鱼粉品质检测与鉴别方法

鱼粉品质检测与鉴别方法
蒋郁朝张晓江
（广东新粮实业有限公司新粮饲料厂广东新会 529000）
随着畜禽、水产养殖业兴起和饲料工业的迅速发展，势必给原料供应商带来了商机，鱼粉作为一种优质蛋白质饲料原料日趋短缺，价格较高。

但一些企业和商人为谋取暴利常常在生产和流通领域中向鱼粉掺入一些伪假杂物质，掺假掺杂现象严重，极大地降低了优质蛋白质饲料原料——鱼粉品质。

而饲料原料优劣直接关系到饲料产品质量的好坏，没有好的原料，饲料企业也无法配制出优质饲料产品，并且造成饲料生产企业和养殖专业场（户）巨大的经济损失。

鱼粉中常见的掺假掺杂物为：植物性物质、非蛋白质含氮化合物、血粉、羽毛粉、鞣革粉和碳酸盐类等非鱼粉物质。

本文对当前鱼粉中掺假掺杂物的鉴别方法作一些介绍，以供参考。

一、鱼粉中掺入植物性物质的检测
凡植物性来源的物质均含有淀粉和木质素。

淀粉可与碘化钾反应，产生蓝色或蓝黑色化合物；木质素在酸性条件下，可与间苯三酚反应，产生红色化合物。

故利用上述两种反应，即可迅速检测鱼粉中是否含有植物性来源的掺假掺杂物。

1．淀粉检测方法：
称取待检样品1～2克于100毫升烧杯中，加入4～5倍蒸馏水加热至沸3—5分钟以浸出淀粉。

冷却后过滤，在滤液中滴入1～2滴碘－碘化钾溶液（称取碘化钾6克加入100毫升蒸馏水中，再加入2克碘，溶解后遥匀，置棕色瓶中保存），若溶液即现蓝色或黑蓝色，则表明被检样品中掺入含淀粉物质。

2．木质素检测方法：
取被待检样品少许平铺于表面皿中，用间苯三酚溶液（称2克间苯三酚溶入100毫升90％乙醇中,溶解后遥匀, 置溶量瓶中保存备用。

）浸湿，放置5～8分钟，再滴加2～3滴浓盐酸，若被检样品中出现散布的深红色点，说明被检样品中掺入含木质素物质。

且加水后，此深红色部分即会浮上表面。

二、鱼粉中掺入棉籽饼粕的检测
先将20目和40目分样筛叠放在一起，然后称取待检样品250克于分样筛，摇筛5～6分钟，即将被检样品分成粗、中、细3部分。

观察中层40目筛上物，若见筛中央散布有细短绒棉纤维，相互团絮在一起，呈深黄或棕黄色，筛四周有不少深褐色棉籽外壳碎片，可初步证实鱼粉中掺有棉籽饼粕。

为进一步证实，可在20—50倍显微镜下进行观察，可见中央部分样品散布有细短棉绒纤维该纤维卷曲，半透明，有光泽，白色，并混有少量深褐色棉籽壳碎片（厚硬、具弹性）C碎片断面有浅色或深褐色相交叠的色层。

有时可见一些棉纤维仍附着在外壳上或埋在棉饼中。

三、鱼粉中掺入血粉的检测
1．血色素结晶法：
取微量粉碎了的待检样品放在载玻片上，加1—2滴高山试液进行混合，盖上盖玻片，远火加温，放置4—8分钟后，用100倍的显微镜进行镜检；存在兽血粉时，可看到橙—红色的柱状，针状，菊花状或束状的血色原结晶。

高山试液配制：取吡啶3毫升，葡萄糖溶液（30W/V%）10毫升和氢氧化钠溶液（10W/V%）3毫升混合均匀，保存在棕色瓶内备用。

2．联苯胺法：
血粉中含有铁质，该铁质具有类似过氧化物酶作用，能分解过氧化氢放出新生态氧，使联苯胺氧化成联苯胺蓝，出现蓝色环、点。

根据环点的有无，即可判断出鱼粉是否掺入血粉。

取少许待检样品放入白瓷皿或白色滴板中，加入联苯胺－冰醋酸混合液数滴（溶解1克联苯胺于100毫升冰醋酸内，后用150毫升蒸馏水稀释）浸湿被检样品，再加3％过氧化氢液2滴，如被检样品有血粉存在，血粒四周即呈现深绿或蓝绿色，反则为淡绿色。

