第十章 分枝杆菌属、诺卡菌属、放线菌属鉴定

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微生物检验学之分枝杆菌属及检验

微生物检验学之分枝杆菌属及检验

分枝杆菌属及检验分枝杆菌属是一类细长或略带弯曲、为数众多(包括54个种)呈分支状生长的需氧杆菌。

因其繁殖时呈分支状生长故称分枝杆菌。

本属细菌的主要特点是细胞壁含有大量脂类,可占其干重的60%,这与其染色性、抵抗力、致病性等密切相关。

耐受酸和抗乙醇,一般不易着色,若经加温或延长染色时间而着色后,能抵抗3%盐酸乙醇的脱色作用,故又称抗酸杆菌。

需氧生长,无鞭毛,无芽胞和荚膜。

引起的疾病均为慢性,有肉芽肿病变的炎症特点。

分枝杆菌的种类较多,包括结核分枝杆菌、非典型分枝杆菌和麻风分枝杆菌。

非典型分枝杆菌是一大群分枝杆菌的总称,与人类有关的非典型分枝杆菌主要有堪萨斯分枝杆菌、海分枝杆菌、瘰疬分枝杆菌、戈分枝杆菌、鸟分枝杆菌、蟾分枝杆菌、龟分枝杆菌、偶发分枝杆菌和耻垢分枝杆菌等。

本属细菌无内外毒素,其致病性与菌体某些成分如索状因子、蜡质D及分枝菌酸有关。

根据国际分枝杆菌分类研究组(IWGMT)的方案将本属细菌分为三类,即缓慢生长菌、迅速生长菌和不能培养菌。

一、结核分枝杆菌在我国引起人类结核病的主要有人型和牛型结核分枝杆菌。

(一)生物学特性1.形态与染色结核分枝杆菌为细长或略带弯曲的杆菌。

在培养基中可呈球状或丝状,陈旧培养物或干酪化的淋巴结中可见到分枝状。

抗酸染色时因菌体含有大量脂类而不易着色,无论是否经碘液处理,着色后均不易被盐酸乙醇脱色,所以使菌体呈红色。

本菌无芽胞、无鞭毛,近年发现有荚膜。

2.培养特性本菌专性需氧,在无氧条件下迅速死亡,在5%~10%CO2环境中可刺激其生长。

烛缸不适合本菌培养,需用二氧化碳培养箱。

培养温度适应范围较大,35~40℃均可生长,最适温度为35~37℃。

最适pH为6.5~6.8。

兼性胞内寄生菌,在细胞内外均可发育繁殖,强毒株可长期生存于巨噬细胞内。

生长时还需适当的湿度。

本菌生长缓慢,最快的分裂速度为18小时一代。

在固体培养基上,一般需2~6周才能长出菌落。

菌落呈干燥颗粒状,不透明,乳白色或米黄色,表面呈皱纹状,形似菜花。

分枝杆菌属、诺卡菌属、放线菌属鉴定—分枝杆菌属的共性(微生物检验课件)

分枝杆菌属、诺卡菌属、放线菌属鉴定—分枝杆菌属的共性(微生物检验课件)
❖ 抗酸染色法(acid-fast stain) :以5%石 炭酸复红加温染色,再用3%盐酸酒精脱 色,然后用美蓝复染,则分枝杆菌呈红色 (+),其他细菌和背景物质为蓝色(分枝生长的趋 势而命名
❖ 主要特点
细长弯曲,分枝状生长 细胞壁含有大量脂质(分枝菌酸) 常用抗酸染色鉴定,呈抗酸染色阳性 引起疾病都呈慢性,并伴肉芽肿
❖ 分类
结核分枝杆菌复合群 非结核分枝杆菌 麻风分枝杆菌
抗酸染色
❖ 由于细菌细胞壁中含大量脂质,一般不易 着色,若经加温或延长染色时间而着色后 又能抵抗强脱色剂盐酸酒精的脱色,故又 称抗酸杆菌(acid-fast bacilli)

