小鼠胚胎培养试验

实验四小鼠胚胎培养

实验目的：训练学生实验动物小鼠超数排卵、胚胎收集、胚胎培养技术。观察早期胚胎发育过程。

实验器材：CO2培养箱，CZB培养液，石蜡油，35 m 培养皿，小东物手术器械。小鼠笼及其附件。、

实验动物：25 克雌性小鼠30只。成年雄鼠10只。

实验药品：PMSG、HCG、生理盐水，CZB培养液，TCM199培养液

实验步骤：一、液滴的制作：用加样枪把100微升的CZB或TCM199，做成两个液滴，上面覆盖石蜡油。用前在CO2培养箱

平衡一昼夜。

二、0天雌鼠注射PMSG 12IU, 48小时后腹腔注射HCG。

当晚

三、按1：3的公母比例放入公鼠笼中，第二天晨、第三天

晨检察有阴道拴的母鼠检出。

四、小鼠颈椎断处死。剖开腹腔将输卵管两端剪开，取出

输卵管，放入盛有37℃生理盐水的表皿内在40倍体视

镜下捡出胚胎。

五、将检出的胚胎，放入培养液滴中，每个液滴放入5枚

胚胎。将培养皿放入37℃，95%湿度的CO2培养箱中。

六、每隔两天观察培发育情况并记录下来发育数目。并画

出桑椹胚、囊胚、和脱出囊胚图。

注意事项：雌、雄小鼠合笼后，不一定交配。有阴道拴的母鼠不一定有胚胎。取出胚胎不一定都是受精卵。受精卵不一

定都能正常发育下来。

移送胚胎时注意小心，免得丢失。

每个小组设一名联系人。及时与老师保持联系。

实施步骤：因实验条件限制，每组10人，共分10组

实验步骤安排：

1、注射PMSG 、hCG

2、雌雄交配

3、观察阴道拴

4、制作培养液滴

5、制作吸胚针

6、观察胚胎

实验分组：

第一组：学号81060901至81060914；组长李万宏

第二组：学号81060915至81060924；组长李继富

第三组：学号81060925至81060935；组长范圣涛

第四组：学号81060936至81061006；组长刘颖

第五组：学号81061007至81061019；组长高鹤