第2课时将目的基因导入受体细胞目的基因的检测与鉴定

第2课时将目的基因导入受体细胞目的基因的检测与鉴定

课堂知能验收

对应学生用书P007

1．农杆菌转化法转移目的基因进入受体细胞后，目的基因插入的位置是()

A．Ti质粒上

B．受体细胞染色体的DNA上

C．T-DNA

D．农杆菌的拟核

答案 B

解析在农杆菌转化法中利用农杆菌的T-DNA将目的基因整合到受体细胞染色体的DNA上。

2．目前将目的基因导入动物细胞最常用、最有效的方法是() A．显微注射法B．农杆菌转化法

C．基因枪法D．花粉管通道法

答案 A

解析显微注射法是迄今为止将目的基因导入动物细胞中采用

最多、最有效的一种方法。

3．在基因工程技术中，需要用氯化钙处理的环节是()

A．目的基因的提取和导入

B．目的基因与载体结合

C．将目的基因导入受体细胞

D．目的基因的表达

答案 C

解析如果载体是质粒，受体细胞是细菌，一般是将细菌用氯化钙处理，使其成为感受态细胞，使含有目的基因的重组DNA分子进入受体细胞，目的基因导入受体细胞后，就可以随着受体细胞的复制而复制。

4．基因工程中科学家常采用细菌、酵母菌等微生物作为受体细胞的主要原因是()

A．结构简单，操作方便

B．繁殖速度快

C．遗传物质含量少，易操作

D．性状稳定，变异少

答案 B

解析微生物一般具有以下几个特点：①个体微小，结构简单；

②繁殖快，在实验室培养条件下细菌几十分钟至几小时可以繁殖一代；

③代谢类型多，活性强；④易变异，相对于高等生物而言，较容易发生变异。在基因工程中，主要是利用它快速繁殖的特点，可以提供更多的基因工程的产物。

5．(2017·甘肃礼县中学月考)目的基因整合到某作物DNA片段上后()

A．改变了原DNA的碱基排列顺序

B．改变了原DNA上各基因的碱基排列顺序

C．改变了原DNA上各基因的复制过程

D．改变了原DNA上各基因的转录过程

答案 A

解析目的基因整合到某作物的DNA片段上后，不能改变其他基因的碱基序列，也不能改变基因的复制和转录，B、C、D错误；只能改变原DNA的碱基排列顺序，A正确。

6．要检测受体DNA中是否成功插入了目的基因，需要用基因

探针，这里的基因探针是指()

A．用于检测疾病的医疗器械

B．带标记的与目的基因互补的核酸序列

C．带标记的蛋白质分子

D．人工合成的免疫球蛋白

答案 B

解析本题中基因探针是指用放射性同位素或荧光分子标记的与目的基因互补的核苷酸序列，利用碱基互补配对原则，检测目的基因是否导入受体细胞的DNA中。

7．(2017·石家庄一中模拟)科学家设法将人的生长激素基因导入其他生物体(细胞)内，从而获取大量的人的生长激素，应用于侏儒症的早期治疗，如图所示。请据图回答下列问题：

(1)过程①采用的方法是________，过程②之前需用________处理含目的基因的DNA片段和质粒。

(2)过程③需事先对大肠杆菌用________处理，使其处于感受态，

接着________________________________________，从而完成转化过程。

(3)过程⑤重组载体导入动物细胞一般使用____________法。

答案(1)反(逆)转录同种限制酶

(2)Ca2＋将重组表达载体溶于缓冲液中与感受态细胞混合，在一定温度下促进感受态细胞吸收DNA分子(合理即可)

(3)显微注射

解析(1)过程①是由mRNA到DNA的过程，利用了反转录法，过程②是将质粒和目的基因拼接在一起，在拼接前要用同种限制酶对含目的基因的DNA片段和质粒进行切割，以形成相同的黏性末端。

(2)过程③是将重组质粒导入大肠杆菌细胞，需要事先用Ca2＋处理，使大肠杆菌细胞成为感受态细胞，接着将重组质粒与感受态细胞混合，在一定温度下促进感受态细胞吸收DNA分子。

(3)将目的基因导入动物细胞常采用显微注射法。

8．(2018·河南天一联考高三期末)科学家发现胡萝卜中存在冷诱导的抗冻蛋白，克隆其cDNA，通过基因工程可用来改良植物的抗寒性。研究发现植物内源抗冻基因AFP基因更适宜在植物体内表达，

比昆虫、海洋动物等的抗冻基因有更多的优点。下图为利用胡萝卜的AFP基因培育抗寒性强的番茄植株的过程。请据图回答下列问题。

(1)以幼小胡萝卜植株细胞中的mRNA为材料获得抗冻蛋白cDNA，要依据______________原则。利用PCR技术扩增AFP基因时，需要加入两种引物，原因是________酶只能从引物的3′端延伸DNA链，用两种引物才能确保DNA的两条链同时被扩增，该酶只能特异地复制处于________之间的DNA序列，一个DNA分子经三轮复制以后，含有两种引物的DNA分子有________个。

(2)将AFP基因导入植物细胞时，目前常用的目的基因载体是Ti 质粒，AFP基因必须插入该基因载体的________上。将重组AFP基因的表达载体导入农杆菌，再感染番茄细胞，可经过________________技术形成转基因植株。

(3)若要在个体水平上检测抗寒性强的番茄植株是否培育成功，请写出检测思路。_______________________________________。

答案(1)碱基互补配对热稳定DNA聚合(Taq)两个引物6 (2)T-DNA植物组织培养(3)将获得的转基因植株放在低温(寒冷)环境中培养，若该植株能正常生长繁殖，则表明抗寒性强的番茄植株