3．荧光法：
取经细粉碎了的待检样品0.5克放在表面皿上，用乙醇润湿后，加鲁米诺溶液5毫升，在暗处观察，存在兽血粉时，兽血粉能发出强烈青色荧光，约可持续观察1—2分钟；若为鱼血粉，则加入试剂后能发出强烈荧光，但5秒钟左右即行消失；若为鸡血粉则不发荧光。

鲁米诺（Luminal）溶液配制：称0.2克鲁米诺溶解在50毫升过氧化钠溶液（0.5W/V%）中（使用时配制）。

4．硫氰酸氨法：
称取2克待检样品置于凯氏烧瓶中，加入20毫升硝酸、10毫升高氯酸进行消化15—20分钟，待消化液冷却后加入25毫升蒸馏水，然后转入100毫升烧瓶中，取5毫升此溶液于椎形瓶中，加入5毫升0.1摩/升硫氰酸氨溶液，进行观察，此时若溶液颜色有桔黄色变为血红色则说明被检样品掺有血粉，若溶液为无色则说明被检样品未掺有血粉。

四、鱼粉中掺入非蛋白质含氮化合物的检测
1、鱼粉中掺入铵盐、尿素的检测
（1）奈氏试剂法：
铵盐一般均含氨态氮。

尿素在碱性条件下经脲酶催化也可生成氨态氮。

奈氏试剂可与氨态氮反应生成棕红色胶体络合物，并可依红棕－红褐－深红色的颜色变化。

称取待检样品1～2克加入100毫升烧杯中，加蒸馏水10毫升，混合均匀，振动搅拌3分钟后，静置20分钟，以便掺入的铵盐或尿素充分溶入水，
备用。

另取试管一支，加奈氏试剂2毫升（称碘化钾5克加入5毫升蒸馏水中，边搅拌边缓慢滴加入25％氯化汞饱和溶液至稍有红色沉淀出现。

再加40毫升40％NａＯＨ溶液，最后用蒸馏水稀释至100毫升，混匀放置棕色试剂瓶中保存）。

然后沿管壁用滴管加上述待检样品浸出液1～2滴，液面立即呈现出棕红色环，则表明被检样品掺入有铵盐。

若液面呈现出白或黄色环，被检样品可疑掺入有尿素，再用脲酶法进行进一步检测。

（2）脲酶法：
称取10克待检样品于250毫升烧杯中，加入100毫升蒸馏水搅拌、过滤，取滤液少许于点滴板上，加2～3滴甲基红指示剂（0.1克甲基红溶入100毫升95％乙醇中），再滴加2～3滴脲素酶溶液（0.2克脲素酶溶入100毫升95％乙醇中）.在40～50℃水浴上加热1～2分钟，静置5分钟。

若点滴板上呈深紫红色，则说明被检样品中掺入了尿素。

无脲素酶时，可用下法检测。

取两份1.5克待检样品分别加入两支试管中,其中一支加入少许生黄豆粉,然后两支试管各加入5毫升蒸馏水,摇匀后置40～45℃恒温水浴锅中30分钟，再滴加2～3滴甲基红指示剂。

若加生黄豆粉的试管中呈较深紫红色，则说明被检样品掺入了尿素。

称取待检样品2～3克加入250毫升三角瓶中，加蒸馏水100毫升，黄豆粉滤液20毫升（称5克生黄豆粉入100毫升水中浸泡1小时，过滤），加塞摇匀。

置40-45℃恒温水浴锅内温热30分钟（温度不宜超过45℃，否则脲酶失活）、最后用镊子取红色石蕊试纸一条浸入该溶液中，若试纸变蓝，则表明被检样品掺有尿素。

（3）定量法：
取一个500毫升烧瓶置可调温电炉上，用玻璃管，皮管连接冷凝管，冷凝管口浸入滴有 3 滴甲基红一溴甲酚绿指示剂和 50毫升 1％的硼酸接收液中，接通冷凝水，此即定量检测的蒸馏装置。

