的 Ｃ ＭＶ启动 子与增强子序列 ， 而构建成 由人分泌 型白细胞蛋 白酶抑制剂基 因的启 动子启动 基因表达的基 因 从 表达载体 。将人 核心蛋 白聚糖基 因通过 基因重组 技术插 入到 上述 载体人 分泌 型 白细胞 蛋 白酶 抑制剂基 因启 动子 的
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中国实验诊 断学
２ １ 年 ２月 ０１
第 １ ５卷
第 ２期
一
１ ９ｌ 一
文章编号 ：０７ ２７ ２ １）２ １１ ０ １０ —４８ （０ １０ —０９ — ４
人 核 心 白聚糖 基 因靶 向肺 癌 细 胞 特 异 性 蛋 表 达 载 体 的构 建 及 其 表 达
吕俊锋 杜珍 武 张玉成 张桂珍 一， ， ，
（． １吉林大学 中 日联谊 医院 中心实验 室 ， 吉林 长春 １０３ ； ． ３ ０３ ２ 吉林 大学第二医院 放射线科 ， 吉林 长春 １０４ ） ３０ １ 摘要 ： 目的 构建调控 人核心蛋 白聚糖基 因特 异性 在肺癌 细胞 Ａ ４ ５９内表达的基 因表达 载体 ， 为进一步应用该基 应用 Ｐ Ｒ技术 从人外 周血基 因组 中扩增肺 癌细胞 特异性 表达 的 Ｃ
启动子 与增 强子序列 ，２ 人核心蛋 白聚糖基 因成 功插 入该载体 。结论 （） 成功构建 由人分泌型 白细胞蛋 白酶抑制剂基
因启动 子调控人核心蛋 白聚糖基 因表达载体 ， 该载 体实现调控人核心蛋 白聚糖 基因在肺癌细胞 内特异性表达 。
关键 词 ： 肺癌 ； 核心蛋 白聚糖 ； 人分泌型 白细胞蛋 白酶抑制剂 ； 因表达 基
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蛋 白酶抑制剂的启动子 片段 长度为 １ ５ ｐ该启 动子经测序 获得 的核 苷酸序列 与 Ｇ ｎｂｎ 该基 因上 游 ５末端转 ０ｂ ； ２ ｅｅａｋ上 录调控 区的序列完全一致 ； 重组载体 的酶切 鉴定结 果显示 （ ） １ 该启 动子成 功插入 到 ｐＤ Ａ ．（ 载体 ， ｃ Ｎ ３ １ ＋） 并替换 Ｃ ＭＶ
ｂｓ ．ｃ Ｎ ３ １（ ， ｐ ｃ ｅｃｒｅ’ Ｃ ｒｍ ｔ ｎ ｎａｃｒ ｅｕｎｅ，ｈｃ ｅ ｏｓｕｔ ｙｔ ｅｒｔｙｌ ｋ— ａｉ ｐ Ｄ Ａ ． ＋）ｒ ｌ ｅ ｈ ａ ｉ Ｓ ＭＶｐｏ ｏ ｒ ｄｅｈｎｅ ｓｑｅｃｓｗ ｉ ｗ ｒ ｃｎｔ ｃ ｄｂ ｅｓｃ ｏ ｕｏ ｓ ｅａ ｔ ｒｒ ｅａ ｈ ｅ ｒ ｅ ｈ ｅｒ ｅ
因进行 肺癌靶 向治疗 的研究 奠定实验基础 。方法
人 分泌型 白细胞蛋 白酶抑制剂 的启 动子 ， 利用 基因重组技术 将该启 动子插入 真核细胞 表达 载体 ｐＤ Ａ ． （ ， ｃ Ｎ ３ １ ＋） 替换 该载体 的 Ｃ ＭＶ启动 子与增强子序列 ， 而构建成 由人分泌 型白细胞蛋 白酶抑制剂基 因的启 动子启动 基因表达的基 因 从 表达载体 。将人 核心蛋 白聚糖基 因通过 基因重组 技术插 入到 上述 载体人 分泌 型 白细胞 蛋 白酶 抑制剂基 因启 动子 的
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中国实验诊 断学
２ １ 年 ２月 ０１
第 １ ５卷
第 ２期
一
１ ９ｌ 一
文章编号 ：０７ ２７ ２ １）２ １１ ０ １０ —４８ （０ １０ —０９ — ４
人 核 心 白聚糖 基 因靶 向肺 癌 细 胞 特 异 性 蛋 表 达 载 体 的构 建 及 其 表 达
吕俊锋 杜珍 武 张玉成 张桂珍 一， ， ，
（． １吉林大学 中 日联谊 医院 中心实验 室 ， 吉林 长春 １０３ ； ． ３ ０３ ２ 吉林 大学第二医院 放射线科 ， 吉林 长春 １０４ ） ３０ １ 摘要 ： 目的 构建调控 人核心蛋 白聚糖基 因特 异性 在肺癌 细胞 Ａ ４ ５９内表达的基 因表达 载体 ， 为进一步应用该基 应用 Ｐ Ｒ技术 从人外 周血基 因组 中扩增肺 癌细胞 特异性 表达 的 Ｃ
启动子 与增 强子序列 ，２ 人核心蛋 白聚糖基 因成 功插 入该载体 。结论 （） 成功构建 由人分泌型 白细胞蛋 白酶抑制剂基
因启动 子调控人核心蛋 白聚糖基 因表达载体 ， 该载 体实现调控人核心蛋 白聚糖 基因在肺癌细胞 内特异性表达 。
关键 词 ： 肺癌 ； 核心蛋 白聚糖 ； 人分泌型 白细胞蛋 白酶抑制剂 ； 因表达 基
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