第章 分枝杆菌属

第章 分枝杆菌属

分枝杆菌属分枝杆菌属(Bacillus)是一类芽孢杆菌科中的细菌属,是一种常见的细菌。

分枝杆菌属细菌的形态为革兰氏阳性,有芽孢,不运动。

分枝杆菌属细菌存在于自然界中的土壤、水、空气、动植物沙门氏菌以及人体消化道中等地方。

此外,分枝杆菌属细菌还是许多纤维素降解菌之一,有着重要的应用价值。

1. 发现历史分枝杆菌属的物种首先被德国微生物学家F. Cohn于1872年所描述。

分枝杆菌属名称来源于拉丁语Baculum(杆子)而得名。

起初,包括芽孢杆菌属(Sporolactobacillus)和马铃薯杆菌属(Solanum)在内的多个属别被归于分枝杆菌属之下。

到了20世纪30年代,随着生物学的发展以及生物化学研究的深入,分枝杆菌属内部结构不断明朗起来。

1953年,福克勒(Foukceler)首次使用荧光染色技术,证实了分枝杆菌属细胞内有芽孢的产生,并为之制定了现代概念。

目前,分枝杆菌属内部物种的划分还在持续调整之中。

2. 特征2.1 形态学特征分枝杆菌属细菌形态为革兰氏阳性菌杆,大小为0.5 ~ 1.2 µm × 2 ~ 10 µm,杆状或为不规则形状。

除了胶孢杆菌属之外,其他细菌均不产生胶质囊或鞭毛等结构,而且周围亦不具有较多的纤毛或糖胶成份。

芽孢的形成是分枝杆菌属的一个显著特征。

分枝杆菌属细胞在恶劣环境条件下,通过细胞内分裂并将核质分割成若干形状不一、结构各异的小体,然后将其包裹在亚细胞层次的膜结构内,最终形成成熟的芽孢。

2.2 生理生化特征分枝杆菌属细胞在吸取营养和能量方面非常多样化,能够利用许多有机物和少数无机物。

分枝杆菌属能产生许多酶,包括外排酶、代谢酶、溶解酶等,具有泛酸稳定性。

此外,分枝杆菌属能抵抗许多化学物质和物理条件的影响,能生长于广泛的嗜酸或嗜碱环境中,也能在较高的温度下繁殖。

2.3 分类根据细胞结构、代谢特征及生命周期等特征,目前分枝杆菌属细菌被分为16个物种。

《医学免疫学与医学微生物学》课件第十九章分枝杆菌、放线菌、诺卡菌属【67页】

《医学免疫学与医学微生物学》课件第十九章分枝杆菌、放线菌、诺卡菌属【67页】

世界防治结核病日
1882年3月24日,德国科学家罗伯特·科赫 (郭霍)宣布发现结核杆菌是导致结核病的病原 菌,从而给防治结核病带来突破。此后,随着抗 结核药物研制成功,结核病的流行得到有效控制, 并在一些地区绝迹。
在纪念郭霍氏发现结核菌100年之际,1982年在 国际防痨和肺病联合会及世界卫生组织的倡议下, 将每年的3月24日定为“世界防治结核病日”。
第一节 结核分枝杆菌
❖ 目前结核病是世界上最普遍和最严重的人类传 染病之一,全球人口的1/3感染了结核菌。死亡 人300万/每年。
❖ 对人有致病性的主要为人型、牛型和非洲型, 我国为结核大国,居世界第二位(解放前为世界 之首)。
❖ 耐药菌的增加、流动人口的增加、艾滋病、吸 毒、贫困、麻痹心理等原因 使结核病在二十 世纪末死灰复燃。
干酪样肺炎
慢性纤维空 洞性肺结核
Im X光N 片a 诊o 断ge
正常胸部 (右侧 )
右侧浸润型肺结核
No Image
2、肺外结核
肠结核,结核性脑膜炎,皮肤结核,肾结核,骨 结核等
双重感染
同时感染人类免疫缺陷病毒(HIV)与 结核菌的人称为双重感染者。其病死率 高,对人类健康与生命均构成严重威胁。
No Image
No Image
生化反应
❖ 不发酵糖类

触酶试验 热触酶试验
结核分枝菌 +
-
非结核分枝菌 +
+
抵抗I 力m :因N 其细a 胞壁o 中g 含有大e 量的脂质,可防
止菌体水分的丢失,故对干燥有较强的抵抗力,在 干燥的痰内可存活6—8个月。
❖ 四怕 湿热 紫外线 乙醇 抗痨药物(链霉素、 异烟肼、利福平等)