然后将怀疑掺有尿素的样品液快速无损地倒入烧瓶中（三角瓶用蒸馏水冲洗3次，使所有残液、残渣全部入烧瓶中），并加蒸馏水至烧瓶1／2处。

加热瓶内溶液至沸腾后调低电炉温度，使溶液保持沸而不溢状态。

当蒸馏出瓶内溶液1／3后，用红色石蕊试纸蘸一下冷凝管口的馏出液，若试纸不变色，停止蒸馏。

用标准的HCI溶液滴定接收液呈灰红色即为终点。

根据所耗HCI毫升数即可计算出试样中掺入尿素的百分含量。

试样中尿素含量％＝0.03*V*N/W
V一滴定所耗标准HCI液毫升数 N-HCI标准液的实际当量浓度 W一试样重量 0.03一尿素含氮相对V、N的比值
2．鱼粉中掺入尿素的检测
（1）二苯（并）吡喃醇法：
称取待检验样品放入具塞三角瓶中，加50毫升蒸馏水，搅拌15分钟后，用滤纸过滤；取5毫升滤液放入烧杯中，加15毫升醋酸搅拌每隔5分钟加1毫升二苯（并）吡喃醇溶液二次，放置15分钟后，边搅拌边加水10毫升；
存在尿素时，逐渐生成白色絮状沉淀，这种呈白色絮状沉淀反应被称为二苯（并）吡喃醇反应。

（2）格里斯试剂法：
该法原理是在酸性条件下尿素与亚硝酸钠作用，产生黄色反应。

若无尿素，则亚硝酸钠与对氨基苯磺酸发个重氮反应，其产物与a一萘胺起偶氮作用，呈紫红色。

称取待检验样品 1克加入烧杯中，加 20毫升蒸馏水混匀，静置 20分钟。

取上清液 3毫升入 50毫升三角瓶中，加 1％亚硝酸钠液 1毫升、浓 H2SO4 1毫升，摇匀后静置 5分钟、待泡沫消失后，加格里斯试剂0.5g，摇匀．若呈现黄色则说明被检样品掺有尿素，呈现紫红色说明被检样品未掺有尿素。

加格里斯试剂配制：称取酒石酸89克，对氨基苯磺酸10克，α一萘胺1克，混合均匀并研碎，放置棕色瓶内保存备用。

3．鱼粉中掺入缩二脲的检测
该法依据缩二脲在硫酸铜、酒石酸钾钠的碱性溶液中与Cu2+结合生成紫红色化合物的原理，检测鱼粉中是否掺有缩二脲。

称取待检样品3克于100毫升烧杯中，加入30毫升蒸馏水中，在不断搅拌下，于50℃加热30分钟，冷却，用慢速滤纸干滤。

吸取上述滤液4毫升入试管中，加入 2.0毫升酒石酸钾钠溶液和 2.0毫升硫酸铜溶液，摇匀，在30±5℃的恒温水浴锅中放置15分钟，冷却至室温后，立即观察，若溶液呈显蓝色表示被检样品未掺有缩二脲，若溶液呈显紫红色则说明被检样品掺有缩二脲，且颜色越深，掺人比例越大。

1.5%硫酸铜溶液配制：称取15克硫酸铜溶于水中，过滤，用水稀释至1L。

5%酒石酸钾钠溶液配制：称取40克氢氧化钠溶解于500mL水中，冷却，加入50克酒石酸钾钠溶解后，用水稀释至1L，混匀，静置过夜备用。

4.鱼粉中掺入脲醛聚合物的检测
脲醛聚合物在浓硫酸的作用下分解成甲醛与氨，甲醛与变色酸（铬变酸，1.8-二羟基萘-3.6二磺酸）的浓硫酸溶液一起微热，形成一种紫色或紫红色的化合物。

称取待检样品2～3克烧杯中，用石油醚（或乙醚）脱脂，吹干溶剂后将样品移至培养皿内，在体视镜下（放大倍数为10—20倍）将白色或浅黄色易碎的无定形固体可疑物，用眼科镊子小心夹取数粒于50毫升干烧杯内，再将烧杯放到体视镜下，确认可疑物已移放到烧杯内，然后滴加0.5—1毫升变色酸浓硫酸溶液，并把烧杯放在电炉上微热1—2分钟，如溶液变成紫色（或紫红色），则被检样品中含有脲醛聚合物（“蛋白精”）。

此方法选择性强，灵敏度高，检出限量为：0.05毫克（脲醛聚合物）。

2％变色酸溶液配制：称取变色酸0.2克于200毫升干燥的烧杯中，加入100毫升浓硫酸，电炉上微热2分钟并搅拌使之溶解，冷却后，移入120毫升棕色滴瓶内保存。

五、鱼粉中掺入鞣革粉的检测
鞣革粉中铬经灰化后部分可变成6价铬，6价铬在强酸溶液中能与二苯基卡巴腙发生反应，生成紫红色水溶性铬--二苯硫代卡巴腙的紫红色水溶性化合物。

