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（三）常用的固定液
1. 单纯固定液 (1) 甲醛(formaldehyde) (2) 酒精(alcohol) (3) 苦味酸(picric acid) (4) 丙酮(acetone) (5) 醋酸(acetic acid)
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2. 混合固定液 (1) Bouin液 ：用于结缔组织及脂肪染色； (2) Zenker液：常用于三色染色； (3) 4%多聚甲醛-磷酸二氢钠-氢氧化钠液；
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二、组织切片(Tissue sectioning)
石蜡切片仍是目前各种切片制作方法中 最常用、最普遍的一种方法。
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(一)切片前的准备
1. 备齐常用器具, 如玻片、毛笔和铅笔或 刻字笔。
2. 检查切片机的工作状态, 将固件都拧紧， 检查切片刀是否锋利, 切片刀质量是保证 切片的关键。如果使用一次性刀片, 应根 据切片情况及时调整刀刃位置。
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五、浸蜡(Paraffin wax soaking)
用熔化的切片石蜡逐渐替换组织中 二甲苯的过程。
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六、组织的包埋和包埋方法
(Embedding)
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一、组织切片机和切片刀
1. 石蜡切片机 2. 火棉胶切片机 3. 恒冷箱切片机 4. 震动切片机
恒冷箱切片机震动切片机石蜡切片机
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切片刀
切片刀是切片机的重要部件，常见的有两种： 一种为可重复使用的钢刀，一般
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四、透明(Transparentizing)
常用的透明剂有二甲苯、苯、甲苯、氯仿、环己 酮、苯甲酸甲酯、香柏油、冬青油和苯胺油等。
目前也有用环己酮作为透明剂，环己酮为无色无 毒液体，可与苯、二甲苯和酒精等相混合，也可 溶解石蜡。而且脱水时组织不收缩变硬，用于快 速石蜡切片效果较好。
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•3一、取材(Samp来自es collection)1. 人为因素 2. 标本大小 3. 取材时间 4. 包埋方向 5. 边缘标记
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6. 小标本的处理方法 7. 特殊情况取材 8. 取材数量 9. 清除多余成分 10. 重复取材 11. 核对取材 12. 剩余组织存放
有4cm、8cm、14cm、18cm、20～24cm等，根 据切片刀的形态，有平凹型、深平凹型、平 楔型、双凹型。
另一种为一次性钢刀片，是一种 薄型切片刀片，用于普通石蜡切片。使用时 固定在特制的刀架上。
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石蜡切片机用一次性钢刀片
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三、脱水(Dehydration)
组织经固定和水洗后含大量水分，水与石蜡 不能混溶。因此在浸蜡和包埋前，必须进行 脱水。
常见的脱水剂有乙醇、正丁醇、丙酮等。 为防止水份丢失过快，造成组织变形，一般
采用梯度脱水法。也就是使脱水剂的浓度逐 渐升高，脱水过程尽量缓和，减少组织变形。
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（四）固定时的注意事项
1. 标本 应新鲜并及时取材，快速放入固定液中。 特殊标本应单独固定和存放。
2. 固定液的用量 一般固定液用量为组织块体积的 10~20倍，贵重的固定液不少于3~5倍。
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3. 防止组织变形 柔软或较薄的组织先平铺在吸水
（一）常规石蜡包埋 （二）脱落细胞标本的包埋 （三）微小标本的包埋
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第二节 组织切片法
(Tissue sectioning)
组织切片法包括石蜡切片法、冰冻切片法、火 棉胶切片法、树脂包埋薄切片法和大组织石蜡 切片法等。常用的切片工具包括组织切片机、 切片刀和自动磨刀机等。
纸上，再投入固定剂中；含气或脂肪多的组织易浮 于液面，可在组织表面覆盖棉花以达到充分固定。
4. 固定液的穿透性 一般固定液在24h内不能穿透 厚度大于2~3mm的实体组织或5mm的多孔疏松组织， 故取材组织块的厚度原则上不应超过3~4mm。 5. 固定时间 固定的时间与固定液的种类、组织类 型、块大小、温度等有关。一般1.5cm×1.5cm×0.2 ~0.3cm大小的组织块, 固定时间为12~24h。 6. 固定温度 大多数可在室温(25℃)固定，在低温 (如4℃)固定时，固定时间要相应延长。
3. 固定剂有硬化作用,增加组织的硬度,便于制片。 4. 组织中的各种物质经固定后产生对染料的亲和
力，利于染色和观察。
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（二）常用的固定方法
1. 浸泡固定法 2. 灌注固定法 3. 细胞涂片的固定方法 4. 微波固定法 5. 蒸气固定法
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病理技术的应用
➢ 帮助临床查明死因(尸检); ➢ 手术后病变标本，明确诊断(临床活检); ➢ 为教学、科研提供资料;
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第一节 组织处理
取材(Sample collection)→固定(Fixation)→ 脱水(Dehydration)→透明(Transparentizing) →浸蜡(Paraffin soaking)→包埋(Embedding)
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二、固定(Fixation)
固定就是用物理或化学方法，阻止组织细胞离体 或培养细胞脱离生存环境后发生形态学变化。
(一)固定的目的
1. 迅速阻断组织细胞离体后的自溶性变化，防止 腐败，尽量保持组织细胞生活状态下的形态结构。
2. 使细胞内的蛋白质、脂肪、糖、酶等成分转变 成不溶性物质，并保持原有的空间位置。