第十章 分枝杆菌属、放线菌属与诺卡菌属

第十章 分枝杆菌属、放线菌属与诺卡菌属

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③疾病类型:(两型、两类) 瘤型(细胞免疫缺损,传染性强); 结核样型(细胞免疫正常,传染性小); 界线类 未定类
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病人的细胞免疫功 能低下或免疫抑制 ,故麻风分枝杆菌 能在体内繁殖,病 人血清中自身抗体 含量高,免疫复合 物沉积,形成结节 型红斑或疣状结节 ,面部结节融合可 呈“狮面”状。
7
罗氏培养基上的 菌落特征(4周)
8
结核杆菌培养
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• (三)抵抗力(四不怕)
• • • • 对干燥的抵抗力特别强 耐酸碱、耐化学消毒剂 对碱性染料有抵抗力 对青霉素等抗生素耐药
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• (三)抵抗力(四怕)
• • • • 对乙醇敏感 对湿热敏感 对紫外线敏感 对抗痨药敏感(链霉素、异烟肼、利福平等),易 耐药。
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• 2.原发后感染(继发感染): 多发生于成年人:已有免疫力
病灶多局限(多见于肺尖)
干酪样坏死物液化随痰排出,传染性强
21
22
• 三、免疫性与超敏反应 • (一)免疫性: • 结核杆菌是胞内感染菌,其免疫主要是以T细胞为主 的细胞免疫,抗体只能对胞外细菌起作用。 • 结核的免疫属于感染免疫(infection immunity), 又称有菌免疫。
• (一)致病物质
• 不产生内、外毒素,无侵袭性酶。其致病性可能与 细菌在组织细胞内大量繁殖引起的炎症,菌体成分和代 谢物质的毒性以及机体对菌体成分产生的免疫损伤有关。 • 与致病性有关的致病物质是菌体成分: 脂质 蛋白质 荚膜
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• 1.脂质: • 磷脂:促进单核细胞增生,形成结核结节和干酪 样坏死 • 索状因子:损伤线粒体,影响细胞呼吸,引起慢 性肉芽肿 • 蜡质D:佐剂作用,激发机体产生IV型超敏反应 • 硫酸脑苷脂:抑制吞噬体和溶酶体融合,延长细 菌在吞噬细胞中的存活时间。

分枝杆菌属、诺卡菌属、放线菌属鉴定—结核分支杆菌(微生物检验课件)

分枝杆菌属、诺卡菌属、放线菌属鉴定—结核分支杆菌(微生物检验课件)

变异性
❖ 形态结构变异:
结核杆菌的L型:颗粒状、丝状、Much颗粒
❖ 毒力变异:
卡介苗BCG:Calmette和Guérin将牛分枝杆菌经13年 230次传代而获得的减毒活疫苗株
❖ 耐药性变异:
耐异烟肼及其他抗结核药物的结核菌株日益增多
二、致病性
荚膜 与细胞表面受体结合(粘附与入侵作用) 致

保护(阻止有害物质的进入菌体)
物 脂质

索状因子(破坏细胞,引起肉芽肿)
磷脂(形成结核结节)
硫酸脑苷脂(抑制吞噬体与溶酶体结合)
蜡质D(引起迟发性过敏反应)
蛋白质 引起迟发性过敏反应
所致疾病
❖ 感染方式
呼吸道、消化道或皮肤损伤侵入机体
❖ 所致疾病
结核病,以肺结核常见
肺部感染
❖ 原发感染:外源性感染 多发生于儿童(无免疫力) 原发综合征 ( 肺门淋巴肿大等) 形成结核结节(即结核肉芽肿),少数病灶扩散,引起全身TB 转归
4、动物试验 :取经浓缩集菌处理的标本1.0毫升注射于豚鼠腹股沟皮 下,经3~4周饲养观察,如出现局部淋巴结肿大,消瘦或结核菌 素试验阳性,可及时剖检; 若观察6~8周后,仍未见发病者,也要剖检。剖检时应注意观 察淋巴结、肝、脾、肺等脏器有无结核病变。
5、基因诊断:涂片检查需 5×103-4/ml,培养需1×102/ml,标本 中菌数少于此值不易被检出,PCR技术用于快速检测,少至每ml 几个细菌均能检出,且速度很快,因此应用前景比较广泛。但由 于实验器材的污染易出现假阳性。
培养
❖ 特点
专性需氧 生长缓慢 营养要求高,常用罗氏培养基
❖ 生长现象
液体:表面生长(菌膜) 固体:颗粒、结节、花菜状菌落,乳白