该反应极为灵敏，微量铬即可检出。

称取待检样品1～3克入瓷坩锅中，炭化后人茂福炉于550—600℃温度灰化30分钟。

如有黑点再继续灰化30分钟，取出冷却后，用少许蒸馏水将灰分湿润，加入10毫升2 mol/L H２SO４溶液使呈酸性，再加二苯基卡巴腙溶液（称取二苯基卡巴腙0.25克，加90%乙醇至100毫升使溶解，摇匀，置棕色瓶内保存。

此试剂应为无色的液体，贮存于冰箱中，变色后不应使用。

）数滴，片刻后观察颜色变化，如颜色呈现紫红色，即表明被检测样品中掺有鞣革粉。

注:上述各法同样适于玉米蛋白粉、饲料酵母等的掺假检测。

六、鱼粉中掺入氯化物的检测
1硝酸银法
氯化物与稀硝酸和硝酸银反应，生成白色氯化银沉淀，根据沉淀有无，即可判定是否接人氯化物。

取待检样品 l～2克于 20毫升试管中，加 15毫升硝酸(1:2)，摇匀后静置 2－3分钟备用,用吸管吸取上述上清液2一3滴于载玻片上，加2～3滴5％硝酸银溶液，若掺有氯化物即产生白色沉淀（同时用正常鱼粉作对比检测）；为证实上述结果，可在白色沉淀上滴加1～2滴NH4OH（1+1），滴处沉淀溶解消失，即可进一步确定。

2硝酸银一铬酸钾法
鱼粉中CL-含量较高时与硝酸银反应生成氯化银沉淀，并与铬酸钾作用呈现黄色。

取5毫升0.01mol/L AgNO3液入试管中，加 2滴 10%铬酸钾溶液，然后再加被检样少许，充分混匀。

若试管中溶液呈黄色，说明被检样品中氯离子含量＞0.14％（同时做正常鱼粉对比测定）。

七、鱼粉中掺入碳酸盐、硫酸盐、磷酸盐的检测
1.碳酸盐的检测
碳酸盐与稀盐酸作用，产生CO2气泡，根据气泡有无即可鉴别。

称取待检样品5克于烧杯中，加入20毫升6摩/升盐酸溶液，如迅速有大量气泡产生，并发出吱吱声，则表示被检样品掺有碳酸盐类的物质，反之只见少量气泡慢慢冒出，是鱼骨等被盐酸分解的结果。

2.硫酸盐的检测
2.1 氯化钡沉淀法
样品中的硫酸盐与氯化钡试液作用生成白色硫酸钡沉淀。

称取待检样品10克于250毫升的烧杯中，加30ml蒸馏水，充分搅拌后，静置10分钟，过滤，取滤液10ml，在滤液中加入10%氯化钡试液，即生成白
色沉淀物，加入10%稀硝酸溶液。

如白色沉淀物不溶解，则表示被检测的样品中掺有硫酸盐类物质。

2.2 乙酸铅沉淀法
样品中的硫酸盐与乙酸铅试液作用生成白色硫酸铅沉淀。

称取待检样品10克于250毫升的烧杯中，加30ml蒸馏水，充分搅拌后，静置10分钟，过滤，取滤液10ml，在滤液中加入10%乙酸铅试液，即生成白色沉淀屋。

吸去上清液，加入10%乙酸铵试液2毫升。

如白色沉淀物溶解。

则表示被检测的样品中掺有硫酸盐类物质。

3.磷酸盐的检测
称取待检样品10克于250毫升的烧杯中，，加30ml蒸馏水，充分搅拌后，静置10分钟，过滤，取滤液10ml，加入2~3滴稀硝酸，在酸性条件下，加入0.5~1ml钼酸铵试液，加热，生成黄色磷钼酸铵沉淀，该沉淀能溶于氢氧化钠和氨水试液。

八、鱼粉中掺入禽粪的检测
禽粪中含有尿酸，若饲料中混入或掺入禽粪，则可通过检测尿酸确认。

置少许待检样品于蒸发皿中，加入l＋l硝酸充分湿润，在水浴锅上蒸干，若有尿酸存在；则被检样品外围呈红褐色，滴下稀氨水时呈紫色，此种呈色反应称为紫尿酸铵（Murexide）反应。

