同位素示踪技术

7、准确复制原因 ①DNA双链提供精确的模板
②碱基互补配对原则
8、复制的生物学意义：
DNA分子连续复制演绎的计算规律
DNA分子连续复制演绎的计算规律

DNA分子复制n次
DNA分子数：2n 只含15N分子：0 含14N/15N杂种分子：2 只含14N分子：2n-2 DNA单链总数： 2n+1 含15N的链：2 含14N的链： 2n+1-2

据同位素标记和密度梯度离心 实验可知：
细胞中DNA的复制是以亲代的 一条链为模板，按照碱基互补 配对原则，合成另一条互补碱 基的新链，复制出的DNA分子 与亲代DNA分子完全相同,其中 一条链来自亲代DNA，另一条 链是新合成的。
1、概念：
DNA分子复制的过程
2、场所： 细胞核（主要）、线粒体、叶绿体
（大肠杆菌20min繁殖一代）

现代分子生物学技术：
同位素示踪技术、密度梯度离心法
重带
中带
轻带
亲代 （轻）DNA
子一代
子二代
Baidu Nhomakorabea14N/14N
（中）DNA
（重）DNA
15N/15N
14N/15N
14N/15N
旁栏思考题：
本实验根据试管中DNA所在的位置区分
亲代与子代的DNA
DNA复制是以半保留方式进行的

DNA如何复制自己以保证子代得到亲
代的全部遗传信息呢？
半保留型复制模型
全保留型复制模型
新形成的
子一代 DNA分子
模板链恢
复原来的 双螺旋

如何来证明哪个观点是正确的？
如何区分原来的DNA链与新合成的DNA链呢？

实验设计



利用放射性同位素不断放出射线的性质，可及时、 灵敏地探测追踪放射性物质； 或利用与普通同位素的质量不同进行质量分析追 踪其数量变化、位置移动等。 在高中生物学中，常用的同位素有：14C/12C、 18O/16O、15N/14N、32P/31P、35S/32S
3、时期： 有丝分裂间期、减数第一次分裂前的间期 模板：DNA的两条母链 游离的四种脱氧核苷酸（A、G、C、T） 原料： 4、条件 能量： ATP DNA解旋酶、DNA聚合酶等（作用于哪个化学键？） 酶： 5、复制过程：解旋→合成互补子链→形成子代DNA
（2）半保留复制 6、复制特点（1）边解旋边复制（多起点）

将样品与适当的溶剂介质混合后离心，各种颗粒 在与其等密度的介质带处形成沉降区带。
实验设计
重带
利用与普通同位素的质量不
同进行质量分析
中带
常用的同位素：
14C/12C、18O/16O、15N/14N、
32P/31P、35S/32S
轻带
实验设计

实验材料：
大肠杆菌、含15N的培养液、含14N的培养液、提取 DNA的各种试剂和器材、离心机、离心管