分枝杆菌属、诺卡菌属、放线菌属鉴定—放线菌属(微生物检验课件)

分枝杆菌属、诺卡菌属、放线菌属鉴定—放线菌属(微生物检验课件)
Fra bibliotek 致病性与免疫性
属正常菌群 ❖ 主要引起内源性感染 ❖ 导致软组织的化脓性炎症,若无继发感染大多呈慢性无痛
性过程,并常伴有多发性瘘管形成 ❖ 与龋齿和牙周炎有关
诊断
❖ 硫磺样颗粒
放线菌属
❖ 分类
含分枝菌酸:诺卡菌属、分枝杆菌属、棒状杆菌属 不含分枝菌酸:放线菌属
放线菌属(Actinomyces)
❖ 主要致病菌——衣氏放线菌(A. israelii) ❖ 生物学性状
G+、非抗酸性丝状菌 培养困难,厌氧或微需氧 硫磺样颗粒(菌落)
压片或组织切片,显微镜下可见颗粒呈菊花状
硫磺样颗粒(sulfur granule)

《微生物学检验》课件——第十四章 分枝杆菌、放线菌与诺卡菌属

《微生物学检验》课件——第十四章  分枝杆菌、放线菌与诺卡菌属
3 掌握 结核分枝杆菌的主要生物学特性及检验方法、鉴定依据。 非结核分枝杆菌的主要生物学特性、检验方法及与结核分枝杆 菌的鉴别。
acid-fast bacillus
分枝杆菌属
(分 枝 杆 菌 又 称 抗 酸 杆
)菌
分 枝 杆

结核 分枝 杆菌
结核 分枝 杆菌
结核 分枝 杆菌
结核 分枝 杆菌
PART 01
形态学检查 (需观察整个涂片;或至少300个视野) – 直接涂片、染色镜检 :齐-尼抗酸染色或金胺
“O”荧光染色,找到抗酸阳性菌即可初步报告“ 找到抗酸杆菌” – 浓缩集菌涂片镜检
三、微生物学检验
(二)检验方法
分离培养 (标本接种前需经酸碱处理) – 固体培养基培养法:常用罗-琴培养基,37℃,5%~10%CO2
培养8周,观察菌落特征
结果:3d有菌(污染菌);7d有菌(非结核分支杆菌); 7d后(结核 分枝杆菌);8周后无菌为阴性。
– 快速培养法 :分枝杆菌快速培养系统(Bactec-460、 MB/BacT)
试验方法:受试者前臂曲侧皮内注射PPD 5U, 48—72小时后观察结果。
二、临床意义
结果及意义:
阴性反应 注射部位无硬结或硬 结直径小于5mm。表 示未感染过结核分枝 杆菌,对结核分枝杆 菌无免疫力或机体细 胞免疫功能低下。
阳性反应 注 射 部 位 硬 结 515mm , 表 示 感 染 过 结核分枝杆菌或接种 过 BCG , 对 结 核 分 枝 杆菌有一定免疫力。
结核分枝杆菌
结核分枝杆菌
• 概念:结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)简称 结核杆菌,是引起人和动物结核病的病原菌。对人类致病的结 核分枝杆菌以人型结核分枝杆菌感染率最高。

