枸杞多糖的提取(精)

三、实验器材与试剂
器材：空干燥箱、恒温水浴锅、紫外分光光度计、 超声提取仪、循环水式多用真空泵、分析天平
试剂：葡萄糖、95％乙醇、无水乙醇、浓硫酸、丙 酮、5％苯酚、三氯甲烷、甲醇
原料:枸杞子


传统工艺提取枸杞多糖:
将枸杞置真空干燥箱中于 60℃真空烘干，取出后放入干燥 器中24 h。



四、操作步骤
1、将枸杞置真空干燥箱中于60℃真空烘干 2、取经干燥处理后的枸杞10 g，置围底烧瓶中，加入 氯仿：甲醇(2：1)20．0 ml／次，在60℃下回流脱脂2 次，共4 h。 3、滤出溶剂，残渣挥干溶剂后置锥形瓶中，加入80％ 乙醇20 ml／次，超声2次，每次30 min，过滤。
4、待残渣中的乙醇挥干后，加水适量超声提取2次， 过滤，滤液于60℃浓缩。最后用4倍量的95％乙醇沉 淀．放置24 h，抽滤。 5、所得物质先后用95％乙醇、无水乙醇、丙酮洗涤， 真空干燥(50℃)，即得枸杞多糖粗粉。
其中，C是枸杞多糖浓度（mg/ml），A是吸光度，b表示标准曲线方程的截距，k表 示标准曲线方程的斜率，V是提取液体积（ml），M是原料干重（g）
制表记录：
六、超声波辅助提取法正交试验：
选取时间（A）、功率（B）和料液比（C）3 个因素，每个因素3个水平进行正交试验
超声波辅助提取法正交试验参考结果：
枸杞多糖的提取
组员 戴甜：课题确定、查阅相关资料
郭毅松：课件制作、多糖粗粉的提取
李辉：单因素正交试验、后期各项数据分析和处理 杜璞：绘制葡萄糖标准曲线 王雪：枸杞多糖得率测定
一、枸杞多糖简介
枸杞为多棘刺落叶小灌木，抗旱能力很强。其浆果 枸杞子是我国传统名贵中药材，素有“红宝”美称。 枸杞子富含植物多糖、蛋白质、维生素等营养成分， 具有保肝润肺、滋肾明目、益气生精、祛虚劳、强筋 骨、抗衰老、降血糖、降血脂和增强免疫力等药理作 用，一直受到中外医学与食疗专家的高度重视。 枸杞多糖对机体具有非特异性免疫调解功能，可 调节机体免疫力，抑制肿瘤生长和细胞突变，延缓 衰老，提高适应能力是保健食品的一种重要功能性 添加剂，有着良好的应用前景。
五、枸杞多糖分析检测
（1）标准曲线的制作： 1、精密称取105℃干燥箱中干燥至恒重的葡萄糖50 mg于50mL容量瓶中，加蒸馏水溶解并定容至刻度。 2、精密吸取该溶液1．0、2．0、3．0、4．0和5．0 ml于50mL容量瓶中，加蒸馏水稀释至刻度。各取l mL 于l0mL比色管中，分别加入5％苯酚溶液1 ml，摇匀。 3、匀速加入5mL浓硫酸，立即摇匀后置冷水浴冷却至 室温。 4、于紫外分光光度计测定吸光度。根据测定的吸光 度绘制葡萄糖的标准曲线。
绘制标准曲线： （参考结果）
以浓度（x）为横坐标，吸光度（y）为纵坐标，绘制葡萄糖标 准的标准曲线。
Fra Baidu bibliotek
（2）枸杞多糖得率的测定： 1、称取干燥后所得的枸杞多糖粗粉50mg置50 ml容量瓶中， 加蒸馏水溶解至刻度。 2、精密吸取该溶液l. 0 ,2. 0, 3. 0，4. 0和5. 0 ml于50ml容量 瓶中加蒸馏水稀释至刻度。各取l ml 于 10 ml比色管中分 别加入5％苯酚溶液1 ml摇匀。 3、匀速加入5mL浓硫酸，立即摇匀后置冷水浴冷却至室 温。 4、于紫外分光光度计测定吸光度。根据以下公式求得枸 杞多糖的得率：
二、枸杞多糖的提取方法
枸杞多糖最传统的提取方法是水提取．此 法不能使枸杞中的多糖最大量的溶出来， 且提取的多糖纯度不高。若采用超声波辅 助水提取则可较好的解决这个问题。一般 超声波辅助提取法的最佳工艺为：料液比 1:20，提取时间40min，提取功率100W。 因此，本次实验采用超声波辅助提取法提 取枸杞多糖，紫外分光光度法测定多糖的 含量，并以多糖含量为指标，对多糖的提 取工艺进行优化。
取10 g研碎置普通回流装置中，加入氯仿：甲醇(2：1)20 ml／次．在60℃下回流脱脂2次，每次2 h。滤出溶剂，残 渣风干后加入80％乙醇20 ml／次，在60℃回流2次，每次 2 h，回收乙醇。
再以 60℃水提 2 次，共 4 h ，液固比为 l ： 20 ，合并滤液浓 缩，以4倍量的95％乙醇沉淀，放置24 h．抽滤。 所得产物先后用95％乙醇、无水乙醇、丙酮洗涤，真空千 燥(50℃)，即得固形物枸杞多糖粗粉。