九、鱼粉中掺入羽毛粉的检测
（l）取 2份各 1克待检样品分别加入两只 500毫升三角瓶中，一瓶加1.25％H2SO4液 100毫升；另一瓶加 5％NaOH液 100毫升，划线后煮沸 30分钟（微火，并不断添加蒸馏水以保持煮沸的酸碱浓度），静置，弃去上清液、用接种棒蘸取两瓶中残渣少许分别置两个载玻片上；要求薄层摊开。

在50-100倍显微镜下观察。

观察可见，经1.25％H2SO4处理的残渣，掺入由浅色羽制得的水解羽毛粉，颜色呈金黄色；掺入由深杂色羽制得的水解羽毛粉，颜色是深褐至黑色。

其镜下主要特征是:完全水解的羽毛粉呈半透明微粒状，像松香颗粒，颜色以黄为主，夹有灰色、褐色或黑色颗粒；光照有反光。

水解不完全的羽毛粉，羽干像半透明塑料管（有时为空心竹节状），呈黄、白至褐色，长短不一，表面光滑、透明、羽毛脱落处多有锯齿边，加热过度者消失。

羽支呈长、短碎片，蓬松，半透明，光泽暗淡，呈白或黄色，若加热过度呈黑色。

羽小支呈粉状，白色或呈奶油色，40倍显微镜下为小而松脆的碎片，有光泽并结团。

羽根呈圆扁管状，黄至褐色，粗糙。

坚硬，有光滑的边。

一般优质水解羽毛粉，上述结构特点往往多被破坏，呈碎玻璃样小粒。

所以镜检时应仔细搜索未水解羽毛或水解不完全羽毛，以利鉴别。

然而经5％NaOH处理的被检样品，因全部被溶，故无法见到任何羽毛痕迹。

（2）称取待检样品10克于100毫升烧杯中，加入四氯化碳80毫升、搅拌后静置沉淀。

将漂浮层倒入滤纸过滤，滤物用电吹风吹于。

取少许风干滤物置载玻片上，于30～50倍显微镜下观察，除见有表面粗糙．具纤维结构的
鱼肉颗粒外，若掺有羽毛粉者，尚可见或多或少的羽毛、羽干和羽管（中空、半透明）。

经水解的羽毛粉，有的形同玻璃碎粒，质地如塑胶，呈灰褐或黑色。

（3）称取待检验样品1克放置于500毫升锥形烧瓶中，加入50毫升5%NaOH 溶液，煮沸30分钟后，加100毫升蒸馏水，用滤纸（No.6）过滤，取此滤液5—10毫升置于培养皿，将2%醋酸铅溶液滴下时，如果待检验样品含有羽毛粉，则产生黑色之沉淀。

鱼粉中混有羽毛粉（10%以上）时，可用之。

十、鱼粉中掺入兽骨的检测
称取待检验样品2克放在蒸发皿内，加3毫升孔雀石绿试液，在水浴上蒸干，用乙醇和水洗，洗净后，用实体显微镜或放大镜观察着色状态。

兽骨几乎不着色
蒸制骨粉呈鲜艳的青色
鱼骨（明太鱼）呈青绿色
鱼骨（大金枪鱼）呈黑绿色
孔雀石绿试液配制：称取0.2克孔雀石绿溶于100毫升乙醇。

十一、鱼粉中腐败物的检测
（1）称取待检验样品5克置于200毫升烧杯中，加入50毫升冰醋酸与氯仿（30：20 V/V）之混合液，再加入1毫升之饱和碘化钾溶液后，振动约1分钟，如果水层呈紫色时，则表示有腐败物之存在。

（2）称取待检验样品5克置于250毫升三角瓶中，加入50毫升硫酸溶液（此系5毫升浓硫酸加入于45毫升蒸馏水中）。

次将浸有饱和醋酸铅溶液之湿滤纸（50×6mm）左右，垂吊于栓塞上，但注意不要使滤纸触及硫酸液面。

如此于室温放置16小时。

如果待检验样品有腐败物时，滤纸会急速变黑。

此项检查虽不能明确的判知其毒性，但如有强烈的呈黑色时，已不适用为饲料。

单位名称：广东新粮实业有限公司新粮饲料厂
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传真：（0750）6318093 6691560
作者简介：
蒋郁朝（1961-）：男，广东新会人，高级畜牧师，1982年华南农业大学畜牧专业毕业，现主要从事动物营养和饲料配方等方面研究工作。