放线菌属与诺卡菌属

放线菌属与诺卡菌属
发性脓肿和瘘管形成。 脑膜炎和脑脓肿 肺部感染:症状和体征类似肺结核。
腹部感染: 常能触及腹部包块与腹壁粘连,出现便血和
排便困难。 盆腔感染:多继发于腹部感染 。 原发性皮肤放线菌病: 常由外伤或昆虫叮咬所致。 龋齿和牙周炎: 与内氏和黏液放线菌感染有关。
三、微生物学检验法
• 肉眼观察: 在脓汁、痰液和组织切片中寻找硫磺样颗粒。 • 显微镜检验 将标本中可疑硫磺样颗粒制成压片,革兰染色,在
[4] Gabriela Gago, Lautaro Diacovich, Hugo Gramajo. Fatty acid biosynthesis in actinomycetes. FEMS Microbiology Reviews. 2023; 35:475–497
[5] John W. Wilson. Nocardiosis: Updates and Clinical Overview. Mayo Clinic Proceedings. 2023; 87:403-407
放线菌属与诺卡菌属
本章节要点和难点
要点: 1.掌握放线菌旳主要特征。 2.掌握放线菌属和诺卡菌属旳生物学特征、所致疾 病特点、微生物学检验及防治原则。 难点: 放线菌旳形态构造特征及在微生物分类中旳地位。
放线菌旳特征
• 呈分枝状生长、革兰染色阳性旳原核细胞 型微生物。
• 广泛分布于自然界,种类繁多,有53个属。 • 绝大多数不致病,致病性放线菌主要为放
生素或磺胺类药物治疗,一般不少于6周
复习思索题
1. 放线菌旳主要生物学特征有哪些?和抗生 素有何关系?
2. 致病性放线菌属旳感染及致病有何特点? 3. 致病性诺卡菌属旳种类及其致病特点?
中英文关键词

分枝杆菌属细菌检验ppt课件

分枝杆菌属细菌检验ppt课件

(3)结果 48h-72h ,根据注射部位是否出现红肿判5mm为强阳性
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第一节 分枝杆菌属
一、结核分枝菌
(4)结核菌素试验意义 选择卡介苗接种对象、测定卡介苗接种后的免疫效果 了解人群结核菌的自然感染率 作为婴幼儿结核病的辅助诊断 测定肿瘤患者的细胞免疫功能
第一节 分枝杆菌属
检验程 序
涂片抗酸 染色镜检
标本 标本前处理
核酸 检测
抗体 检测
接种液体 培养基
接种固体培养基 可疑菌落
慢性生长菌
快速生长菌
接种小白鼠 豚鼠
脏器涂片 镜检
菌种鉴定
抗酸染色
鉴定试验
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第一节 分枝杆菌属
一、结核分枝菌
4.形态学检查 (高压灭菌后进行)
(1)直接涂片染色镜检 (2)浓缩集菌涂片检查法 (3)荧光染色:观察形态 黄绿色、橙色荧光 (4)初步报告:检出抗酸分枝杆菌(结核杆菌?)
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第一节 分枝杆菌属
一、结核分枝菌
(2)蛋白质 诱发超敏反应 (3)糖类 抵抗吞噬作用 2.所致疾病 (1)经多途径感染,引起全身各组织结核病,以肺结核最多见 (2)类型 原发感染和继发感染 3.免疫性 抗结核免疫以细胞免疫为主
※抗结核免疫属带菌免疫或称传染性免疫 ※抗结核免疫与Ⅳ型超敏反应同时出现
微生物学检验
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分枝杆菌属、诺 卡菌属、放线菌属鉴定
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本章内容
1 第一节 分枝杆菌属 2 第二节 诺卡菌属 3 第三节 放线菌属
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病原生物学与免疫学 第十章

病原生物学与免疫学 第十章
3.荚膜 荚膜的主要成分为多糖,部分为脂质和蛋白质。其致病作用包括:①
抗吞噬作用:能抑制吞噬体与溶酶体融合,使侵入的病原菌逃离溶酶 体的杀伤与消化。② 黏附作用:荚膜能与吞噬细胞表面的C3b受体结 合,有助于结核分枝杆菌的黏附、侵入。③ 荚膜可阻止药物及化学物 质透入菌体内。
第一节 结核分枝杆菌
第一节 结核分枝杆菌
二、致病性与免疫性
2.原发后感染
原发后感染多见于成人。结核分枝杆菌可以是外来的(外源性感染)或潜伏在病 灶内的(内源性感染)。
由于机体已有特异性细胞免疫,故结核分枝杆菌的感染有较强的局限能力,一般 不累及邻近的淋巴结。被纤维囊包绕的干酪样坏死灶可钙化,使患者痊愈。若干 酪样坏死被液化,排入邻近支气管,大量结核分枝杆菌可随痰排出体外,具有很 强的传染性。
(1)结核菌素试剂 以往使用较广的是旧结核菌素(old tuberculin,OT),是结核分枝杆菌肉汤培养
物经杀菌、过滤、浓缩而成。目前使用的为纯蛋白衍生物(purified protein derivative,PPD)。
第一节 结核分枝杆菌
二、致病性与免疫性
(2)试验方法与意义 常规试验取OT或PPD 5个单位注入受试者前臂屈侧皮内,48~72小时观察结果。
如局部出现红肿硬结直径>5 mm者为阳性,表明机体曾感染过结核分枝杆菌或已 建立迟发型超敏反应,但不一定发病,接种过卡介苗者也可呈阳性。 如局部无红肿硬结或红肿硬结<5 mm者为阴性,表明机体未曾感染过结核分枝杆 菌,但应考虑以下情况:① 感染初期;② 老年人反应低下;③ 严重结核病患者或 正患有其他传染病如麻疹等;④ 继发性细胞免疫功能低下,如用过免疫抑制剂的艾 滋病或肿瘤患者等。 如局部红肿硬结>15 mm者为强阳性反应,表明可能有活动性结核,应进一步追查 病灶。
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3.培养:
•营养要求:不高(沙氏或普通琼脂培养基) •气体环境:需氧,有气生菌丝 •培养温度:室温或37℃
•生长速度:缓慢生长,约1w
•色素:星形诺卡菌:黄色或深橙色,无白色菌丝 巴西诺卡菌:有白色菌丝
•菌丝断裂: 5d后→链球状或链杆状(放线菌属:24h开始)
•培养特征:菌落:有皱褶、颗粒状 •液体:菌膜
(3)耐药性变异:
耐异烟肼及其他抗结核药物的结核菌株日益增多
第一节 分枝杆菌属
一、结核分枝菌
(二)微生物检验
1.标本:根据感染部位的不同来采集不同的标本,最常用痰液 标本 2. 标本前处理
目前有酸(4%HCl)处理和碱(4%NaOH)处理两种方法
3.检验程序
第一节 分枝杆菌属
检验程 序 标本 标本前处理
一、结核分枝菌
5.分离培养 L-J斜面或平板:生长缓慢,涂片抗酸染色 快速培养系统:自动报告 6.核酸检测:PCR法
第一节 分枝杆菌属
一、结核分枝菌
(三)临床意义
1.致病物质:主要与菌体成份有关。 (1)脂质
索状因子:与该菌毒力有密切关系 分枝菌酸:与抗酸性有关 蜡质D:具有佐剂作用 硫酸脑苷脂:阻碍吞噬 磷脂:促类上皮细胞形成
龋齿放线菌(A.adontolyticus)
第三节 放线菌属
3.培养:厌氧或微需氧
• 气体环境:5% CO2 • 培养基:脑心浸液琼脂平板 • 温度与时间:37℃,24h~48h • 菌落:灰白色蜘蛛状、不规则结节状或臼齿状菌落, 初次分离时 (粗糙) 4.生化特性:葡萄糖(+) 甘露醇(+)吲哚(-) 溶血(-) 触酶
第一节 分枝杆菌属
结核菌菌落
结核菌抗酸染色结果
第一节 分枝杆菌属
一、结核分枝菌
3.生化反应 •不发酵糖类,触酶试验阳性,而热触酶试验阴性——加热68℃散失 活性(区别非结核菌) •烟酸合成试验、硝酸盐还原试验、吡嗪酰胺试验均阳性,可与牛型 结核分枝菌鉴别 4.抵抗力
•对乙醇、湿热、紫外线、抗结核药物(链霉素、异烟肼、利福平等) 敏感
菌区别
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第三节 放线菌属
一、放线菌属
1.致病:放线菌能引起牛和人的放线菌病(Actinomycosis)的病
原菌,属于内源性感染。因菌落生长呈放射状而得名。
2.常见种类: 衣氏放线菌(A.israelii) (最多见) 牛放线菌(A.bouis) 内氏放线菌(A.naeslundii)
黏液放线菌(A.viscous)
第二节 诺卡菌属
(三)星形诺卡菌
4.鉴定:
(1)“硫磺样颗粒”压片 (2)取痰、脑脊液、脓汁 涂片→革兰染色及抗酸染色
(3)分离培养 沙保弱或普通琼脂培养基
(4)生化试验
第二节 诺卡菌属
(四)巴西诺卡菌
• 巴西诺卡菌及星形诺卡菌因侵入皮下组织,引起慢性化脓性
肉芽肿,表现为皮下肿胀、脓肿及多发性瘘管,如发生于足 部或腿部,称足分枝菌病(Mycotoma)。 本病也可能由马 杜拉放线菌及某些真菌引起 • 该菌七叶苷、黄嘌呤、肌醇、甘露醇均阳性,可与星形诺卡
•脓肿诺卡菌 •新星诺卡菌 •豚鼠耳炎诺卡菌 •巴西诺卡菌 •短链诺卡菌 星形诺卡菌 非洲诺卡菌 少食诺卡菌 假巴西诺卡菌 南非诺卡菌
•肉色诺卡菌
•皮瘟诺卡菌
老兵诺卡菌
诺卡菌属主要形成基内菌丝,菌丝纤细,一般无气生菌丝。少 数菌产生一薄层气生菌丝,成为孢子丝。基内菌丝和孢子丝均有横 隔,断裂后形成不同长度的杆形
涂片抗酸 染色镜检
接种液体 培养基
核酸 检测
抗体 检测
接种小白鼠 豚鼠 脏器涂片 镜检
接种固体培养基
可疑菌落
慢性生长菌
快速生长菌
菌种鉴定
抗酸染色
鉴定试验
第一节 分枝杆菌属
一、结核分枝菌
4.形态学检查 (高压灭菌后进行)
(1)直接涂片染色镜检 (2)浓缩集菌涂片检查法 (3)荧光染色:观察形态 黄绿色、橙色荧光 (4)初步报告:检出抗酸分枝杆菌(结核杆菌?)
第二节 诺卡菌属
一、诺卡菌属
(二)生物学特性
1.专性需氧
2.菌体内含分枝菌酸 3.分布:土壤中,多数为非致病菌
4.常见致病菌:
星形诺卡菌(N. asteroides) 巴西诺卡菌(N. brasiliensis)
豚鼠诺卡菌(N. caviae)
5.培养:菌落表面多皱、致密、干燥或湿润,呈黄、黄绿、橙红等色。 用接种环一触即碎
试验(-)(黏液放线菌除外)
第三节 放线菌属
放线菌菌落特点
第三节 放线菌属
5.鉴定
(1)形态染色 G+、非抗酸性丝状菌
(2)培养困难,厌氧或微需氧
(3)生化反应 不典型 (4)硫磺样颗粒(菌落) 压片或组织切片,镜下见颗粒呈菊花状
硫磺样颗粒(sulfur granule)
第三节 放线菌属
6.临床意义
为正常菌群,如无并发感染一般为慢性无痛性经过(放线菌病)
常可引起脓肿和瘘管
脓肿或瘘管内容物可检出“硫磺样颗粒”
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第二节 诺卡菌属
(三)星形诺卡菌
1.形态:球形、丝状(与以色列放线菌相 似,但末端不膨大) 革兰染色:阳性
美蓝染色
抗酸染色:阳性 脱色时间延长→阴性(与TB区别)
2. 类似“硫磺样颗粒”(称色素颗粒)
渗出液、痰或脓汁中有时可见ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ黄、 红色或黑色小颗粒
G+丝状,弱抗酸性
第二节 诺卡菌属
(三)星形诺卡菌
一、结核分枝菌
4.结核菌素试验
(1)原理 用结核菌素进行皮肤试验,以检测受试者对结核 杆菌是否有细胞免疫及迟发型超敏反应的试验。
(2)结核菌素试剂 (PPD 5单位)旧结核菌素(old tuberculin,OT),纯蛋白衍化物(purified protein derivative,PPD) (3)结果 48h-72h ,根据注射部位是否出现红肿判断结果 <5mm为阴性
•对干燥、酸(3% HCl或6% H2SO4) 或碱(4% NaOH)、碱性染料(孔雀 绿、结晶紫)、青霉素等抗生素等有抵抗力
第一节 分枝杆菌属
一、结核分枝菌
5.变异性
(1)形态结构变异:
结核杆菌的L型:颗粒状(Much颗粒——病灶中革兰阳性非 抗酸性)、丝状
(2)毒力变异:
卡介苗(BCG):Calmette和Guérin将牛型分枝杆菌经13年 230次传代而获得的减毒菌株——活疫苗
(Mlvium complex ,MAC) 、玛尔摩分枝杆菌、溃疡分枝杆菌
第 Ⅳ 组( Runyon Ⅳ 群):迅速生长菌:龟分枝杆菌、脓肿分 枝杆菌、偶发分枝杆菌
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第二节 诺卡菌属
一、诺卡菌属
(一)种类:诺卡菌属(Nocordio )中有22个种,广泛分布于土壤, 与医学有关的13个菌种:
•犰狳是动物感染模型
第一节 分枝杆菌属
麻 风 分 枝 菌
犰狳
第一节 分枝杆菌属
二、麻风分枝菌
2.所致疾病:
传播途径:主要是密切接触
麻风:侵害皮肤、粘膜和神经系统
临床分型:(临床表现、病理特征和菌检结果) •瘤型麻风(占20%~30%,传染性强)
•结核样型麻风(占60%~70%,传染性弱)
•界线类综合症(占5%,可转化为以上两型)
•引起疾病多呈慢性,且伴肉芽肿
第一节 分枝杆菌属
一、结核分枝菌
(一)生物学性状
1.形态与染色:G+(不易着色),细长略弯,分枝状,有荚膜,抗酸 染色阳性。菌体外有荚膜 2.培养特性 •营养要求较高,最适pH6.5~6.8,在罗氏(Lowenstein-Jensen,LJ)培养基上生长良好 •生长缓慢,14~18h分裂1次,在固体培养基上2~5w才出现肉眼可见 的菌落 •典型菌落为粗糙型,表面干燥呈颗粒状,不透明,乳白色或淡黄色, 如菜花样
•第Ⅲ组(Runyon Ⅲ群):不产色菌
•第Ⅳ组(Runyon Ⅳ群):迅速生长菌
光产色菌
第一节 分枝杆菌属
4.代表菌种
第Ⅰ组(RunyonⅠ群):光产色菌:堪萨斯分枝杆菌、猿猴分
枝杆菌 第 Ⅱ 组( Runyon Ⅱ 群):暗产色菌:蟾蜍分枝杆菌、苏加分 枝杆菌、瘰疬分枝杆菌 第 Ⅲ 组 ( Runyon Ⅲ 群 ) : 不 产 色 菌 : 鸟 分 枝 杆 菌 复 合 群
微生物学检验
国家卫生和计划生育委员会规划教材
《微生物学检验》
第十章 分枝杆菌属、诺卡菌属、 放线菌属鉴定
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本 章 内 容
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第一节 分枝杆菌属 第二节 诺卡菌属
第三节 放线菌属
学习目标及重点
学习目标:
1.掌握结核分枝杆菌生物学特征,痰涂片抗酸染色及报告。
2.熟悉结核菌素试验的临床意义;结核分枝杆菌和麻风分枝杆菌; 星形诺卡菌的鉴别要点,诺卡菌与分枝杆菌、棒状杆菌的鉴别。 3.了解结核分枝杆菌的致病物质;麻风分枝杆菌致病性;放线菌 属的生物学特性、致病及免疫性
≥ 5mm为阳性
>15mm为强阳性
第一节 分枝杆菌属
一、结核分枝菌
(4)结核菌素试验意义 选择卡介苗接种对象、测定卡介苗接种后的免疫效果 了解人群结核菌的自然感染率
作为婴幼儿结核病的辅助诊断
测定肿瘤患者的细胞免疫功能
第一节 分枝杆菌属
二、麻风分枝菌
1.生物学特性
•1873年挪威学者Armauer Hansen从麻风患者皮肤结节中发现, 又名Hansen杆菌,具抗酸性 •细胞内寄生,有麻风杆菌寄生的细胞呈泡沫状,称为麻风细胞 •体外人工培养尚未成功
本章重点: ★结核分枝菌的生物学特性、培养特性
★结核分枝菌的微生物学检验 ★结核分枝菌与其他分枝菌的鉴别
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